传染性腹泻病原体电化学芯片检测试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术提供了一种传染性腹泻病原体电化学芯片检测试剂盒及检测方法，具体地，本发明专利技术提供了一种多重不对称聚合酶链反应(MAPCR)与eDNAs(MAeDNAs)结合同时区分22种主要腹泻病原体和病原体亚型的检测试剂盒和检测方法。实验结果表明，本发明专利技术的检测方法和试剂盒具有高度特异性、良好的敏感性、和极高的准确性。良好的敏感性、和极高的准确性。良好的敏感性、和极高的准确性。

【技术实现步骤摘要】
传染性腹泻病原体电化学芯片检测试剂盒及检测方法


[0001]本专利技术属于体外诊断领域，具体地说，本专利技术涉及一种传染性腹泻病原体检测试剂盒及检测方法。

技术介绍

[0002]腹泻根据病因学分为感染性或非感染性腹泻。感染性腹泻是一种可预防的疾病，据估计它是5岁以下儿童死亡的前五位原因之一（1,105,406,865次发作和446,000例死亡）。1990年至2017年间，全球5岁以下儿童每100,000人腹泻死亡率下降了69.9%，其中最大的贡献来自减少接触不安全卫生设施（减少13.3%）和儿童消瘦（减少9.9%）改善以及口服补液盐的使用（增加6.9%）。在以往的研究中，发现感染性腹泻呈现出特定的时空分布，通常在空间上聚集在不同的地理位置。因此，监测腹泻疾病和鉴定病原体仍然是当务之急。
[0003]以前的研究已经确定，感染性腹泻最常见的原因是肠道的病毒、细菌或寄生虫感染。人轮状病毒(Humanrotavirus，RV)和大肠杆菌（Escherichiacoli）是中度至重度腹泻的两种最常见病原体。有五种致腹泻性大肠杆菌亚型，包括肠致病本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测传染性腹泻病原体的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括引物对组、信号探针组和捕获探针组；其中，所述引物对组包括第一引物对集和第二引物对集，所述第一引物对集包括SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.32所示的引物序列；所述第二引物对集包括SEQ ID NO.33至SEQ ID NO.44所示的引物序列；所述信号探针组包括第一信号探针集和第二信号探针集，所述第一信号探针集包括SEQ ID NO. 46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74和76所示信号探针；所述第二信号探针集包括SEQ ID NO. 78、80、82、84、86和88所示信号探针；所述捕获探针组包括第一捕获探针集和第二捕获探针集，所述第一捕获探针集包括SEQ ID NO.45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73和75所示的捕获探针；所述第二捕获探针集包括SEQ ID NO. 77、79、81、83、85和87所示捕获探针。2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，各信号探针的5
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端标记有二茂铁分子。3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，各捕获探针的3
’
端标记有C6 S
‑
S，所述捕获探针通过C6 S
‑
S以共价键的形式固定在印刷电路板金电极表面。4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括第一引物混合液，所述第一引物混合液包括SEQ ID NO.1
‑
32所示的引物。5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括第二引物混合液，所述第二引物混合液包括SEQ ID NO.33
‑
44所示的引物。6. 如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括选自下组的一种或多种试剂：Tris
‑
HCl、（NH4）2SO4、MgCl2、KCl、dNTPs 、C
‑
MMLV逆转录酶、RNA酶抑制剂、和热启动Taq酶。7.一种非诊断目的的检测传染性腹泻病原体的方法，所述方法包括步骤：（1）提供待检测样本，并从所述待检测样本中提取核酸；（2）将步骤（1）提取得到的核酸分别加入装有第一反应液、和第二反应液的PCR管中，进行多重不对称PCR扩增，分别获得第一PCR扩增产物和第二PCR扩增产物；其中，所述第一反应液中包括第一引物对集；所述第二反应液中包括第二引物对集；（3）PCR产物杂交检测将第一PCR扩增产物和第二PCR扩增产物与电化学杂交液混合后加入到电化学检测芯片上，于电化学基因芯片中进...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄志文，王世东，蒋析文，
申请(专利权)人：广州达安基因股份有限公司，
类型：发明
国别省市：