一种靶向配体制造技术

本公开涉及基因工程技术领域，具体地，本公开涉及一种靶向配体。本发明专利技术提供的靶向配体与特异性小干扰RNA序列形成siRNA缀合物，靶向ANGPTL3，通过降解细胞中ANGPTL3基因的转录物，从而降低ANGPTL3蛋白表达量，因此本公开提供的靶向配体形成的siRNA缀合物可用于预防和/或治疗血脂异常疾病。和/或治疗血脂异常疾病。和/或治疗血脂异常疾病。

【技术实现步骤摘要】
一种靶向配体
[0001]本申请为分案申请，母案为PCT申请进入中国国家阶段的申请，母案申请号为2021800229023，PCT国际申请日为2021年09月30日，进入中国国家阶段日期为2022年10月18日，母案专利技术名称为“血管生成素样3的siRNA及其用途”。


[0002]本公开涉及基因工程
，具体地，本公开涉及一种新的可作为靶向配体的化合物。

技术介绍

[0003]高脂血症又称血脂异常，是脂肪代谢或运转异常，使血浆脂质高于正常值的一种全身性疾病。血脂异常的临床表现主要包括两大方面：(1)脂质在真皮内沉积所引起的黄色瘤；(2)脂质在血管内皮沉积所引起的动脉粥样硬化，产生冠心病和周围血管病等。据调查，成人中血总胆固醇(TC)或甘油三酯(TG)升高者约占10％至20％，甚至儿童中也有近10％者血脂升高。现有的治疗血脂异常的药物主要有他汀类、胆固醇吸收抑制剂、树脂类、普罗步考、贝特类和烟酸及其衍生物。
[0004]血管生成素样蛋白3(ANGPTL3，NM_014495.4)是一种主要在肝脏细胞中表达的分泌蛋白。已有研究表明，血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)是LDL
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C、HDL
‑
C和甘油三酯代谢的关键调节因子，具有多种潜在的作用节点，ANGPTL3的功能缺失突变可导致LDL
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C、VLDL
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C、HDL
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C和甘油三酯(TG)降低，从而使基于GWAS的心血管疾病风险降低，且没有已知的遗传缺陷的不良表型。因此，抑制ANGPTL3的活性可以有效预防或治疗血脂异常。
[0005]现有技术中多采用ANGPTL3抗体抑制其活性。
[0006]申请号为CN201280038908.0的中国专利中公开了一种完全人源化抗体或人抗体的抗原结合片段，其与人血管生成素样蛋白3(hANGPTL3)特异性结合，并抑制或干扰其至少一种活性。该人抗hANGPTL3抗体可用于治疗与ANGPTL3相关的疾病或失调，如高脂血症、高脂蛋白血症和血脂异常，包括高甘油三酯血症、高胆固醇血症、乳糜微粒血症等。
[0007]申请号为CN201780026147.X的中国专利中公开了用于治疗患有家族性高胆固醇血症，包括HeFH和HoFH的患者的方法。通过施用治疗有效量的特异性结合ANGPTL3的抗体或其抗原结合片段，其与其他药物组合，降低患者的至少一个脂质参数。可用于治疗高胆固醇血症，以及高脂血症、高脂蛋白血症和血脂异常，包括高甘油三酯血症、乳糜微粒血症。
[0008]相比于抗体，siRNA药物具有候选靶点丰富、研发周期短、临床开发成功率高等优点。因此，在慢性病用药方面，更具有优势。但siRNA药物自身存在的缺陷(如：稳定性差、跨膜难等)限制了其临床应用。对siRNA进行结构改造，或者构建缀合物，均可以在一定程度上提高siRNA的成药性。对于构建缀合物的组成分子进行探索，是发展用于血脂异常疾病的siRNA药物的必经之路，也是亟待解决的问题。

