干血斑中25-羟基维生素D的干血斑提取仪串联LC-MS/MS检测方法技术

本发明专利技术属于医学生物检测技术领域，具体涉及干血斑中25

【技术实现步骤摘要】
干血斑中25
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羟基维生素D的干血斑提取仪串联LC
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MS/MS检测方法


[0001]本专利技术属于医学生物检测
，具体干血斑中25
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羟基维生素D的干血斑提取仪串联LC
‑
MS/MS检测方法。

技术介绍

[0002]维生素D是人体内一种重要的调节因子，除参与人体内钙磷代谢，其还与心血管疾病、高血压、免疫疾病、肿瘤及糖尿病等疾病密切相关。25
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羟基维生素D是衡量维生素D营养状态的最佳指标，是维生素D在人体内的主要存在形式，其性质稳定，能充分反应食物摄入与自身合成的维生素D总量。
[0003]当前已有多种商业化及实验室自行开发的方法用于25
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羟基维生素D的常规检测，包括蛋白结合法、放射免疫法、自动化学发光法、ELISA法及LC
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MS/MS法。其中，LC
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MS/MS法以其高灵敏度和高选择性的特点被广泛运用。
[0004]申请公布号为CN113640428A的文件公开了一种通过高本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.干血斑中25
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羟基维生素D的干血斑提取仪串联LC
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MS/MS检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、干血斑提取仪在线提取提取：干血斑自动进样器固定干血斑卡片，然后对干血斑添加经定量环吸取的含内标的萃取液，得到提取液；上样：提取液上样至活化的在线固相萃取柱进行富集和净化；步骤2、LC
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MS/MS洗脱及检测洗脱：采用二元泵将流动相液体对在线固相萃取柱进行洗脱，得到洗脱液；检测：洗脱液进样到LC
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MS/MS中对其进行定量检测。2.根据权利要求1所述的干血斑中25
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羟基维生素D的干血斑提取仪串联LC
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MS/MS检测方法，其特征在于，步骤1提取中所述含内标的萃取液先经加热模块预热至40～60℃，再添加至干血斑处。3.根据权利要求1所述的干血斑中25
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羟基维生素D的干血斑提取仪串联LC
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MS/MS检测方法，其特征在于，步骤1提取中采用高压分配器将甲酸溶液与所述含内标的萃取液一起添加至干血斑处进行提取，所述甲酸溶液的浓度为0.05～0.15％。4.根据权利要求1所述的干血斑中25
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羟基维生素D的干血斑提取仪串联LC
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MS/MS检测方法，其特征在于，步骤1提取的处理条件为：流速1.5～2.5ml/min，时间0.1～1.0min。5.根据权利要求1所述的干血斑中25
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羟基维生素D的干血斑提取仪串联LC
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MS/MS检测方法，其特征在于，步骤2中液相色谱条件如下：流动相A：含甲酸的水溶液，甲酸浓度0.01～0.5％；流动相B：含甲酸的甲醇溶液，甲酸浓度0.01～0.5％；色谱柱柱温：30～50℃；采用梯度洗脱，洗脱参数如下：时间(min)流动相A(％)流动相B(％)流速(ml/min)0.020800.45 1.020...

【专利技术属性】
技术研发人员：裴海燕，鄢茜，周衍霄，赵鹏，杨继伟，俞晓峰，
申请(专利权)人：杭州谱聚医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：