抗人Trop2抗体-喜树碱类药物偶联物及其医药用途制造技术

将靶向于人Trop2的抗体与喜树碱类药物进行偶联，形成质量稳定、均一性优良的抗体

【技术实现步骤摘要】
抗人Trop2抗体
‑
喜树碱类药物偶联物及其医药用途


[0001]本专利技术涉及生物制药领域，具体涉及一种抗人Trop2抗体与喜树碱类药物形成的抗体
‑
药物偶联物，以及该抗体
‑
药物偶联物的制备方法和应用。本专利技术还涉及可与Ab偶联形成抗体
‑
毒素偶联物的连接子
‑
药物化合物。

技术介绍

[0002]人滋养层细胞表面抗原2(Human trophoblast cell surface antigen 2，hTROP2)是由TACSTD2基因编码的单次跨膜Ⅰ型细胞膜蛋白，首次由M.Lipinski等人在研究正常人体及癌变滋养层细胞时发现。在随后的研究过程中，hTROP2分子也被称为能被将胃癌细胞株免疫而得到的小鼠单克隆抗体GA733识别的而肿瘤抗原GA733
‑
1，以及通过非小细胞肺癌细胞免疫而得到的小鼠单克隆抗体RS7
‑
3G11识别的表皮糖蛋白，至1995年该基因被克隆后，证实它们为同一种分子。<br/>[0003]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种如通式I所示的配体
‑
喜树碱类衍生物偶联物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物；其中：Ab为靶向人Trop2的抗体或其抗原结合片段；L1非限制性地选自：优选L1为优选L1为L2具有如下式A所示的结构，其中Y为支架，选自C1
‑
C6烷基、取代C1
‑
C6烷基或C3
‑
C8环烷基；优选Y为C1
‑
C6烷基；Ac为亲水结构单元；与Y相连的2号碳具有R构型或S构型的绝对手性；L3存在或者不存在，当存在时，L3选自PEG亲水单元：o选自1
‑
10的整数，优选2
‑
8的整数；L4为酶切单元；L5为连接单元；式I中与N相连的1号手性碳原子具有R构型或者S构型的绝对手性；R选自氢原子、氘原子、卤素、C1
‑
C6烷基、取代C1
‑
C6烷基、氘代C1
‑
C6烷基、C3
‑
C8环烷基C1
‑
C6烷基、C1
‑
C6烷氧基C1
‑
C6烷基、C6
‑
C10芳基、取代C6
‑
C10芳基、5
‑
10元杂芳基、取代5
‑
10元杂芳基；优选R选自氢原子或C1
‑
C6烷基；R1选自氢原子、氘原子、卤素、C1
‑
C6烷基、取代C1
‑
C6烷基、氘代C1
‑
C6烷基、C3
‑
C8环烷基C1
‑
C6烷基、C1
‑
C6烷氧基C1
‑
C6烷基、羧基、3
‑
7元杂环基、取代3
‑
7元杂环基、C6
‑
C10芳基、取代C6
‑
C10芳基、5
‑
10元杂芳基、取代5
‑
10元杂芳基；优选R1选自氢原子或C1
‑
C6烷基；更优选R1选自C1
‑
C6烷基；R2选自氢原子、氘原子、卤素、C1
‑
C6烷基、取代C1
‑
C6烷基、氘代C1
‑
C6烷基、C3
‑
C8环烷基C1
‑
C6烷基、C1
‑
C6烷氧基C1
‑
C6烷基、羧基、3
‑
7元杂环基、取代3
‑
7元杂环基、C6
‑
C10芳基、取代C6
‑
C10芳基、5
‑
10元杂芳基、取代5
‑
10元杂芳基；优选R2选自氢原子、卤素或C1
‑
C6烷基；更优选R2选自卤素；X选自
‑
C(O)
‑
CR
a
R
b
‑
(CR3R4)
m
‑
O
‑
、
‑
C(O)
‑
CR
a
R
b
‑
(CR3R4)
m
‑
NH
‑
或
‑
C(O)
‑
CR
a
R
b
‑
(CR3R4)
m
‑
S
‑
；优选X选自
‑
C(O)
‑
CR
a
R
b
‑
(CR3R4)
m
‑
O
‑
；R
a
和R
b
各自独立地选自氢原子、氘原子、卤素、C1
‑
C6烷基、氘代C1
‑
C6烷基、卤代C1
‑
C6烷基、C3
‑
C8环烷基、C3
‑
C8环烷基C1
‑
C6烷基、C6
‑
C10芳基C1
‑
C6烷基、C1
‑
C6烷氧基C1
‑
C6烷基、3
‑
7元杂环基、取代3
‑
7元杂环基、C6
‑
C10芳基、取代C6
‑
C10芳基、5
‑
10元杂芳基、取代5
‑
