包含IgEFc受体α亚基胞外结构域和抗IL-4R抗体的融合蛋白及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种包含IgE Fc受体α亚基胞外结构域(FcεRIα

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含IgE Fc受体
α
亚基胞外结构域和抗IL
‑
4R抗体的融合蛋白及其应用


[0001]本专利技术涉及一种包含IgE Fc受体α亚基胞外结构域(FcεRIα
‑
ECD)和抗IL
‑
4R抗体的片段的融合蛋白二聚体；以及一种包含相同融合蛋白二聚体的用于治疗过敏性疾病的组合物。

技术介绍

[0002]过敏性疾病，例如过敏性鼻炎、特应性皮炎和包括哮喘在内的食物过敏在工业化和西方化的现代社会迅速增加，过敏性反应这种严重的过敏性疾病的发生也在增加。这些慢性免疫疾病严重危害个人的生活质量，社会经济成本也相应地飙升。因此，迫切需要采取措施来克服这些疾病。
[0003]大多数过敏性疾病是由免疫球蛋白E(IgE)的过度免疫反应引起的。IgE是正常情况下以极低浓度存在于血清中的抗体。IgE也通常由无害抗原产生。有一种情况是在没有任何特定刺激时，IgE的数量增加。这种情况可能导致过敏性疾病。异常增加的IgE可与肥大细胞、嗜碱性粒细胞等表面表达的高亲和力IgE Fc受体(FcεRI)结合。这种结合导致肥大细胞或嗜碱性粒细胞释放组胺、白三烯、前列腺素、缓激肽和血小板活化因子等化学介质。这些化学介质的释放导致过敏性症状。特别是，过敏性疾病可能由于IgE和FcεRI之间的结合而表现出恶化的症状。
[0004]目前，多种治疗过敏性疾病的方法被提出，例如过敏原回避、抗过敏药物的施用、体内IgE合成的调节和抗IgE抗体的开发等。然而，迄今为止已知的治疗方法有许多缺点，例如无法治愈过敏的根本原因、药物效力不足和出现严重副作用。
[0005]另一方面，炎性细胞因子IL
‑
4的生物学活性是由细胞表面的特异性IL
‑
4受体(白细胞介素
‑
4受体，IL
‑
4R)介导的。IL
‑
4受体有两种类型：1型，IL
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4受体α链与γc链复合；2型，IL
‑
4受体α链与IL
‑
13受体α1链复合。在这个方面，已经证明抗IL
‑
4Rα链的人单克隆抗体在临床上有效减轻和治疗哮喘、湿疹和特应性皮炎等症状。
[0006]至今为止，由再生元制药公司(Regeneron Pharmaceuticals Inc.)开发的抗hIL
‑
4Rα抗体，度普利尤单抗(dupilumab)，已于2017年获得FDA批准，并用于治疗过敏性疾病(美国专利号7,605,237)。度普利尤单抗以外的抗hIL
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4Rα抗体尚未获得批准。

