新的百蕊草苷化合物及其应用制造技术

本发明专利技术提供新的百蕊草苷化合物及其应用。该百蕊草苷化合物，具有如下结构式：其中，R为：百蕊草苷A；或者百蕊草苷B。这两个新化合物均可以改变金黄色葡萄球菌的细胞膜通透性，引起生物大分子泄露以及菌液电导率的增加，从而对金黄色葡萄球菌具有良好的抗菌抑菌效果，有望单独或者组合开发成抗金黄色葡萄球菌药物用于临床。物用于临床。

【技术实现步骤摘要】
新的百蕊草苷化合物及其应用


[0001]本专利技术涉及中草药活性成分提取与应用
，具体涉及新的百蕊草苷化合物及其应用。

技术介绍

[0002]中药百蕊草(Thesium chinense Turcz)为檀香科(Santalaceae)百蕊草属(Thesium)百蕊草的干燥全草。百蕊草始记载于《本草图经》：味辛，微苦；性寒；归脾，肾经；有清热，利湿，解毒之功；主治风热感冒，中暑，肺痈，乳蛾，淋巴结结核，乳痛，疖肿，淋证，黄疽，腰痛，遗精。化学研究表明，百蕊草中含有多种类型的化学成分，包括黄酮、生物碱、萜类、芳香类、脂肪酸等等，其中，隶属于黄酮类化合物的百蕊草素I和百蕊草素I I已经有报道，但还有很多化学成分目前尚未可知。现代药理研究表明，百蕊草具有很好的抑菌作用，临床上多用作治疗急性乳腺炎、肺炎、上呼吸道感染等病症，其中的百蕊草素II对金黄色葡萄球菌、卡他球菌、伤寒杆菌、变形杆菌、痢疾杆菌均有抑制作用；而百蕊草素I则对金黄色葡萄球菌、卡他球菌、痢疾杆菌有抑制作用。鉴于目前对于百蕊草化学成分的提取以及药理活性研究并不全面，因而有必要进行深入探究，以扩大其在临床上的应用。