10元杂芳基；优选R
a
和R
b
各自独立地选自氢原子、C1
‑
C6烷基、卤代C1
‑
C6烷基、C3
‑
C8环烷基C1
‑
C6烷基或C6
‑
C10芳基C1
‑
C6烷基；或者，R
a
、R
b
及其所连接碳原子构成C3
‑
C8环烷基、C3
‑
C8环烷基C1
‑
C6烷基、3
‑
7元杂环基、取代3
‑
7元杂环基；优选R
a
、R
b
及其所连接碳原子构成C3
‑
C8环烷基；R3、R4相同或者不同，且分别独立地为氢原子、氘原子、卤素、C1
‑
C6烷基、卤代C1
‑
C6烷基、氘代C1
‑
C6烷基、C1
‑
C6烷氧基、羟基、氨基、氰基、硝基、羟C1
‑
C6烷基、C3
‑
C8环烷基、3
‑
7元杂环基、取代3
‑
7元杂环基；优选R3、R4分别独立地为氢原子或C1
‑
C6烷基；或者，R3、R4及其所连接碳原子构成C3
‑
C8环烷基、C3
‑
C8环烷基C1
‑
C6烷基、3
‑
7元杂环基、取代3
‑
7元杂环基；m选自0
‑
4的整数，优选为0、1；n选自1
‑
10的整数。2.根据权利要求1所述如通式I所示的配体
‑
喜树碱类衍生物偶联物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，Ab为靶向人Trop2抗体或其抗原结合片段。3.根据权利要求1或2所述如通式I所示的配体
‑
喜树碱类衍生物偶联物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，Ab的抗体包含：IgG1重链，κ轻链，所述IgG1重链和κ轻链所组成的抗体特异性识别人TROP2蛋白。4.根据权利要求1
‑
3任一项所述如通式I所示的配体
‑
喜树碱类衍生物偶联物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，其特征在于，Ab的抗体的κ轻链包含如SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：9所示的CDR，IgG1重链包含如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3所示的CDR。
5.根据权利要求1
‑
4任一项所述如通式I所示的配体
‑
喜树碱类衍生物偶联物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，Ab的抗体由重链和轻链组成，所述的轻链包含核酸编码序列分别为SEQ ID NO：27、SEQ ID NO：28和SEQ ID NO：29的CDRL1、CDRL2和CDRL3，所述的重链包含核酸编码序列分别为SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：22和SEQ ID NO：23的CDRH1、CDRH2和CDRH3。6.根据权利要求1
‑
5任一项所述如通式I所示的配体
‑
喜树碱类衍生物偶联物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，Ab的抗体由重链和轻链组成，所述的重链包含序列为SEQ ID NO：13的重链可变区，所述的轻链包含序列为SEQ ID NO：14的轻链可变区。7.根据权利要求1
‑
6任一项所述如通式I所示的配体
‑
喜树碱类衍生物偶联物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，Ab的抗体由重链和轻链组成，所述的重链可变区包含核酸编码序列为SEQ ID NO：33的重链可变区，所述的轻链可变区包含核酸编码序列为SEQ ID NO：34的轻链可变区。8.根据权利要求1
‑
7任一项所述如通式I所示的配体
‑
喜树碱类衍生物偶联物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，Ab的抗体重链氨基酸序列为SEQ ID NO：17，抗体轻链的氨基酸序列为SEQ ID NO：18。9.根据权利要求1
‑
8任一项所述如通式I所示的配体
‑
