一种含有芦荟凝胶的植物组织培养基及其制备方法技术

本发明专利技术提供一种含有芦荟凝胶的植物组织培养基及其制备方法，涉及植物组织培养技术领域。本发明专利技术的植物组织培养基包括诱导培养基和再生培养基，本发明专利技术以MS培养基为基础，根据不同阶段组织培养需求，在培养基中添加芦荟凝胶、生长素等活性成分，保证了愈伤组织高诱导率、植株高再生率及炼苗高成活率，显著提高了组织培养效率，为培养基的改良提供了新的方向。向。

【技术实现步骤摘要】
一种含有芦荟凝胶的植物组织培养基及其制备方法


[0001]本专利技术涉及植物组织培养
，特别是涉及一种含有芦荟凝胶的植物组织培养基及其制备方法。

技术介绍

[0002]植物组织培养是取植物体的细胞、组织或者器官的一部分，于无菌环境下接种到培养基中进行培养以获得植物新个体的方法。
[0003]现有组织培养基主要以MS、B5、N6及GS培养基为代表，其中，MS培养基中钾盐、铵盐及硝酸盐的含量比较高，广泛用于植物器官、细胞及原生质体的培养；B5、N6和GS培养基中也含有较高含量的硝酸钾，比较适合豆科和十字花科植物的培养，其中GS培养基应用较为广泛。
[0004]目前，MS培养基的使用已经非常广泛，其是一种比较稳定的平衡溶液，许多植物的细胞、组织和器官在MS培养基上表现出良好的生长和发育，但尽管如此，MS培养基依然有待改良，以提升其组织培养效率。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种含有芦荟凝胶的植物组织培养基及其制备方法，以解决上述现有技术存在的问题，实现高效率组织培养，保证较高成苗率。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0007]本专利技术技术方案之一：提供含有芦荟凝胶的植物组织培养基，包括诱导培养基和再生培养基；其中：
[0008]所述诱导培养基配方为：1/2MS+萘乙酸0.03
‑
0.05mg/L+赤霉素GA3 0.01
‑
0.02mg/L+氯吡脲1.0
‑
2.0mg/L+谷氨酰胺150
‑
200mg/L+芦荟凝胶3
‑
6g/L+蔗糖25
‑
30g/L+琼脂6
‑
7g/L，PH5.8；
[0009]所述再生培养基配方为：1/2MS+芦荟凝胶8
‑
10g/L+吲哚
‑3‑
乙酸0.05～0.5mg/L+吲哚丁酸0.01
‑
0.03mg/L+TDZ 0.02
‑
0.03mg/L+蛋白胨0.2
‑
0.4g/L+甘氨酸1.5
‑
2mg/L+蔗糖8
‑
10g/L+琼脂6
‑
7g/L，PH5.8。
[0010]作为本专利技术的进一步优选，所述再生培养基中吲哚
‑3‑
乙酸和吲哚丁酸的质量比为3:1。
[0011]本专利技术技术方案之二：提供上述含有芦荟凝胶的植物组织培养基的制备方法，包括以下步骤：
[0012]以1/2MS为基础培养基，将各原料组分按照质量百分含量与之复配，得到所述含有芦荟凝胶的植物组织培养基。
[0013]本专利技术技术方案之三：提供上述含有芦荟凝胶的植物组织培养基在百香果和葡萄组织培养中的应用。
[0014]本专利技术中，组织培养所用外植体优选为植物体的茎。
[0015]本专利技术技术方案之四：提供一种百香果组织培养的方法，包括以下步骤：
[0016](1)将百香果外植体接种到上述诱导培养基中，诱导培养得到愈伤组织；
[0017](2)将所述愈伤组织接种到上述再生培养基中进行培养，得到幼苗。
[0018]作为本专利技术的进一步优选，步骤(1)中诱导培养的条件为：光照周期为10
‑
12h/d，光照强度为2500
‑
3500lx，培养温度为25
‑
27℃，相对湿度为55
‑
60％，每天采用紫外灯灭菌10
‑
15min。
[0019]作为本专利技术的进一步优选，步骤(2)中培养的条件为：光照周期为8
‑
12h/d，光照强度为3000
‑
3500lx，培养温度为25
‑
27℃，相对湿度为55
‑
60％，每天采用紫外灯灭菌10
‑
15min。
[0020]作为本专利技术的进一步优选，在培养得到幼苗后，还包括将所述幼苗进行炼苗的步骤。
[0021]本专利技术技术方案之五：提供一种葡萄组织培养的方法，包括以下步骤：
[0022]利用上述再生培养基对葡萄外植体进行培养，得到再生外植体。
[0023]作为本专利技术的进一步优选，所述培养的条件为：光照周期为10
‑
12h/d，光照强度为2500
‑
3500lx，培养温度为25
‑
27℃，相对湿度为55
‑
60％，每天采用紫外灯灭菌10
