一种芎菊上清片中8种成分的含量测定方法技术

本发明专利技术提供了一种同时测定芎菊上清片中8种成分的含量测定方法，本发明专利技术采用HPLC法测定新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、1,3

【技术实现步骤摘要】
一种芎菊上清片中8种成分的含量测定方法


[0001]本专利技术属于中药
，具体涉及一种芎菊上清片中8种成分的含量测定方法。
[0002]专利技术背景
[0003]芎菊上清片为2020年版《中国药典》收录品种，由川芎、菊花、黄芩、栀子、炒蔓荆子、黄连等15味药组成，方中菊花、川芎合用，清热解表，行气活血，祛风止痛，共为君药；连翘、薄荷、蔓荆子疏散风热，清利头目，祛风止痛，黄芩、栀子、黄连清热泄火，解毒止痛，辅助君药清热解表，祛风止痛，共为臣药；全方共奏清热解表，散风止痛之功。现行质量标准只收载有针对菊花、栀子、黄连的薄层鉴别以及黄芩中黄芩苷的含量测定，并未有针对君药菊花的含量测定项目。
[0004]虽然目前有采用HPLC法同时测定芎菊上清片中多成分的研究，但测定成分大多数为黄芩苷、盐酸小檗碱等，专门针对菊花中多成分的含量测定方法未见相关报道。
[0005]通过查阅文献及实验研究可知，虽然菊花药材中主要含有绿原酸、木犀草苷、3,5
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二咖啡酰奎宁酸和1,5
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二咖啡酰奎宁酸等成分，而新绿原酸、隐绿原酸及1,3
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二咖啡酰奎宁酸等成分含量较低，但在芎菊上清片中，发现其还含有较高含量的新绿原酸、隐绿原酸、1,3
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二咖啡酰奎宁酸及3,4
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二咖啡酰奎宁酸等成分。中药质量最重要的本质是药效成分的含量，而这些药效物质在药材加工或中成药的生产过程中也会在物理、化学等因素的作用下发生化学反应和相互转化，通过一系列的研究发现在芎菊上清片的制备过程中，菊花的化学成分之间会发生相互转化。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供了一种同时测定芎菊上清片中8种成分的含量测定方法，本专利技术采用HPLC法测定新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、1,3
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二咖啡酰奎宁酸、木犀草苷、3,4
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二咖啡酰奎宁酸、3,5
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二咖啡酰奎宁酸和1,5
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二咖啡酰奎宁酸。
[0007]为解决上述问题，本专利技术采用如下技术方案：一种芎菊上清片中8种成分的含量测定方法，采用HPLC法建立了同时测定芎菊上清片中8种成分的含量测定方法，其特征在于：包括以下步骤：
[0008]a、制备混合对照品溶液；
[0009]b、制备供试品溶液；
[0010]c、测定法：分别精密吸取混合对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，外标法计算含量，即得；
[0011]色谱条件：
[0012]色谱柱：PICKERINGC18柱(4.6
×
250mm，5μm)，
[0013]柱温：30℃，
[0014]流速：1mL
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min
–1，
[0015]检测波长：328nm，
[0016]进样量：10μl，
[0017]以乙腈为流动相A，0.4％磷酸为流动相B，梯度洗脱程序见下表，
[0018]流动相梯度洗脱程序
[0019][0020]优选的，步骤a中，混合对照品溶液的制备：称取新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、1,3
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二咖啡酰奎宁酸、木犀草苷、3,4
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二咖啡酰奎宁酸、3,5
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二咖啡酰奎宁酸、1,5
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二咖啡酰奎宁酸对照品，加70％甲醇制成质量浓度依次为20μg
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‑1、30μg
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‑1、20μg
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‑1、20μg
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‑1、20μg
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‑1、30μg
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‑1、30μg
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‑1、10μg
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mL
‑1的混合对照品溶液。
[0021]优选的，步骤b中，供试品溶液的制备：取芎菊上清片样品20片，除去包衣，称定，研细，取0.6g，称定，置具塞锥形瓶中，加入70％甲醇50mL，密塞，称定重量，超声处理40分钟，取出，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
[0022]本专利技术的有益效果在于：
[0023]本专利技术采用HPLC法建立了同时测定芎菊上清片中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、1,3
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二咖啡酰奎宁酸、木犀草苷、3,4
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二咖啡酰奎宁酸、3,5
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二咖啡酰奎宁酸和1,5
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二咖啡酰奎宁酸等8种成分的含量测定方法，方法简便、专属性强，为芎菊上清片质量标准的建立提供依据，所建立的方法从一定程度上可以起到对工艺控制的作用，为产品的质量控制和质量评价提供参考。
附图说明
[0024]图1为各成分混合对照品HPLC色谱图；
[0025]图2为各成分芎菊上清片样品HPLC色谱图；
[0026]图3为各成分阴性样品HPLC色谱图；
[0027]其中：1、新绿原酸；2、绿原酸；3、隐绿原酸；4、1,3
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二咖啡酰奎宁酸；5、木犀草苷；6、3,4
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二咖啡酰奎宁酸；7、3,5
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二咖啡酰奎宁酸；8、1,5
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二咖啡酰奎宁酸。
具体实施方式
[0028]下面结合实施例对本申请作进一步的详细说明。可以理解的是，此处所描述的具体实施例仅仅用于解释相关专利技术，而非对该专利技术的限定。
[0029]实施例
[0030]1.仪器与试药
[0031]1.1仪器
[0032]高效液相色谱仪，配备四元泵和DAD检测器(美国Thermo公司)；KQ
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400KDE型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；Mettler XPE26型电子天平(瑞士梅特勒公司，0.001mg)；MettlerXS105型电子天平(瑞士梅特勒公司，0.01mg)；Milli
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Q型超纯水净化系统(美国Millipore公司)。
[0033]1.2试药
[0034]乙腈为色谱纯，美国Sigma公司；水为超纯水，自制；其他试剂均为分析纯；绿原酸对照品(批号：110753
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202119，含量以96.3本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种芎菊上清片中8种成分的含量测定方法，采用HPLC法建立了同时测定芎菊上清片中8种成分的含量测定方法，其特征在于：包括以下步骤：a、制备混合对照品溶液；b、制备供试品溶液；c、测定法：分别精密吸取混合对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，外标法计算含量，即得；色谱条件：色谱柱：PICKERINGC18柱(4.6
×
250mm，5μm)，柱温：30℃，流速：1mL
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–1，检测波长：328nm，进样量：10μl，以乙腈为流动相A，0.4％磷酸为流动相B，梯度洗脱程序见下表，流动相梯度洗脱程序。2.根据权利要求1所述的一种芎菊上清片中8种成分的含量测定方法，其特征在于：步骤a中，混合对照品溶液的制备：称取新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、1,3
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二咖啡酰奎宁酸、木犀草苷、3,4
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二咖啡酰奎宁酸、3,5
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二...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵振霞，朱靖，刘永利，曹春琪，白洁，张丽，王俊帅，
申请(专利权)人：河北省药品医疗器械检验研究院河北省化妆品检验研究中心，
类型：发明
国别省市：