牛乳铁蛋白在毕赤氏酵母中的异源表达及抑菌性研究制造技术

本发明专利技术公开了牛乳铁蛋白在毕赤氏酵母中的异源表达及抑菌性研究，属于生物工程领域。本发明专利技术中牛乳铁蛋白通过密码子优化，在26℃、pH 6.0的条件下，在本发明专利技术构建的重组菌中中实现了可溶性表达，表达量为40.2mg

【技术实现步骤摘要】
牛乳铁蛋白在毕赤氏酵母中的异源表达及抑菌性研究


[0001]本专利技术涉及牛乳铁蛋白在毕赤氏酵母中的异源表达及抑菌性研究，属于生物工程领域。

技术介绍

[0002]乳铁蛋白(Lactoferrin，LF，EC1.16.3.1)，是转铁蛋白家族中一种天然的、具有多种生理功能的铁结合糖蛋白，是哺乳动物非特异性免疫和获得性免疫反应重要的介导分子。乳铁蛋白主要由乳腺上皮细胞表达和分泌，在乳汁中含量较高，同时存在于一些分泌物中，如泪液、唾液、汗液等，另外还有少量存在于粘膜表面和多形核白细胞的一些颗粒中。乳铁蛋白具有多种生物功能，可以促进人体对铁的吸收，同时具有广谱的抗菌、抗病毒能力，还可以抗真菌、消炎，在抗肿瘤方面也有显著的治疗潜力。因此乳铁蛋白在食品、饲料添加剂、化妆品和医药行业中均有广阔的应用前景。
[0003]根据来源不同，乳铁蛋白可以分为人乳铁蛋白(HLF)、牛乳铁蛋白(BLF)、羊乳铁蛋白(OLF)、猪乳铁蛋白(PLF)等。人乳中的乳铁蛋白含量最为丰富，其中人初乳的乳铁蛋白含量高于5g
·
L
>‑1，成熟母乳的乳本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种重组毕赤酵母，其特征在于，含有连接有目的基因的表达载体，所述目的基因为核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的牛乳铁蛋白UBLF基因。2.如权利要求1所述的重组毕赤酵母，其特征在于，所述重组毕赤酵母是以P.pastoris GS115或P.pastoris KM71为表达宿主。3.如权利要求2所述的重组毕赤酵母，其特征在于，以pPIC9K质粒，或采用P
GAP
启动子替换P
AOX1
启动子的pPIC9K质粒为表达载体。4.如权利要求3所述的重组毕赤酵母，其特征在于，所述目的基因牛乳铁蛋白UBLF基因在重组毕赤酵母中的拷贝数为4～6。5.权利要求1～4任一所述的重组毕赤酵母的构建方法，特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)将牛乳铁蛋白基因与载体pPIC9K或与采用P
GAP
启动子替换P
AOX1
启动子的pPIC9K连接后，制备得到重组载体；(2)将获得的重组表达载体电转化到毕赤氏酵母中，制备得到重组毕赤酵母；(3)将所述重组毕赤酵母添加至含有G418浓度为4.0mg
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mL
‑1的YPD培养基中进行筛选，筛选得到目的基因的拷贝数为4～...

【专利技术属性】
技术研发人员：张荣珍，徐岩，赵慧婷，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：