‑
15min。
[0024]本专利技术发现，在芦荟凝胶添加的情况下，氯吡脲和谷氨酰胺的添加能显著改善诱导培养基的组织培养效率。
[0025]截至目前，MS培养基已经开发出许多改良形式，例如增加氮至50
‑
60mM能够明显刺激烟草细胞的生长。本专利技术在MS培养基的基础上，根据不同阶段组织培养需求，在培养基中添加芦荟凝胶、生长素等活性成分，保证了愈伤组织高诱导率、植株高再生率及炼苗高成活率。
[0026]芦荟凝胶是芦荟叶内区薄壁管状细胞内生成的透明粘液，主要含有蒽醌类化合物、多糖、蛋白质、酶、氨基酸、维生素等多种活性成分，本专利技术根据不同阶段诱导需求，将芦荟凝胶与其他活性成分复配，添加于组织培养基中，保证了各阶段营养所需。
[0027]本专利技术公开了以下技术效果：
[0028]本专利技术以MS组织培养基为基础进行了改良，得到的该组织培养基可实现愈伤组织诱导率和植株再生率高达100％，炼苗成活率显著提高，显著提高了组织培养效率，为培养基的改良提供了新的方向。
具体实施方式
[0029]现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本专利技术的限制，而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
[0030]应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本专利技术。另外，对于本专利技术中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值，以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本专利技术内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
[0031]除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本专利技术所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本专利技术仅描述了优选的方法和材料，但是在本专利技术的
实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
[0032]在不背离本专利技术的范围或精神的情况下，可对本专利技术说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本专利技术的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见得本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.含有芦荟凝胶的植物组织培养基，其特征在于，包括诱导培养基和再生培养基；其中：所述诱导培养基配方为：1/2MS+萘乙酸0.03
‑
0.05mg/L+赤霉素GA3 0.01
‑
0.02mg/L+氯吡脲1.0
‑
2.0mg/L+谷氨酰胺150
‑
200mg/L+芦荟凝胶3
‑
6g/L+蔗糖25
‑
30g/L+琼脂6
‑
7g/L，PH5.8；所述再生培养基配方为：1/2MS+芦荟凝胶8
‑
10g/L+吲哚
‑3‑
乙酸0.05～0.5mg/L+吲哚丁酸0.01
‑
0.03mg/L+TDZ 0.02
‑
0.03mg/L+蛋白胨0.2
‑
0.4g/L+甘氨酸1.5
‑
2mg/L+蔗糖8
‑
10g/L+琼脂6
‑
7g/L，PH5.8。2.根据权利要求1所述含有芦荟凝胶的植物组织培养基，其特征在于，所述再生培养基中吲哚
‑3‑
乙酸和吲哚丁酸的质量比为3:1。3.如权利要求1
‑
2任一项所述含有芦荟凝胶的植物组织培养基的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：以1/2MS为基础培养基，将各原料组分按照质量百分含量与之复配，得到所述含有芦荟凝胶的植物组织培养基。4.如权利要求1
‑
2任一项所述含有芦荟凝胶的植物组织培养基在百香果和葡萄组织培养中的应用。5.一种百香果组织培养的方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：周权宝，郭琪，余俊华，罗雅琪，周子添，阮昊，吕朋，谌艺瑞，耿柯柯，
申请(专利权)人：东华理工大学，
类型：发明
国别省市：