基于CRISPR/Cas系统调控基因表达的方法及其应用技术方案

技术编号:37885682 阅读:49 留言:0更新日期:2023-06-18 11:51
本发明专利技术提供了基于CRISPR/Cas系统调控基因表达的方法及其应用。本发明专利技术既可以利用截短型间隔序列实现高效的基因表达转录调控,还可以利用截短型间隔序列和常规型间隔序列实现同时的基因调控和基因编辑。同时的基因调控和基因编辑。

【技术实现步骤摘要】
基于CRISPR/Cas系统调控基因表达的方法及其应用


[0001]本专利技术涉及生物工程领域,具体而言,本专利技术涉及基于CRISPR/Cas系统调控基因表达的方法及其应用。

技术介绍

[0002]CRISPR(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)/Cas(CRISPR

associated)系统是细菌抵御外源核酸物质入侵的一种适应性免疫系统。CRISPR/Cas系统在向导RNA引导下实现特定位点结合,当突变Cas9核酸酶活性位点或者删除I型CRISPR系统中的Cas3核酸酶,可以实现细菌的基因转录抑制,从而加速了必需基因的功能研究、基因转录调控网络开发以及全基因组水平的功能基因筛选。
[0003]在自然界中,将近一半的细菌自身就拥有CRISPR/Cas系统,利用天然的CRISPR/Cas系统来调控基因表达,可以消除表达外源Cas蛋白对细菌的毒性作用。但是Cas9和Cas3突变体的获取,增加了细菌基因表达调控技术的复杂性。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.基于CRISPR/Cas系统调控基因表达的方法,其特征在于,所述方法包括将表达前体crRNA的CRISPR阵列构建于载体中,所述CRISPR阵列包括间隔序列,当所述载体在细菌中表达时,所述间隔序列的长度小于26nt,优选地所述间隔序列的长度为14nt至24nt,优选地所述间隔序列的长度选自14、16、18、20、22和24nt。2.根据权利要求1所述的基于CRISPR/Cas系统调控基因表达的方法,其特征在于,所述CRISPR阵列还包括重复序列,当所述载体在细菌中表达时,所述重复序列的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。3.根据权利要求2所述的基于CRISPR/Cas系统调控基因表达的方法,其特征在于,所述CRISPR阵列的最小单位包括重复序列

间隔序列

重复序列。4.根据权利要求1

3中任一项所述的基于CRISPR/Cas系统调控基因表达的方法,其特征在于,所述CRISPR阵列包括靶向不同基因的多个间隔序列。5.根据权利要求4所述的基于CRISPR/Cas系统调控基因表达的方法,其特征在于,...

【专利技术属性】
技术研发人员:邱金龙姜丹丹梁月婷张丹丹
申请(专利权)人:中国科学院微生物研究所
类型:发明
国别省市:

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