PPDPF在胆管癌诊断及药物制备中的用途制造技术

本申请涉及医药技术领域，具体为PPDPF在胆管癌诊断及药物制备中的用途。本申请提供胰腺祖细胞分化和增殖因子的用途，选自以下任一项或多项：1)作为胆管癌治疗的靶标；2)作为对胆管癌诊断或预后的标志物；3)制备胆管癌诊断或预后的诊断产品；4)作为筛选抑制胆管癌的药物的靶标；5)制备亮氨酸分解代谢抑制剂。本发明专利技术确认胆管癌组织中胰腺祖细胞分化和增殖因子(PPDPF)表达显著升高且与病人不良预后相关，PPDPF促进胆管癌细胞的生长和增殖，而敲除PPDPF能够显著抑制胆管细胞的增殖和生长。抑制PPDPF的表达水平显著抑制胆管癌细胞系的裸鼠移植瘤成瘤能力，这提示PPDPF可作为胆管癌发生发展过程中的分子标志物，并可作为治疗胆管癌的靶点。管癌的靶点。

【技术实现步骤摘要】
PPDPF在胆管癌诊断及药物制备中的用途


[0001]本申请涉及医药
，具体为PPDPF在胆管癌诊断及药物制备中的用途。

技术介绍

[0002]原发性肝癌分为肝细胞癌(hepatocellμLar carcinoma，HCC)和胆管癌(cholangiocarcinoma，CCA)。根据胆管癌解剖学位置不同又分为肝内胆管癌(intrahepatic CCA，ICCA)、肝周胆管癌(perihilar CCA，pCCA)或远端胆管癌(distal CCA，dCCA)。每种亚型都有不同的流行病学、生物学、预后特征和临床治疗策略。目前，CCA尤其是ICCA的发病率逐年上升，目前的治疗方法以手术治疗为主。肝外胆管癌易引起胆管阻塞、黄疸等临床症状，早期发现后可进行手术根治。30％～40％的病人采用根治性手术后5年生存率为20％
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40％。对于中晚期病人，目前没有有效的靶向药物，顺铂联合吉西他滨是标准的治疗方案，但并不能让所有患者从中获益。
[0003]肝内胆管癌细胞可起源于肝内胆管上皮细胞或肝祖细胞。少数胆管癌来源于肝细胞，这些肿瘤呈现肝细胞癌和胆管细胞癌的双重特征。与肝癌形成的小梁状、假腺管性、高细胞密度的实体瘤不同，胆管癌是由导管状、乳头状的实质肿瘤结构嵌入肿瘤基质形成。常见的肝损伤因素如肥胖、嗜酒、脂质代谢紊乱、病毒性肝炎、代谢综合征等均能促进肝癌及胆管癌的发生。但目前导致胆管癌发生及发展的具体机制尚不明确。大规模基因组学和转录组学研究发现在胆管癌中存在大量抑癌基因失活突变及致癌信号通路的异常激活如TP53缺失，KRAS激活，IDH1/2突变，EGFR基因融合等。但到目前为止，分子靶向药物的胆管癌临床试验结果不佳，作为单药治疗的司鲁替尼或联合化疗方案的索拉菲尼联合吉西他滨，西妥昔单抗联合吉西他滨等对患者的生存期改善效果十分有限。
[0004]面对胆管癌治疗现状的窘态，发现新的分子或生物标志物，揭示其发生发展的潜在机制可能为胆管癌病人的治疗提供新的方案。
[0005]代谢重编程对肿瘤的发生和发展至关重要。肿瘤细胞重塑代谢物消耗的过程，以利用中间产物作为物质合成的原料。氨基酸分解代谢的产物是肿瘤细胞能量来源之一。很多氨基酸分解代谢的酶在肿瘤细胞中表达升高，不仅为细胞生存提供能量和物质，也能调节肿瘤细胞蛋白质翻译、生长、增殖、免疫逃逸等生物学过程。例如，肿瘤细胞能够上调双加氧酶和精氨酸酶的表达，加速分解肿瘤微环境中的精氨酸和色氨酸，促进细胞能量的储备同时抑制局部细胞毒性T细胞的增殖，造成免疫逃逸。作为必需氨基酸，支链氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸，BCCA)是肿瘤细胞生长增殖所必须且首选的营养原料，能够用于肿瘤细胞内蛋白质合成或能量供给。除其代谢作用外，BCAA及其许多代谢产物还具有重要的变构调节和信号传导作用。目前研究最多的就是亮氨酸对mTOR信号通路的调节。mTORC1信号通路掌控细胞内多种代谢过程，包括蛋白质合成和细胞生长等过程。亮氨酸通过直接与mTORC1的负调因子Sestrin2结合，来解除对mTORC1的抑制促进其激活。活化后的mTORC1能够促进蛋白质合成，抑制细胞自噬，促进细胞增殖。
[0006]越来越多的证据表明支链氨基酸分解代谢过程的改变可影响肿瘤的生物学特性，
但对于不同组织来源的肿瘤组织来说支链氨基酸的利用方式大相径庭。比如同样是KRAS和P53突变驱动的肿瘤，肺癌和胰腺癌对BCAA的利用方式就截然不同。对于非小细胞肺癌来说，BCAA的分解代谢过程加快主要为核酸的合成提供氮源。而对于胰腺导管腺癌来说，BCAA分解主要促进三羧酸循环，提高能量产生。胆管癌也是一种由KRAS和P53突变驱动的肿瘤，但在胆管癌中BCAA发挥的作用尚不明确。

