一种脱细胞气管支架的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种脱细胞气管支架的制备方法，属于生物工程技术领域；首先取新鲜气管，进行预处理；将处理好的气管转移至质量体积比为1%

【技术实现步骤摘要】
MgSO4，2mM CaCl2，2000
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4000U/L DNase
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I工作溶液中在37℃恒温摇床以60rpm转速孵育12h。
[0015]本专利技术具有以下有益效果：本专利技术脱细胞法与传统DEM法相比，整个流程时间缩短至16h以内，此外脱细胞后力学强度与原生气管无明显差异、且细胞黏附效率增加。与改良真空辅助脱细胞法相比时间也缩短一半以上，且无需特殊容器装载以及使用真空泵等大型仪器，整个脱细胞生物相容性、免疫原性也同样符合组织工程学的要求。
附图说明
[0016]图1：脱细胞气管大体观；
[0017]图2：组织学染色；
[0018]图3：DAPI荧光染色(原生与脱细胞对照)；
[0019]图4：CCK
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8法测细胞接种情况；
[0020]图5：脱细胞后DNA含量；
[0021]图6：气管压缩实验力学曲线；
[0022]图7：CCK
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8细胞黏附效果。
具体实施方式
[0023]下面结合实施例对本专利技术作进一步的说明，但并本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种脱细胞气管支架的制备方法，其特征在于，所述制备方法如下：步骤(1)：原料取新鲜气管，进行预处理；步骤(2)：将步骤(1)中处理好的气管转移至质量体积比为1％
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4％的3
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[3
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(胆酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸内盐溶液中在37℃恒温摇床以60
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120rpm转速孵育1
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6h；步骤(3)：孵育后的气管用无菌PBS洗涤；步骤(4)：将洗涤完毕的气管置于含pH为8.0的Tris
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HCl缓冲液，1
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5mM MgSO4，1
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10mM CaCl2，2000
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4000U/L DNase
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I工作溶液中在37℃恒温摇床以60
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120rpm转速孵育6
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12h。2.根据权利要求1所述的脱细胞气管支架的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，无菌手术操作获取新西兰兔气管为原料，修剪多余筋膜、脂肪组织，之后将气管浸没于提前4℃预冷的加入的三抗的磷酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：史宏灿，卢毅，卢丹，孙飞，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
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