技术实现思路

[0007]技术问题
[0008]因此，本专利技术人研究开发了一种新的融合蛋白的组合，用于有效治疗和预防过敏性疾病。结果证实，包含IgE Fc受体α亚基胞外结构域(FcεRIα
‑
ECD)和抗IL
‑
4R抗体的片段的融合蛋白二聚体表现出优异的IgE结合能力和优异的血清IgE水平降低效果。此外，结果证实，IL
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4和IL
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13等引发IgE超免疫反应从而诱导过敏性疾病的细胞因子的活性以浓度依赖的方式被抑制。基于以上，本专利技术通过鉴定融合蛋白二聚体可有用地用作哮喘和特应性
皮炎等过敏性疾病的治疗剂而完成。
[0009]问题的解决方法
[0010]为了实现上述目的，本专利技术在一方面提供了一种包含IgE Fc受体α亚基胞外结构域(FcεRIα
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ECD)和抗IL
‑
4R抗体的片段的融合蛋白二聚体。
[0011]本专利技术在另一方面提供了一种编码所述融合蛋白的多核苷酸、一种包含所述多核苷酸的表达载体和一种导入所述表达载体的转化细胞。
[0012]本专利技术在另一方面提供了一种生产融合蛋白二聚体的方法，包含：培养所述转化细胞；和回收融合蛋白二聚体。
[0013]本专利技术在另一方面提供了一种用于预防或治疗过敏性疾病的药物组合物，包含所述融合蛋白二聚体。
[0014]本专利技术在另一方面提供了一种用于改善或减轻过敏性症状的食品组合物，包含所述融合蛋白二聚体。
[0015]本专利技术在另一方面提供了包含FcεRIα
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ECD和抗IL
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4R抗体的片段的融合蛋白二聚体在制备治疗或预防过敏性疾病的药物中的应用。
[0016]本专利技术在另一方面提供了包含FcεRIα
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ECD和抗IL
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4R抗体的片段的融合蛋白二聚体在治疗或预防过敏性疾病中的应用。
[0017]本专利技术在另一方面提供了一种治疗或预防过敏性疾病的方法，包含给受试者施用包含FcεRIα
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ECD和抗IL
‑
4R抗体的片段的融合蛋白二聚体。
[0018]专利技术效果
[0019]本专利技术的融合蛋白二聚体包含IgE Fc受体α亚基胞外结构域(FcεRIα
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ECD)和抗IL
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4R抗体的片段，表现出优异的IgE结合能力和优异的血清IgE水平降低效果。此外，它还能引发IgE的超免疫反应，并因此具有优异的抑制IL
‑
4和IL
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13等诱导过敏性疾病的细胞因子活性的效果。此外，在功能方面，所述融合蛋白二聚体复杂地作为IgE陷阱和抗IL
‑
4R抗体，因此它可有用地用作一种用于治疗过敏性疾病的新的药物组合物，可替代传统的抗IgE抗体和抗IL
‑
4R抗体的单独治疗剂。
附图说明
[0020]图1说明了本专利技术的融合蛋白GI
‑
305(FcεRIαECD
‑
Fc
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抗IL
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4R scFv)的结构。
[0021]图2说明了通过SDS
‑
PAGE鉴定所得融合蛋白GI
‑
305所获得的结果。
[0022]图3说明了通过蛋白Western blot鉴定所得融合蛋白GI
‑
305所获得的结果。
[0023]图4为展示了通过测量本专利技术的融合蛋白GI
‑
305与人IgE的结合能力所获得的结果的图。
[0024]图5为展示了通过鉴定本专利技术的融合蛋白GI
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305作为抗IL
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4R抗体的效力所获得的结果的图。
[0025]图6和图7为展示了通过鉴定本专利技术的融合蛋白GI
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305的血清IgE水平降低作用所获得的结果的图。
[0026]本专利技术最佳实施方式
[0027]包含FcεRIα
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ECD和抗IL
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4R抗体的片段的融合蛋白
[0028]在本专利技术的一方面提供了一种包含IgE Fc受体α亚基本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种包含IgE Fc受体α亚基胞外结构域(FcεRIα
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ECD)和抗IL
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4R抗体的片段的融合蛋白。2.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白包含免疫球蛋白的Fc区。3.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述IgE Fc受体α亚基胞外结构域由SEQ ID NO:2的氨基酸序列或其片段组成。4.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述抗IL
‑
4R抗体的片段包含重链可变区包含SEQ ID NO:20的HCDR1、SEQ ID NO:21的HCDR2和SEQ IDNO:22的HCDR3；和轻链可变区包含SEQ ID NO:23的LCDR1、SEQ ID NO:24的LCDR2和SEQ ID NO:25。5.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述抗IL
‑
4R抗体的片段包含SEQ ID NO:7的重链可变区和SEQ ID NO:8的轻链可变区。6.如权利要求5所述的融合蛋白，其中所述SEQ ID NO:7的重链可变区和SEQ IDNO:8的轻链可变区由肽连接子连接。7.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白由以下结构式(I)或(II)组成：N
’‑
X
‑
连接子(1)
‑
Fc区片段或其变体
‑
连接子(2)
‑
Y
‑
C
’
(I)N
’‑
Y
‑
连接子(1)
‑
Fc区片段或其变体
...

【专利技术属性】
技术研发人员：张明浩，南受延，曹英圭，吴永珉，李炅和，吴娜贤，
申请(专利权)人：GI医诺微新，
类型：发明
国别省市：