喜树碱类衍生物偶联物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，Ab的抗体重链核酸编码序列为SEQ ID NO：37，抗体轻链的核酸编码序列为SEQ ID NO：38。10.根据权利要求1
‑
3任一项所述如通式I所示的配体
‑
喜树碱类衍生物偶联物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，Ab的抗体的κ轻链包含如SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12所示的CDR，IgG1重链包含如SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6所示的CDR。11.根据权利要求1
‑
3、10任一项所述如通式I所示的配体
‑
喜树碱类衍生物偶联物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，Ab的抗体的κ轻链包含核酸编码序列分别为SEQ ID NO：30、SEQ ID NO：31和SEQ ID NO：32的CDRL1、CDRL2和CDRL3，Ab的抗体的重链包含核酸编码序列分别为SEQ ID NO：24、SEQ ID NO：25和SEQ ID NO：26的CDRH1、CDRH2和CDRH3。12.根据权利要求1
‑
3、10
‑
11任一项所述如通式I所示的配体
‑
喜树碱类衍生物偶联物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，Ab的抗体由重链和轻链组成，所述的重链包含序列为SEQ ID NO：15的重链可变区，所述的轻链包含序列为SEQ ID NO：16的轻链可变区。13.根据权利要求1
‑
3、10
‑
12任一项所述如通式I所示的配体
‑
喜树碱类衍生物偶联物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，Ab的抗体由重链和轻链组成，所述的重链可变区包含核酸编码序列为SEQ ID NO：35的重链可变区，所述的轻链可变区包含核酸编码序列为SEQ ID NO：36的轻链可变区。14.根据权利要求1
‑
3、10
‑
13任一项所述如通式I所示的配体
‑
喜树碱类衍生物偶联物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，Ab的抗体重链氨基酸序列为SEQ ID NO：19，抗体轻链的氨基酸序列为SEQ ID NO：20。15.根据权利要求1
‑
3、10
‑
14任一项所述如通式I所示的配体
‑
喜树碱类衍生物偶联物，
或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，Ab的抗体重链核酸编码序列为SEQ ID NO：39，抗体轻链的核酸编码序列为SEQ ID NO：40。16.根据权利要求1
‑
15中任一项所述如通式I所示的配体
‑
喜树碱类衍生物偶联物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，所述X非限制性地选自以下结构或其异构体：其中左侧波浪线与喜树碱衍生物部分相连，右侧波浪线与L5相连。17.根据权利要求1
‑
16中任一项所述如通式Ⅰ所示的配体
‑
喜树碱类衍生物偶联物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：L4非限制性地选自由氨基酸构成的肽残基，其中任选地，所述氨基酸进一步被选自氘原子、卤素、羟基、氰基、氨基、硝基、羧基、C1
‑
C6烷基、取代C1
‑
C6烷基、C1
‑
C6烷氧基和C3
‑
C8环烷基或者取代C3
‑
C8环烷基中的一个或多个取代基所取代；优选地，所述肽残基为由一个、两个或者多个选自苯丙氨酸(F)、甘氨酸(G)、缬氨酸(V)、赖氨酸(K)、瓜氨酸(C)、丝氨酸(S)、谷氨酸(E)或者天冬氨酸(D)中的氨基酸形成的肽残基；更优选地，所述肽残基为由甘氨酸(G)
‑
甘氨酸(G)
‑
苯丙氨酸(F)
‑
甘氨酸(G)组成的四肽残基。18.根据权利要求1
‑
17中任一项所述如通式I所示的配体
