一种新型结直肠癌血清标志物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种新型结直肠癌血清标志物及其应用，涉及生物检测技术领域，其技术要点为：提供了新的血清标志物UTP18，并将其作为结直肠癌血清生物标志物应用于结直肠癌的诊断。通过本发明专利技术，通过检测结直肠癌患者血清UTP18的表达量水平，能够早期识别结直肠癌患者，例如Ⅰ期、Ⅱ期等早期阶段，同时辅助与胃癌的鉴别诊断，并判断结直肠癌患者的预后(5年生存率)，从而能够尽早采取有效治疗手段防止疾病恶化。本发明专利技术采用的结直肠癌诊断及预后标志物UTP18为本申请发明专利技术人团队自主发现，并且，UTP18与常用于检测的血清标志物CEA联合，具有更高的诊断效能，可单独使用作为鉴别诊断指标，特异性好，并可用作判断疾病预后的依据。并可用作判断疾病预后的依据。并可用作判断疾病预后的依据。

【技术实现步骤摘要】
一种新型结直肠癌血清标志物及其应用


[0001]本专利技术涉及生物检测
，具体涉及一种新型结直肠癌血清标志物及其应用。

技术介绍

[0002]结直肠癌(co l orecta l cancer CRC)，也称为大肠癌，包括结肠癌和直肠癌，是全世界范围内常见的消化道恶性肿瘤之一。近二十年来，随着生活水平的不断提高，生活方式及饮食习惯结构的改变，结直肠癌的发病率和死亡率均呈现明显的上升趋势。我国结直肠癌的疾病负担不断增加，城市高于农村，男性高于女性，已成为严重威胁到居民健康的重大公共卫生问题，预防和控制结直肠癌的工作刻不容缓。
[0003]通常，结直肠癌的早期没有症状，即使出现一些症状，也不是大肠特有的，因此很难说这些症状是结直肠癌的特征性症状。然而，结直肠癌通常表现出以下症状：排便习惯改变、大便带血或带粘液(大便混有粘液)、细条便、体重减轻、腹部不适(痉挛和腹胀)、疲劳、厌食、呕吐、恶心和贫血等。结直肠癌的预后是早期阶段(1期)患者的五年生存率超过90％，但转移阶段(4期)患者的五年生存率仅为5％。因此，准确的结直肠癌早期诊断和治疗将有助于降低结直肠癌引起的死亡率和降低癌症治疗的成本。
[0004]结直肠癌筛选对于降低疾病的发病率和死亡率非常重要，因为结直肠癌在可切除癌前病变或可以治疗的癌症早期进展缓慢。当前用于诊断结直肠癌的筛选检测包括粪便潜血检测、肿瘤标志物检测、结肠造影、结肠镜检查、计算机断层扫描、腹部超声检查、经直肠超声检查和乙状结肠镜检查等。然而，结肠镜检查是最可靠的结直肠癌筛选检查，但其依从性和分布率较低，而粪便潜血检查是使用最广泛的无创筛选选项，但其灵敏度较低。其他筛选检测在早期诊断具有局限性。
[0005]现有技术中，血清癌胚抗原(CEA)是最常见，也是最早发现的肿瘤标志物，是一种具有人类胚胎抗原特异性的酸性糖蛋白。正常参考值：血清<5ug/L。采用血清肿瘤标志物检查结直肠癌。与胃癌相似，目前尚无特异的结直肠癌抗原，较为常用的是血清癌胚抗原(CEA)。
[0006]现有结直肠癌缺乏有效的早期诊断指标，通用的CEA诊断效率仅为30％
‑
40％，达不到无创早筛的目的，会有大量患者漏诊，进展至中晚期。亟待一种诊断效能更高，或者辅助CEA提升诊断效能的肿瘤标志物和联合检测手段。
[0007]为此，本专利技术旨在提供一种新型结直肠癌血清标志物及其应用，以解决上述问题。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的是为了解决上述问题，提供一种新型结直肠癌血清标志物及其应用。
[0009]为了达到上述目的，本专利技术的技术方案如下：
[0010]本专利技术提供了一种UTP18，作为结直肠癌血清生物标志物应用于结直肠癌的诊断。
[0011]本专利技术还提供了一种新型结直肠癌血清标志物，包括UTP18。
[0012]进一步地，所述UTP18为人的UTP18。
[0013]进一步地，所述UTP18与血清标志物CEA联合作为结直肠癌血清生物标志物应用于结直肠癌的鉴别诊断，并判断疾病预后。
[0014]本专利技术还提供了一种新型结直肠癌血清标志物试剂盒，用于检测上述所述的结直肠癌血清生物标志物。
[0015]本专利技术还提供了一种如上述所述的结直肠癌血清生物标志物的检测方法，采用UTP18 EL I SA试剂盒进行检测，包括以下步骤：
[0016]A、将血清样本2000g离心10mi n，取上清30μL，加30μL样本稀释液稀释一倍，充分混匀；
[0017]B、加样：从铝箔袋中取出酶标板，并设置空白孔、标准品孔和样本孔，分别向标准品孔和样本孔加标准品(S1、S2、S3、S4、S5、S6)或稀释后的样本50μL，其中，空白孔不加；
