一种CD38基因人源化的非人动物的构建方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种CD38基因人源化的非人动物的构建方法及其应用，该方法建立的CD38基因人源化的非人动物蛋白中包含：SEQ ID NO：1的编码蛋白所示的全部或部分。本发明专利技术构建的模型可应用在免疫治疗及免疫检查点抑制剂筛选等。等。等。

【技术实现步骤摘要】
一种CD38基因人源化的非人动物的构建方法及其应用


[0001]本专利技术属于动物基因工程和基因遗传修饰领域，具体地说，涉及一种CD38基因人源化的非人动物及其构建方法和在生物医药领域的应用。

技术介绍

[0002]CD38在1980年代由Reinherz等人的一项先驱研究中首次被鉴定出来，旨在使用单克隆抗体检测人淋巴细胞的表面抗原，最初被称为T10。CD38主要由终末分化的浆细胞及其恶性对应物表达，但也可以在其他成熟免疫细胞的表面上发现，例如B细胞、T细胞、自然杀伤(NK)细胞以及发育早期和晚期的骨髓细胞。然而，多能造血干细胞缺乏表达，表明它是一种谱系定义标志物。
[0003]CD38是一种多功能跨膜II型糖蛋白，其保留酶活性并作为受体。在其众多酶促功能中，CD38参与细胞内烟酰胺二核苷酸(NAD)的分解代谢，参与细胞外NAD前体的代谢，并且是细胞内钙稳态的主要调节剂。特别是，高水平的细胞外腺苷在癌症生物学中的作用越来越高：它通过与嘌呤能受体(CD38/CD203a/CD73外酶途径)的结合促进免疫抑制有关，并且可能被肿瘤微环境的T细胞利用以介导免疫逃逸。事实上，这种途径的激活与骨髓瘤进展和疾病侵袭性相关。其受体成分调节CD31介导的白细胞与内皮壁之间的粘附，因此有利于白细胞的活化和增殖并促进B细胞分化。
[0004]在过去的四十年中，CD38对细胞生物学的贡献以及CD38与人类疾病的联系一直是实质性研究的焦点。CD38最初被描述为T细胞中能够诱导细胞活化的表面蛋白。不久之后，CD38在其他免疫细胞中也报道了表达，如B细胞、自然杀伤(NK)细胞、嗜中性粒细胞和髓系细胞。同样，CD38在细胞分化、细胞因子释放、迁移和凋亡过程中的作用被揭示出来。自从这些发现被报道以来，许多研究都试图了解CD38通过调节免疫反应在多大程度上有助于炎症和自身免疫性疾病的发展。到目前为止，已知CD38表达在激活后在免疫细胞中稳健诱导并调节感染诱导的炎症过程，从细胞募集到诱导适应性免疫反应。尽管如此，CD38用于介导炎症每个阶段的机制仍然知之甚少。CD38在炎症性自身免疫中的功能也是几种疾病中许多研究的主题。根据所分析的疾病类型，免疫细胞群或动物模型，一些报告表明CD38可以抑制或诱导自身免疫。缺乏共识凸显了需要更多的研究来了解CD38的生物学及其对炎症和自身免疫的贡献。
[0005]人源化小鼠模拟人类疾病，因此通常用于传染病、退行性和癌症疾病的研究。最近的模型还反映了造血、自然免疫、神经生物学和影响疾病病理生物学的分子途径。一系列免疫缺陷小鼠品系允许长寿命的人类祖细胞移植。先天性和适应性免疫的存在使高水平的人血淋巴重构成为可能，细胞对广泛的微生物感染具有敏感性。这些小鼠还有助于研究人类病理生物学，自然疾病过程和广泛人类疾病的治疗效果。虽然人源化小鼠模拟具有这些无可比拟的优点，但是由于人CD38氨基酸序列与啮齿类动物中的对应蛋白存在显著差异，如人CD38和小鼠CD38蛋白序列的一致性仅为59％左右，识别人CD38蛋白的抗体通常无法识别小鼠CD38，即无法用普通小鼠来筛选和评价靶向CD38信号通路药物的药效。鉴于CD38全球
研发进展及靶向重要应用价值，为了使临床前期试验更有效并使研发失败率最小化，CD38人源化小鼠模型的有效建立极为重要。