‑
喜树碱类衍生物偶联物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：L5非限制性地选自
‑
NR5(CR6R7)
q
‑
或者化学键，q选自0
‑
6的整数；R5、R6和R7相同或者不同，且各自独立地选自氢原子、氘原子、卤素、C1
‑
C6烷基、取代C1
‑
C6烷基、氘代C1
‑
C6烷基、C3
‑
C8环烷基、C3
‑
C8环烷基C1
‑
C6烷基、C1
‑
C6烷氧基C1
‑
C6烷基、3
‑
7元杂环基、取代3
‑
7元杂环基、C6
‑
C10芳基、取代C6
‑
C10芳基、5
‑
10元杂芳基、取代5
‑
10元杂芳基；优选地，R5、R6和R7各自独立地选自氢原子或C1
‑
C6烷基；更优选地，R5、R6和R7各自独立地选自氢原子。19.根据权利要求1
‑
18中任一项所述如通式I所示的配体
‑
喜树碱类衍生物偶联物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：所述连接单元
‑
L1‑
L2‑
L3‑
L4‑
L5‑
非限制性地选自以下结构；
优选为其中：Ac为亲水结构单元；R5、R6和R7相同或者不同，且各自独立地选自氢原子、氘原子、卤素、C1
‑
C6烷基、取代C1
‑
C6烷基、氘代C1
‑
C6烷基、C3
‑
C8环烷基、C3
‑
C8环烷基C1
‑
C6烷基、C1
‑
C6烷氧基C1
‑
C6烷基、3
‑
7元杂环基、取代3
‑
7元杂环基、C6
‑
C10芳基、取代C6
‑
C10芳基、5
‑
10元杂芳基、取代5
‑
10元杂芳基；优选地，R5、R6和R7各自独立地选自氢原子或C1
‑
C6烷基；更优选地，R5、R6和R7各自独立地选自氢原子；与N相连的2号碳原子具有R构型或者S构型的绝对手性；左侧波浪线与抗体或其抗原结合片段部分相连，右侧波浪线与X相连；o选自1
‑
10的整数。20.一种如通式Ⅱ所示的配体
‑
喜树碱类衍生物偶联物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物；其中：Ab为靶向人Trop2的抗体或其抗原结合片段；L1为连接单元与Ab连接，非限制性地选自：L1优选为优选L1为L3存在或者不存在，当L3存在时，L3选自o选自1
‑
10的整数，优选2
‑
8的整数；Ac为亲水结构单元；1位、2位及3位手性碳原子具有R绝对构型或S绝对构型两种手性构型；R选自氢原子、氘原子、卤素、C1
‑
C6烷基、取代C1
‑
C6烷基、氘代C1
‑
C6烷基、C3
‑
C8环烷基C1
‑
C6烷基、C1
‑
C6烷氧基C1
‑
C6烷基、C6
‑
C10芳基、取代C6
‑
C10芳基、5
‑
10元杂芳基、取代5
‑
10元杂芳基；优选R选自氢原子或C1
‑
C6烷基；R1选自氢原子、氘原子、卤素、C1
‑
C6烷基、取代C1
‑
C6烷基、氘代C1
‑
C6烷基、C3
‑
C8环烷基C1
‑
C6烷基、C1
‑
C6烷氧基C1
‑
C6烷基、羧基、3
‑
7元杂环基、取代3
‑
7元杂环基、C6
‑
C10芳基、取代C6
‑
C10芳基、5
‑
10元杂芳基、取代5
‑
10元杂芳基；优选R1选自氢原子或C1
‑
C6烷基；更优选R1选自C1
‑
C6烷基；R2选自氢原子、氘原子、卤素、C1
‑
C6烷基、取代C1
‑
C6烷基、氘代C1
‑
C6烷基、C3
‑
C8环烷基C1
‑
C6烷基、C1
‑
C6烷氧基C1
‑
C6烷基、羧基、3
‑
7元杂环基、取代3
‑
7元杂环基、C6
‑
C10芳基、取代C6
‑
C10芳基、5
‑
10元杂芳基、取代5
‑
10元杂芳基；优选R2选自氢原子、卤素或C1
‑
C6烷基；更优选R2选自卤素；X选自
‑
C(O)
‑
CR
a
R
b
‑
(CR3R4)
m
‑
O
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：朱义，卓识，万维李，张勇，于天姿，李刚锐，
申请(专利权)人：成都百利多特生物药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：