[0018]C、分别向标准品孔和样本孔的每孔加100μL HRP
‑
Conjugate试剂；
[0019]D、覆上新的板贴，37℃孵育60mi n；
[0020]E、弃去孔内液体，在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍多次，甩干孔内剩余液体，每孔加400μL的Wash So l ut i on，静置1mi n后甩干，共洗4次；
[0021]F、每孔加50μL的Chromogen So l ut i on A；
[0022]G、每孔加50μL的Chromogen So l ut i on B，且Chromogen So l ut i on B避光；
[0023]H、轻轻混匀后，37℃孵育15mi n，且避光；
[0024]I、每孔加50μL的Stop So l ut i on；
[0025]J、5mi n后，采用酶标仪在450nm波长依序测量各孔的光密度，即OD值；
[0026]K、数据处理：将所有孔的OD值都减去空白孔，对标准曲线使用二次曲线进行拟合；将每孔减去空白孔后的OD值代入方程中，计算UTP18浓度。
[0027]进一步地，采用UTP18 EL I SA试剂盒进行检测前，需先将板子、试剂和血清样本平衡至室温。
[0028]本专利技术方案解决的问题核心在于：
[0029]1、现有结直肠癌缺乏有效的早期诊断指标，现有技术中通用的CEA诊断效率仅为30％
‑
40％，其达不到无创早筛的目的，会存在有大量患者漏诊，进展至中晚期；
[0030]2、目前亟待一种诊断效能更高，或者辅助CEA提升诊断效能的肿瘤标志物和联合检测手段。
[0031]本专利技术方案解决问题的难度及意义在于：
[0032]结直肠癌的早期诊断是临床上亟待解决的难点问题，提升诊断效能，有助于提高患者的治疗预后。
[0033]与现有技术相比，本方案的有益效果：
[0034]1、本专利技术中将UTP18作为结直肠癌血清生物标志物，且将其与CEA联合，能调高结直肠癌的诊断效能；
[0035]2、将UTP18作为结直肠癌血清生物标志物应用于鉴别诊断，能够用于鉴别胃癌；
[0036]3、本专利技术的UTP18能够实现判断预后，判别CRC患者的5年生存曲线，血的预测区
间；
[0037]4、本专利技术提供的UTP18作为结直肠癌血清生物标志物，与单独使用CEA相比，能显著提升早期诊断效能；同时可以进行鉴别诊断和预后判断。
附图说明
[0038]图1是本专利技术实施例中实验方法优化前的拟合曲线；
[0039]图2是本专利技术实施例中实验方法优化后的拟合曲线；
[0040]图3是本专利技术实施例中的ROC曲线图；
[0041]图4是本专利技术实施例中的5年生存曲线；
[0042]图5是本专利技术实施例中结直肠癌和胃癌鉴别诊断结果图。
具体实施方式
[0043]为了使本
的人员更好地理解本专利技术方案，下面将结合本专利技术的实施例及附图，对本专利技术的技术方案进行进一步详细地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分的实施例，而不是全本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种UTP18，其特征是：作为结直肠癌血清生物标志物应用于结直肠癌的诊断。2.一种新型结直肠癌血清标志物，其特征是：包括UTP18。3.如权利要求2所述的一种新型结直肠癌血清标志物，其特征是：所述UTP18为人的UTP18。4.如权利要求1
‑
3所述的一种新型结直肠癌血清标志物，其特征是：所述UTP18与血清标志物CEA联合作为结直肠癌血清生物标志物应用于结直肠癌的鉴别诊断，并判断疾病预后。5.一种新型结直肠癌血清标志物试剂盒，其特征是：用于检测如权利要求1至3任意一项所述的结直肠癌血清生物标志物。6.一种如权利要求1至3任意一项所述的结直肠癌血清生物标志物的检测方法，其特征是：采用UTP18 ELISA试剂盒进行检测，包括以下步骤：A、将血清样本2000g离心10min，取上清30μL，加30μL样本稀释液稀释一倍，充分混匀；B、加样：从铝箔袋中取出酶标板，并设置空白孔、标准品孔和样本孔，分别向标准品孔和样本孔加标准品或稀释后的样本50μL，其中，空白孔不加；C、分别向标准品孔...

【专利技术属性】
技术研发人员：权利要求书一页说明书六页附图三页，
申请(专利权)人：中国医学科学院基础医学研究所，
类型：发明
国别省市：