一种anti-MAK16-IgG1单克隆亚型抗体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种anti‑MAK16‑IgG1单克隆亚型抗体及其制备方法和应用，属于免疫性疾病药物技术领域。本发明专利技术成功制备了高浓度高纯度的、抗MAK16蛋白的单克隆抗体，为单克隆IgG1亚型抗体——anti‑MAK16‑IgG1单克隆亚型抗体；效价为160000；与IgG1+LPS共同刺激诱导组RAW264.7细胞相比，采用本发明专利技术制备的anti‑MAK16‑IgG1单克隆亚型抗体+LPS共同刺激诱导24h及48h后的RAW264.7细胞，IL‑6和IL‑10表达量显著降低，且随着时间延长，差异越明显；anti‑MAK16‑IgG1单克隆亚型抗体的有效剂量为不少于50μg/mL。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及免疫性疾病药物，尤其是涉及一种anti-ma k16-igg1单克隆亚型抗体及其制备方法和应用。

技术介绍

1、mak16基因发生突变时，将使酿酒酵母表现出温度敏感性生长的性质，在酿酒酵母菌的25s rrna和5.8s rrna的成熟过程中起着关键性作用。还有研究表明，mak16蛋白在核糖体60s亚单位的生物合成中起重要作用，与60s核糖体亚基上的其余部分蛋白存在广泛的交互作用。

2、白细胞介素6(il-6)是一种随着体内免疫环境的不同，既可以表现出促炎也可以表现出抗炎活性的多功能细胞因子，当机体感染或组织损伤时，il-6迅速产生并参与宿主防御，另一方面，il-6的过度分泌又会引起急慢性系统性炎症反应及细胞因子风暴。il-6的六聚体复合物(il-6/il-6r/gp130)通过活化不同的信号转移机制来执行各种生物学效应，这些信号转移机制的病理途径包括jak/stat3、ras/mapk、pi3k–pkb/akt等，从而导致癌症、类风湿性关节炎、炎症性肠病等慢性免疫性疾病。有研究显示，在系统性红斑狼疮(sle)的临床表现出现前阶段，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种anti-MAK16-IgG1单克隆亚型抗体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种anti-MAK16-IgG1单克隆亚型抗体的制备方法，其特征在于：S1中将MAK16的基因序列亚克隆至原核表达载体pET-21a(+)中后，转化感受态细胞诱导蛋白表达，粗提取蛋白后，对蛋白进行纯化，以纯化后的蛋白作为抗原。

3.根据权利要求1所述的一种anti-MAK16-IgG1单克隆亚型抗体的制备方法，其特征在于，S3中用于细胞电融合的细胞为：S2中效价检测最高的小鼠的B细胞与非分泌性SP2/0骨髓瘤细胞。

4.根据权利要求1所...

【技术特征摘要】

1.一种anti-mak16-igg1单克隆亚型抗体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种anti-mak16-igg1单克隆亚型抗体的制备方法，其特征在于：s1中将mak16的基因序列亚克隆至原核表达载体pet-21a(+)中后，转化感受态细胞诱导蛋白表达，粗提取蛋白后，对蛋白进行纯化，以纯化后的蛋白作为抗原。

3.根据权利要求1所述的一种anti-mak16-igg1单克隆亚型抗体的制备方法，其特征在于，s3中用于细胞电融合的细胞为：s2中效价检测最高的小鼠的b细胞与非分泌性sp2/0骨髓瘤细胞。

4.根据权利要求1所述的一种anti-mak16-igg1单克隆亚型抗体的制备方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶冬青，方心宇，凌华志，冷瑞雪，范引光，
申请(专利权)人：安徽医科大学，
类型：发明
国别省市：