【技术实现步骤摘要】
一种检测重亚硫酸盐处理人血浆cfDNA转化率和检出率的对照品及其制备方法和应用
[0001]本专利技术属于DNA甲基化检测
，涉及一种检测重亚硫酸盐处理人血浆cfDNA转化率和检出率的对照品及其制备方法和应用。
技术介绍
[0002]DNA甲基化是一种重要的表观遗传学修饰，参与了生物体生长发育、细胞功能调控以及疾病发生发展和转归等过程。DNA异常甲基化导致其功能异常，与多种疾病尤其是癌症的发生和发展密切相关。深入研究DNA甲基化有助于揭示生命活动过程和人类疾病发生的分子机制，对恶性肿瘤等疾病的精准早期诊断和早期干预治疗具有重要的理论价值和临床意义。在DNA甲基化研究中，全基因组甲基化(Whole Genome Bisulfite Sequencing，WGBS)被誉为检测DNA甲基化的“金标准”，重亚硫酸盐处理DNA是一种较为常见的检测技术，重亚硫酸盐将未甲基化的胞嘧啶转化为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶则不受影响，重亚硫酸盐转化率影响DNA甲基化检测的准确性，未能转化的DNA会在之后检测中产生假阳性，因此，评估重亚硫酸转化...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种检测重亚硫酸盐处理人血浆cfDNA转化率和检出率的对照品的制备方法，其特征在于，所述对照品包括未甲基化对照品和甲基化对照品；所述制备方法包括：以与待测人血浆cfDNA样本无同源性的DNA为模板，以dNTP为原料，利用引物对1进行PCR扩增，纯化扩增产物，得到未甲基化对照品；以与待测人血浆cfDNA样本无同源性的DNA为模板，以5
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甲基
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dCTP、dATP、dGTP和dTTP为原料，利用引物对2进行PCR扩增，纯化扩增产物，得到甲基化对照品。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述与待测人血浆cfDNA样本无同源性的DNA选自大肠杆菌噬菌体或质粒，包括λDNA、质粒pUC19、质粒pUC18或质粒pUC57中任意一种。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述引物对1和引物对2各自独立地为根据与待测人血浆cfDNA样本无同源性的DNA的序列设计的引物；所述未甲基化对照品和甲基化对照品的长度分别为163bp和167bp。4.一种检测重亚硫酸盐处理人血浆cfDNA转化率和检出率的对照品，其特征在于，所述对照品包括未甲基化对照品和甲基化对照品，所述对照品由权利要求1
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3任一项所述的检测重亚硫酸盐处理人血浆cfDNA转化率和检出率的对照品的制备方法制备得到。5.权利要求4所述的检测重亚硫酸盐处理人血浆cfDNA转化率和检出率的对照品在制备检测重亚硫酸盐处理人血浆cfDNA转化率和检出率的产品中的应用。6.一种检测重亚硫酸盐处理人血浆cfDNA转化率和检出率的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求4所述的检测重亚硫酸盐处理人血浆cfDNA转化率和检出率的对照品；所述试剂盒还包括PCR反应液。7.权利要求4所述的检测重亚硫酸盐处理人血浆cfDNA转化率和检出率的对照品在检测重亚硫酸盐处理人血浆cfDNA转化率和检出率中的应用。8.一种重亚硫酸盐处理人血浆cfDNA转化率和检出率的检测方法，其特征在于，...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄晓东，汤郡，陈征，张亚飞，
申请(专利权)人：迈杰转化医学研究苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：
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