技术实现思路

[0003]有鉴于此，为了进一步研究百蕊草中的活性成分，本专利技术从百蕊草中提取出新的百蕊草苷化合物，并探究其可能的应用。
[0004]为了解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案如下：
[0005]第一方面，本专利技术提供一种新的百蕊草苷化合物，具有如下结构式：
[0006][0007]其中，R为：(百蕊草苷A)或者(百蕊草苷B)。
[0008]上述百蕊草苷A和百蕊草苷B是从百蕊草中提取获得。
[0009]进一步地，所述百蕊草苷A和百蕊草苷B的提取方法包括如下步骤：
[0010]步骤1，将百蕊草依次采用不同浓度梯度的乙醇
‑
水溶液浸提，合并所有浸提液；
[0011]步骤2，将浸提液浓缩至原体积一半，依次采用非极性溶剂和极性溶剂各萃取多次，合并极性溶剂萃取的有机相；
[0012]步骤3，将有机相采用多重色谱分离，即得。
[0013]进一步地，所述步骤1中，将百蕊草依次采用体积浓度95％乙醇
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水溶液浸提1次、85％乙醇
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水溶液浸提1次、70％乙醇
‑
水溶液浸提2次。
[0014]进一步地，所述步骤2中，依次采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各萃取水相多次，最后合并并保留正丁醇萃取有机相。
[0015]进一步地，所述步骤3中，先采用200～300目的硅胶色谱柱，以二氯甲烷、甲醇、水按照体积比为12.25∶3∶0.1混合液为洗脱液对有机相进行等度洗脱，获得4个流分(Fr.1～4)；Fr.2和Fr.3的流分再分别采用MCI色谱柱，依次以体积浓度10％、40％、70％、100％的甲醇
‑
水溶液进行梯度洗脱，分别获得10个流分(Fr.2
‑
1～Fr.2
‑
10)和7个流分(Fr.3
‑
1～Fr.3
‑
7)；Fr.2
‑
7和Fr.3
‑
7的流分进一步分别采用Sephadex LH
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20凝胶色谱柱，依次以体积浓度10％、40％、70％、100％的甲醇
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水溶液进行梯度洗脱，分别获得3个流分(Fr.2
‑7‑
1～Fr.2
‑7‑
3)和5个流分(Fr.3
‑7‑
1～Fr.3
‑7‑
5)；Fr.2
‑7‑
1的流分最后采用硅胶色谱柱纯化，以二氯甲烷和甲醇按照体积比7∶1混合液为洗脱液进行等度洗脱，获得化合物1；以及Fr.3
‑7‑
4的流分采用ODS色谱柱纯化，依次以体积浓度为5％、25％、50％、75％、100％的甲醇
‑
水溶液梯度洗脱，获得化合物2。
[0016]第二方面，本专利技术提供上述百蕊草苷A或者含有上述百蕊草苷A的组合物在制备抗金黄色葡萄球菌药物上的应用。
[0017]第三方面，本专利技术提供上述百蕊草苷B或者含有上述百蕊草苷B的组合物在制备抗金黄色葡萄球菌药物上的应用。
[0018]第四方面，本专利技术提供包含上述百蕊草苷A和上述百蕊草苷B的组合物在制备抗金黄色葡萄球菌药物上的应用。
[0019]第五方面，本专利技术提供一种抗金黄色葡萄球菌药物，所述药物至少含有上述百蕊草苷A和/或上述百蕊草双糖苷B。
[0020]进一步地，所述百蕊草苷A在抗金黄色葡萄球菌药物中的最小抑菌浓度为250μM/mL，最小杀菌浓度为500μM/mL。
[0021]进一步地，所述百蕊草苷B在抗金黄色葡萄球菌药物中的最小抑菌浓度为1000μM/mL，最小杀菌浓度为2000μM/mL。
[0022]进一步地，所述药物还包括药学上可接受的辅料。
[0023]本专利技术提取出2种新的百蕊草苷A和百蕊草苷B化合物，这两个新化合物均可以改变金黄色葡萄球菌的细胞膜通透性，引起生物大分子泄露以及菌液电导率的增加，从而对金黄色葡萄球菌具有良好的抗菌抑菌效果，有望单独或者组合开发成抗金黄色葡萄球菌药物用于临床。
附图说明
[0024]图1为本专利技术实施例2中化合物1对金黄色葡萄球菌生长曲线的影响。
[0025]图2为本专利技术实施例2中化合物2对金黄色葡萄球菌生长曲线的影响。
[0026]图3为本专利技术实施例2中化合物1对金黄色葡萄球菌电导率的影响。
[0027]图4为本专利技术实施例2中化合物2对金黄色葡萄球菌电导率的影响。
[0028]图5为本专利技术实施例2中化合物1对金黄色葡萄球菌胞外核酸相对含量的影响。
[0029]图6为本专利技术实施例2中化合物2对金黄色葡萄球菌胞外核酸相对含量的影响。
[0030]图7为本专利技术实施例2中化合物1对金黄色葡萄球菌胞外可溶性蛋白的影响。
[0031]图8为本专利技术实施例2中化合物2对金黄色葡萄球菌胞外可溶性蛋白的影响。
具体实施方式
[0032]在本专利技术的描述中，需要说明的是，实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0033]下面结合附图和具体的实施例对本专利技术做进一步详细说明，所述是对本专利技术的解释而不是限定。
[0034]实施例1
[0035]本实施例提供一种百蕊草苷A(化合物1)和百蕊草苷B(化合物2)的提取纯化方法，该百蕊草苷A和百蕊草苷B具有如下结构式：
[0036][0037]化合物1和化合物2的提取纯化方法具体如下：
[0038]步骤1，将百蕊草干燥全草(500g)，依次用料液比1∶4的95％、85％、70％、70％乙醇
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水溶液各提取一次，合并提取液，减压浓缩至原体积本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.百蕊草苷化合物，其特征在于：具有如下结构式：其中，R为：百蕊草苷A；或者百蕊草苷B。2.根据权利要求1所述的百蕊草苷化合物，其特征在于：所述百蕊草苷A和所述百蕊草苷B的提取方法包括如下步骤：步骤1，将百蕊草依次采用不同浓度梯度的乙醇
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水溶液浸提，合并所有浸提液；步骤2，将浸提液浓缩至原体积一半，依次采用非极性溶剂和极性溶剂各萃取多次，合并极性溶剂萃取的有机相；步骤3，将有机相采用多重色谱分离，即得。3.根据权利要求2所述的百蕊草苷化合物，其特征在于：所述步骤1中，将百蕊草依次采用体积浓度95％乙醇
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水溶液浸提1次、85％乙醇
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水溶液浸提1次、70％乙醇
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水溶液浸提2次。4.根据权利要求2所述的百蕊草苷化合物，其特征在于：所述步骤2中，依次采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各萃取水相多次，最后合并并保留正丁醇萃取有机相。5.根据权利要求2所述的百蕊草苷化合物，其特征在于：所述步骤3中，先采用200～300目的硅胶色谱柱，以二氯甲烷、甲醇、水按照体积比为12.25∶3∶0.1混合液为洗脱液对有机相进行等度洗脱，获得4个流分：Fr.1～4；Fr.2和Fr.3的流分再分别采用MCI色谱柱，依次以体积浓度10％、40％、70％、100％的甲醇
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水溶液进行梯度洗脱，分别获得10个流分：Fr.2
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1～Fr.2
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10，和7个流分：Fr.3
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1～Fr.3
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7；Fr.2
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7和Fr.3...

【专利技术属性】
技术研发人员：李宁，王开金，陈刚，孙贺春，朱晓宝，张静，
申请(专利权)人：安徽医科大学，
类型：发明
国别省市：