一种重组微生物及其构建方法与应用技术

本发明专利技术涉及一种重组微生物及其构建方法与应用，本发明专利技术所提供的重组微生物涉及磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶、二氢硫辛酰胺乙酰转移酶的突变体。具体地，本发明专利技术所提供的重组微生物中含有编码基因ppc和/或aceF的突变体；更具体地，重组微生物中ppc基因编码的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的第186位氨基酸和/或aceF基因编码的二氢硫辛酰胺乙酰转移酶的第77位氨基酸发生突变。本发明专利技术通过对磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶，和/或二氢硫辛酰胺乙酰转移酶进行修饰，使得微生物能够高效地生成缬氨酸等支链氨基酸或其衍生物。或其衍生物。

【技术实现步骤摘要】
一种重组微生物及其构建方法与应用


[0001]本专利技术涉及生物工程
，具体涉及一种重组微生物及其构建方法与应用。

技术介绍

[0002]L
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缬氨酸(L
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valine)，化学名称为L
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α
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氨基异戊酸，分子式为C5H
11
NO2，相对分子质量为117.15。L
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缬氨酸呈白色结晶或结晶性粉末，无臭，味苦，在水中溶解度：25℃为88.5g/L，50℃为96.2g/L，不溶于冷乙醇、乙醚、丙酮。L
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缬氨酸等电点为5.96，熔点315℃。
[0003]L
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缬氨酸是人体八种必需氨基酸之一，又是三种支链氨基酸(包括缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸)之一，因其特殊的结构和功能，在人类生命代谢中具有特别重要的地位。L
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缬氨酸可以广泛应用于医药工业、食品工业和饲料工业等。医药工业中，L
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缬氨酸可作氨基酸输液、综合氨基酸制剂的主要成分，可治疗肝功能衰竭、中枢神经系统本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的突变体，其特征在于，所述突变体是，由ppc基因编码的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的第186位氨基酸由甘氨酸突变为丙氨酸、缬氨酸或精氨酸。2.根据权利要求1所述的突变体，其特征在于，磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID No.10
‑
12。3.二氢硫辛酰胺乙酰转移酶的突变体，其特征在于，所述突变体是，由aceF基因编码的二氢硫辛酰胺乙酰转移酶的第77位氨基酸由甘氨酸突变为天冬氨酸、缬氨酸或丙氨酸。4.根据权利要求3所述的突变体，其特征在于，二氢硫辛酰胺乙酰转移酶的突变体的氨基酸序列如SEQ ID No.14
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16所示。5.编码权利要求1
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4任一项所述突变体的核苷酸序列，其特征在于，编码磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶突变体的核苷酸序列如SEQ ID No.2
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4所示；编码二氢硫辛酰胺乙酰转移酶突变体的核苷酸序列如SEQ ID No.6
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴涛，栾明月，张晓云，姚嘉琪，薛婷莉，胡丹，赵津津，李岩，
申请(专利权)人：廊坊梅花生物技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：