木葡糖酸醋杆菌中Weimberg木糖代谢途径的构建方法技术

本发明专利技术属于基因工程领域，具体涉及一种木葡糖酸醋杆菌木糖利用代谢的构建方法。本发明专利技术将木糖Weimberg代谢途径相关基因构建于一个重组质粒表达载体上，将重组质粒整合到宿主菌木葡糖酸醋杆菌中获得重组木葡糖酸醋杆菌工程菌株CGMCC 26045(其于2022年11月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.26045)的构建方法。并通过发酵初步确定其利用木糖产细菌纤维素(bacterial cellulose,BC)的能力高于木葡糖酸醋杆菌原始菌。通过发酵参数测定，工程菌比野生菌BC膜产量提高了100％以上，木糖利用率提高了40％以上。提高了40％以上。

【技术实现步骤摘要】
木葡糖酸醋杆菌中Weimberg木糖代谢途径的构建方法


[0001]本专利技术属于基因工程
，具体涉及木葡糖酸醋杆菌中异源表达木糖代谢途径及其应用。

技术介绍

[0002]细菌纤维素(bacterial cellulose,BC)是由β
‑
1,4糖苷键连接组成的一种独特的纳米聚合物。与植物纤维素相比，其不含半纤维素和木质素，且具有极高的纯度与生物降解性。经过功能化的细菌纤维素在化学传感、生物成像、生物医用材料等众多领域具有良好的应用前景。
[0003]木葡糖酸醋杆菌(Komagataeibacter xylinus,K.xylinus)是BC的主要生产菌株之一。目前在工业生产中所使用的HS培养基成本较高。为降低生产成本，廉价培养基的使用具有较高的研究前景。其中，木质纤维素是最首选的底物之一。木质纤维素是一种丰富的可再生资源，可以转化为多种生物能源和化学产品。其主要由纤维素、半纤维素、木质素组成，水解后的中间产物纤维二糖及终产物葡萄糖、木糖能够做为碳源供K.xylinus生长并产生BC。然而，相对于以葡萄糖为碳源生本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种木葡糖酸醋杆菌中Weimberg木糖代谢途径的构建方法，其特征在于：首次将Weimberg木糖代谢途径引入木葡糖酸醋杆菌中，将木糖Weimberg代谢途径相关基因构建于一个重组质粒表达载体上，将重组质粒整合到宿主菌木葡糖酸醋杆菌中获得重组木葡糖酸醋杆菌工程菌株CGMCC 26045的构建方法。2.根据权利要求1所述重组工程菌株构建方法，其特征在于：木葡糖酸醋杆菌可以自身将木糖转化成木糖酸，只需异源表达来自新月丙杆菌的木糖Weimberg代谢途径相关基因中的三个基因xylA(SEQ ID NO.4)、xylD(SEQ ID NO.5)、xylX(SEQ ID NO.6)。3.根据权利要求1所述重组工程菌株构建方法，其特征在于：将来自新月丙杆菌的木糖W...

【专利技术属性】
技术研发人员：李文超，刘欢，吴月，许明芳，钟成，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：