技术实现思路

[0009]本公开旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本公开的一个目的在于提供一种用于抑制ANGPTL3表达的siRNA，本公开的专利技术人通过设计合适的特异性小干扰RNA序列，并使其与靶向配体结合形成siRNA缀合物，靶向ANGPTL3，通过降解细胞中ANGPTL3基因的转录物，从而降低ANGPTL3蛋白表达量，因此本公开提供的siRNA可用于预防和/或治疗血脂异常疾病。
[0010]为此，本公开一方面提供一种siRNA。根据本公开的实施例，所述siRNA包括一条正义链和一条反义链，所述反义链包括与所述正义链互补配对的互补性区域，其中所述正义链选自与SEQ ID NO:1
‑
SEQ ID NO:154中每一条链的核苷酸序列区别不多于5个核苷酸的核苷酸序列，所述反义链选自与SEQ ID NO:155
‑
SEQ ID NO:308中每一条链的核苷酸序列区别不多于5个核苷酸的核苷酸序列。
[0011]本公开的专利技术人通过设计合适的小干扰RNA(siRNA)序列特异性减少肝细胞合成ANGPTL3，同时避免脱靶效应。siRNA通过形成沉默复合体(RNA
‑
induced silencing complex，RISC)，与靶标基因(ANGPTL3基因)的mRNA的序列互补配对，使靶标基因的mRNA降解从而抑制靶标基因的表达，继而降低LDL
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C、VLDL
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C、HDL
‑
C和甘油三酯(TG)的水平。
[0012]根据本公开实施例的siRNA，还可以具有以下附加技术特征的至少之一：
[0013]本公开还提供一种siRNA，所述siRNA选自如下任一组中的任一对siRNA：
[0014](1)能够特异性的靶向血管生成素样蛋白3基因序列的第60
‑
80位核苷酸；优选的，所述的siRNA的正义链选自SEQ ID NO:10，反义链选自SEQ ID NO:165；
[0015](2)能够特异性的靶向血管生成素样蛋白3基因序列的第107
‑
133位核苷酸；优选的，所述的siRNA的正义链选自SEQ ID NO:17，反义链选自SEQ ID NO:171，或者所述siRNA的正义链选自SEQ ID NO:18，反义链选自SEQ ID NO:172；
[0016](3)能够特异性的靶向血管生成素样蛋白3基因序列的第163
‑
187位核苷酸；优选的，所述的siRNA的正义链选自SEQ ID NO:19，反义链选自SEQ ID NO:173；
[0017](4)能够特异性的靶向血管生成素样蛋白3基因序列的第304
‑
388位核苷酸，优选的，能够特异性的靶向血管生成素样蛋白3基因序列的第304
‑
359位核苷酸；更优选的，所述的siRNA的正义链选自SEQ ID NO:27，反义链选自SEQ ID NO:181，
[0018]或者，所述的siRNA的正义链选自SEQ ID NO:29，反义链选自SEQ ID NO:183，
[0019]或者，所述的siRNA的正义链选自SEQ ID NO:31，反义链选自SEQ ID NO:185，
[0020]或者，所述的siRNA的正义链选自SEQ ID NO:32，反义链选自SEQ ID NO:186，
[0021]或者，所述的siRNA的正义链选自SEQ ID NO:35，反义链选自SEQ ID NO:189，
[0022]或者，所述的siRNA的正义链选自SEQ ID NO:36，反义链选自SEQ ID NO:190；
[0023](5)能够特异性的靶向血管生成素样蛋白3基因序列的第430
‑
459位核苷酸；优选的，所述的siRNA的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种化合物，其特征在于，具有以下任一种结构：2.一种化合物，其特征在于，由权利要求1所述的化合物的脱羟基保护基得到，具有以下结构之一：
3.权利要求1
‑
2任一项所述的化合物在制备siRNA缀合物中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的化合物作为靶向配体与siRNA连接。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的siRNA缀合物中的siRNA包括一条正义链和一条反义链，所述反义链包括与所述正义链互补配对的互补性区域，其中所述正义链选自与SEQ ID NO:1
‑
SEQ ID NO:154中每一条链的核苷酸序列区别不多于5个核苷酸的
核苷酸序列，所述反义链选自与SEQ IDNO:155
‑
SEQ ID NO:308中每一条链的核苷酸序列区别不多于5个核苷酸的核苷酸序列。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述siRNA包括至少一个被修饰的核苷酸；所述修饰的核苷酸选自下列至少之一：5'
‑
硫代磷酸酯基的核苷酸、5
‑
甲基化胞嘧啶核苷酸、2'
‑
O
‑
甲基修饰的核苷酸、2'
‑
O
‑2‑
甲氧乙基修饰的核苷酸、2'
‑
氟代修饰的核苷酸、3'
‑
氮取...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘兆贵，陈平，张捷婷，王芮，徐娟，付中国，张海霖，陈璞，
申请(专利权)人：纳肽得青岛生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：