用于诊断多囊卵巢综合征不孕的代谢生物标记物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种用于诊断多囊卵巢综合征不孕的生物代谢标记物及其应用，所述生物标记物包括丁酸菌属Ornithobacterium和瘤胃球菌属Ruminococcaceae_UCG

【技术实现步骤摘要】
用于诊断多囊卵巢综合征不孕的代谢生物标记物及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种用于诊断多囊卵巢综合征不孕的代谢生物标记物及其应用。

技术介绍

[0002]多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome，PCOS)影响6
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8％的生殖年龄妇女，是最常见的内分泌疾病之一(Shi等，2012)。PCOS目前被定义为高雄激素性疾病，具有一定的体征和症状，其中必然包括排卵功能障碍(ovulatory dysfunction)和/或多囊卵巢形态(polycystic ovarian morphology)(Azziz等，2006)。PCOS也与代谢紊乱，包括胰岛素耐受，肥胖和糖尿病有关(Sam，2015)。虽然肥胖不是PCOS表型的一部分，但它加剧了葡萄糖耐受不良，血脂异常和妊娠并发症(Legro，2012)。据估计，30％
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75％的PCOS患者超重或肥胖(Diamanti
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Kandarakis，2007)，但超重感染和PCOS的关联仍然未知。
[0003]目前关于多囊卵巢综合征的分析方法主要有三种：
[0004]1、鹿特丹共识(2003版)，其要求至少满足以下三个条件中的两个：高雄激素血症、多囊性卵巢和月经失调；
[0005]2、美国国立卫生研究院的标准；
[0006]3、国际高雄激素和多囊卵巢综合征协会的标准。
[0007]以上标准具有异质性、侵入性和价格昂贵等缺点，极大阻碍了多囊卵巢综合征发病机制、精确诊断及个性化治疗的研究。
[0008]为了解决上述技术问题，本领域的技术人员试图开发出能够诊断多囊卵巢综合征不孕患者的标志物。例如，中国授权专利CN111830169B公开了一种用于多囊卵巢综合征诊断中的化合物，所述化合物为雄甾酮葡糖苷酸或鞘磷脂(d17:1/24:1)中的一种，或者所述化合为雄甾酮葡糖苷酸与鞘磷脂(d17:1/24:1)的组合。该专利技术通过超高压液相串联飞行时间质谱进行多囊卵巢综合征尿液的非靶标代谢组学研究，获得雄甾酮葡糖苷酸、鞘磷脂脂(d17:1/24:1)及他们的组合对多囊卵巢综合征有较好的诊断价值。实现了简单快速诊断多囊卵巢综合征的目的，同时降低了检测成本。
[0009]再例如，中国授权专利CN112763727B公开了一种用于多囊卵巢综合征诊断的试剂盒，其特征在于，包含检测生物标志物表达水平的试剂，所述生物标志物为酪氨酸、天门冬酰胺、瓜氨酸、苏氨酸和肌氨酸。
[0010]再例如，中国授权专利CN112229937B公开了一种用于多囊卵巢综合征诊断的试剂盒，其特征在于，
[0011]包含生物标志物的标准溶液和内标标准溶液，所述生物标志物包括胆酸、甘氨去氧胆酸和牛磺熊去氧胆酸，并且至少一种生物标志物在受试体生物样本中与对照样本中差异表达；所述受试体生物样本选自血浆或血清；所述内标标准溶液为经同位素标记的所述生物标志物溶液，同位素标记方式为2H或
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C标记；所述生物标志物任选地与临床指标结合用于诊断受试体多囊卵巢综合征亚型。
[0012]虽然现有技术中公开了一些用于诊断多囊卵巢综合征不孕患者的标志物，但是，这些标志物大多需要侵入性的取样，导致患者的接受程度较低。

技术实现思路

[0013]为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于发现与多囊卵巢综合征不孕相关的肠道菌群，通过检测所述菌群的丰度，可以为疾病的诊断提供新的思路。为了实现本专利技术的目的，拟采用如下技术方案：
[0014]本专利技术提供了一种用于诊断多囊卵巢综合征不孕的生物标记物，所述生物标记物包括丁酸菌属Ornithobacterium和瘤胃球菌属Ruminococcaceae_UCG
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014。
[0015]在本专利技术的一个优选实施方式中，所述标记物为肠道生物标记物。
[0016]本专利技术另一方面涉及一种用于诊断多囊卵巢综合征不孕的试剂盒，所述试剂盒包括检测丁酸菌属Ornithobacterium和瘤胃球菌属Ruminococcaceae_UCG
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014的丰度的试剂。
[0017]在本专利技术的一个优选实施方式中，所述试剂包括检测丁酸菌属Ornithobacterium和瘤胃球菌属Ruminococcaceae_UCG
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014的特异性的引物、探针、反义寡核苷酸、适配体或抗体。
[0018]在本专利技术的一个优选实施方式中，所述特异性引物为能够扩增丁酸菌属Ornithobacterium和瘤胃球菌属Ruminococcaceae_UCG
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014的16SrRNA的引物。
[0019]本专利技术另一方面还涉及上述生物标记物或试剂盒在制备诊断多囊卵巢综合征不孕的诊断试剂中的应用。
[0020]本专利技术首次发现了丁酸菌属Ornithobacterium和瘤胃球菌属Ruminococcaceae_UCG
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014与复发性流产相关，丁酸菌属Ornithobacterium和瘤胃球菌属Ruminococcaceae_UCG
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014在多囊卵巢综合征不孕患者中丰度显著增加，说明丁酸菌属Ornithobacterium和瘤胃球菌属Ruminococcaceae_UCG
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014可作为检测靶标应用于多囊卵巢综合征不孕的诊断和预测。
附图说明
[0021]图1是丁酸菌属Ornithobacterium和瘤胃球菌属Ruminococcaceae_UCG
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014在多囊卵巢综合征不孕患者中的丰度图。
[0022]图2:临床指标的诊断价值的ROC曲线图。
具体实施方式
[0023]为了进一步理解本专利技术，下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0024]如无特殊说明，本专利技术实施例中所涉及的试剂均为市售产品，均可以通过商业渠道购买获得。
[0025]实施例1：
[0026]1、样本的采集
[0027]选取多囊卵巢综合征不孕患者56例作为实验组，选取同期妊娠妇女20例作为对照组，后者经过严格匹配。所有标本的使用均由患者或其委托人签署知情同意书，获得了伦理委员会的审核与批准。
[0028]2、16S rRNA测序
[0029]2.1DNA的提取
[0030]使用DNA提取试剂盒自阴道分泌物中提取细菌DNA，操作步骤按说明书进行。
[0031]2.2DNA样本纯度及浓度测定
[0032]利用1％琼脂糖凝胶电泳检测基因组DNA。
[0033]2.3PCR扩增及产物纯化
[0034]采用Tr本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于诊断多囊卵巢综合征不孕的生物标记物，所述生物标记物包括丁酸菌属Ornithobacterium和瘤胃球菌属Ruminococcaceae_UCG
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014。2.根据权利要求1所述的生物标记物，所述标记物为肠道生物标记物。3.一种用于诊断多囊卵巢综合征不孕的试剂盒，所述试剂盒包括检测丁酸菌属Ornithobacterium和瘤胃球菌属Ruminococcaceae_UCG
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014的丰度的试剂。4.根据权利要求3所述的试剂盒，所述试剂盒包括检测丁酸菌属Ornithobacterium...

【专利技术属性】
技术研发人员：常惠，刘承东，韩延华，马程程，冀凡，司振民，
申请(专利权)人：黑龙江中医药大学，
类型：发明
国别省市：