技术实现思路

[0006]针对上述缺陷，本专利技术将编码人类CD38的基因敲入到其同源C57BL/6JGpt小鼠位点，构建能表达人CD38细胞因子的小鼠模型，为研究人源免疫细胞发育、免疫治疗、炎症、自身免疫疾病及相关药物筛选提供了有利模型。
[0007]本专利技术提供一种CD38基因人源化的非人动物蛋白。
[0008]一种CD38基因人源化的非人动物蛋白，该CD38基因人源化的非人动物蛋白中包含：SEQ ID NO：1的编码蛋白所示的全部或部分。
[0009]本专利技术还提供一种CD38基因人源化的非人动物蛋白。
[0010]一种CD38基因人源化的非人动物蛋白，该CD38基因人源化的非人动物蛋白中包含：与SEQ ID NO：1的编码蛋白所示的同一性至少为70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％。
[0011]本专利技术还提供一种CD38基因人源化的非人动物蛋白。
[0012]一种CD38基因人源化的非人动物蛋白，该CD38基因人源化的非人动物蛋白中包含：与SEQ ID NO：1的编码蛋白所示的差异不超过10、9、8、7、6、5、4、3、2或不超过1个氨基酸。
[0013]本专利技术还提供一种CD38基因人源化的非人动物蛋白。
[0014]一种CD38基因人源化的非人动物蛋白，该CD38基因人源化的非人动物蛋白中包含：与SEQ ID NO：1的编码蛋白所示的，包括取代、缺失和/或插入一个或多个氨基酸残基的氨基酸序列。
[0015]作为优选，所述CD38基因人源化的非人动物蛋白中来源于人CD38蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO：1的编码蛋白所示的氨基酸序列的全部或部分。
[0016]作为优选，所述CD38基因人源化的非人动物蛋白中来源于人CD38蛋白的氨基酸序列为与SEQ ID NO：1的编码蛋白所示的氨基酸序列同一性至少为70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％。
[0017]作为优选，所述CD38基因人源化的非人动物蛋白中来源于人CD38蛋白的氨基酸序列为与SEQ ID NO：1的编码蛋白所示氨基酸序列差异不超过10、9、8、7、6、5、4、3、2或不超过1个氨基酸。
[0018]作为优选，所述CD38基因人源化的非人动物蛋白中来源于人CD38蛋白的氨基酸序列为与SEQ ID NO：1的编码蛋白所示的，包括取代、缺失和/或插入一个或多个氨基酸残基的氨基酸序列。
[0019]作为优选，所述CD38基因人源化的非人动物蛋白中来源于非人动物CD38蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO：2的编码蛋白所示氨基酸序列的部分。
[0020]作为优选，所述CD38基因人源化的非人动物蛋白中来源于非人动物CD38蛋白的氨基酸序列与SEQ ID NO：2的编码蛋白所示氨基酸序列同一性至少为70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％。
[0021]作为优选，所述CD38基因人源化的非人动物蛋白中来源于非人动物CD38蛋白的氨
基酸序列与SEQ ID NO：2的编码蛋白所示氨基酸序列差异不超过10、9、8、7、6、5、4、3、2或不超过1个氨基酸。
[0022]作为优选，所述CD38基因人源化的非人动物蛋白中中来源于非人动物CD38蛋白的氨基酸序列与SEQ ID NO：2的编码蛋白所示的，包括取代、缺失和/或插入一个或多个氨基酸残基的氨基酸序列。
[0023]作为优选，所述非本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种CD38基因人源化的非人动物蛋白，该CD38基因人源化的非人动物蛋白中包含：SEQ ID NO：1的编码蛋白所示的全部或部分；或与SEQ ID NO：1的编码蛋白所示的同一性至少为70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％；或与SEQ ID NO：1的编码蛋白所示的差异不超过10、9、8、7、6、5、4、3、2或不超过1个氨基酸；或与SEQ ID NO：1的编码蛋白所示的，包括取代、缺失和/或插入一个或多个氨基酸残基的氨基酸序列；优选地，所述CD38基因人源化的非人动物蛋白中来源于人CD38蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO：1的编码蛋白所示的氨基酸序列的全部或部分；或所述CD38基因人源化的非人动物蛋白中来源于人CD38蛋白的氨基酸序列为与SEQ ID NO：1的编码蛋白所示的氨基酸序列同一性至少为70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％；或所述CD38基因人源化的非人动物蛋白中来源于人CD38蛋白的氨基酸序列为与SEQ ID NO：1的编码蛋白所示氨基酸序列差异不超过10、9、8、7、6、5、4、3、2或不超过1个氨基酸；或所述CD38基因人源化的非人动物蛋白中来源于人CD38蛋白的氨基酸序列为与SEQ ID NO：1的编码蛋白所示的，包括取代、缺失和/或插入一个或多个氨基酸残基的氨基酸序列；或所述CD38基因人源化的非人动物蛋白中来源于非人动物CD38蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO：2的编码蛋白所示氨基酸序列的部分；或所述CD38基因人源化的非人动物蛋白中来源于非人动物CD38蛋白的氨基酸序列与SEQ ID NO：2的编码蛋白所示氨基酸序列同一性至少为70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％；或所述CD38基因人源化的非人动物蛋白中来源于非人动物CD38蛋白的氨基酸序列与SEQ ID NO：2的编码蛋白所示氨基酸序列差异不超过10、9、8、7、6、5、4、3、2或不超过1个氨基酸；或所述CD38基因人源化的非人动物蛋白中中来源于非人动物CD38蛋白的氨基酸序列与SEQ ID NO：2的编码蛋白所示的，包括取代、缺失和/或插入一个或多个氨基酸残基的氨基酸序列；优选地，所述非人动物为小鼠。2.一种嵌合CD38基因，该嵌合CD38基因包含：人CD38核苷酸序列的SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4所示核苷酸序列的全部或部分；或与人CD38核苷酸序列的SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4所示核苷酸序列的同一性至少为70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％；或与人CD38核苷酸序列的SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4所示核苷酸序列差异不超过10、9、8、7、6、5、4、3、2或不超过1个核苷酸；或与人CD38核苷酸序列的SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4所示核苷酸序列的，包括取代、缺失和/或插入一个或多个核苷酸的核苷酸序列。3.一种CD38构建体，该CD38构建体包含人CD38基因或嵌合CD38基因，该构建体表达人
或人源化CD38蛋白，该人源化CD38蛋白为权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：邢俊，汪慧怡，史培良，吴正中，宁椿游，
申请(专利权)人：成都药康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：