技术实现思路

[0007]鉴于以上所述现有技术的缺点，本申请的目的在于提供PPDPF在胆管癌诊断及药物制备中的用途。在本研究中，专利技术人前期实验意外通过SILAC找到了调控胆管癌细胞BCAA代谢的关键分子PPDPF(胰腺祖细胞分化和增殖因子)，发现PPDPF影响胆管癌BCAA分解代谢及促进mTORC1信号通路激活的具体机制，揭示了胆管癌细胞独特的代谢过程，为拓宽胆管癌治疗手段的提供新的思路。
[0008]为实现上述目的及其他相关目的，本申请第一方面提供胰腺祖细胞分化和增殖因子的用途，选自以下任一项或多项：
[0009]1)作为胆管癌治疗的靶标；
[0010]2)作为对胆管癌诊断或预后的标志物；
[0011]3)制备胆管癌诊断或预后的诊断产品；
[0012]4)作为筛选抑制胆管癌的药物的靶标；
[0013]5)制备亮氨酸分解代谢抑制剂。
[0014]本申请第二方面提供特异性识别或扩增胰腺祖细胞分化与增殖因子的物质在制备胆管癌诊断产品或胆管癌预后诊断产品中的用途。
[0015]本申请第三方面提供胰腺祖细胞分化和增殖因子抑制剂在制备产品中的用途，所述产品至少具备以下功效之一：
[0016]1)抑制胆管细胞的增殖和生长；
[0017]2)治疗胆管癌。
[0018]在本申请的任意实施例中，所述胰腺祖细胞分化和增殖因子抑制剂包括：抑制胰腺祖细胞分化与增殖因子活性的物质，或抑制胰腺祖细胞分化与增殖因子的表达、稳定性，或减少其有效作用时间的物质。
[0019]在本申请的任意实施例中，所述抑制剂选自：敲除或沉默胰腺祖细胞分化与增殖因子的物质、特异性与胰腺祖细胞分化与增殖因子结合的结合分子、针对胰腺祖细胞分化与增殖因子的化学小分子拮抗剂或抑制剂、抑制由胰腺祖细胞分化与增殖因子介导的胆管癌细胞的非锚定依赖生长或成瘤的物质、或干扰胰腺祖细胞分化与增殖因子和效应分子相互作用的物质。
[0020]在本申请的任意实施例中，所述敲除或沉默胰腺祖细胞分化与增殖因子的物质包括：针对胰腺祖细胞分化与增殖因子的CRISPR基因编辑物质、特异性干扰胰腺祖细胞分化与增殖因子的编码基因表达的干扰分子、或针对胰腺祖细胞分化与增殖因子的同源重组物质或定点突变物质，所述同源重组物质或定点突变物质将胰腺祖细胞分化与增殖因子进行功能丧失性突变。
[0021]在本申请的任意实施例中，所述干扰分子选自siRNA、shRNA或miRNA；优选地，所述
干扰分子选自shRNA；更优选地，所述shRNA的靶标分子的核苷酸序列如SEQ ID NO:10所示。
[0022]在本申请的任意实施例中，所述CRISPR基因编辑物质为sgRNA，所述sgRNA的序列如SEQ ID NO:11和/或SEQ ID NO:12所示。
[0023]本申请第四方面提供一种治疗胆管癌的方法，为向对象施用前述用途中的胰腺祖细胞分化和增殖因子抑制剂。
[0024]在本申请的任意实施例中，对象为哺乳动物。
[0025]本申请第五方面提供一种治疗胆管癌的药物，包括有效剂量的前述用途中的胰腺祖细胞分化和增殖因子抑制剂。
[0026]与现有技术相比，本申请的有益效果为：本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.胰腺祖细胞分化和增殖因子的用途，选自以下任一项或多项：1)作为胆管癌治疗的靶标；2)作为对胆管癌诊断或预后的标志物；3)制备胆管癌诊断或预后的诊断产品；4)作为筛选抑制胆管癌的药物的靶标；5)制备亮氨酸分解代谢抑制剂。2.特异性识别或扩增胰腺祖细胞分化与增殖因子的物质在制备胆管癌诊断产品或胆管癌预后诊断产品中的用途。3.胰腺祖细胞分化和增殖因子抑制剂在制备产品中的用途，所述产品至少具备以下功效之一：1)抑制胆管细胞的增殖和生长；2)治疗胆管癌。4.如权利要求3所述的胰腺祖细胞分化和增殖因子抑制剂在制备产品中的用途，其特征在于，所述胰腺祖细胞分化和增殖因子抑制剂包括：抑制胰腺祖细胞分化与增殖因子活性的物质，或抑制胰腺祖细胞分化与增殖因子的表达、稳定性，或减少其有效作用时间的物质。5.如权利要求4所述的胰腺祖细胞分化和增殖因子抑制剂在制备产品中的用途，其特征在于，所述抑制剂选自：敲除或沉默胰腺祖细胞分化与增殖因子的物质、特异性与胰腺祖细胞分化与增殖因子结合的结合分子、针对胰腺祖细胞分化与增殖因子的化学小分子拮抗剂或抑制剂、抑制由胰腺祖细胞分化与增殖因子介导的胆管癌细胞的非锚定依赖生长或成瘤的物质、或干扰胰腺祖细胞分化与增殖因子和效应分子相互作用的物质。...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓跃臻，杜建奎，范琦，
申请(专利权)人：上海市胸科医院，
类型：发明
国别省市：