一种抑癌基因COTL1在制备肾透明细胞癌诊断和/或预后判断药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种抑癌基因COTL1在制备肾透明细胞癌诊断与预后判断药物中的应用。本发明专利技术公开了一个新的抑癌基因COTL1基因及其编码的蛋白质的应用，具体设计COTL1基因和/或编码的蛋白在制备抗肾透明细胞癌的药物；检测COTL1基因的mRNA或蛋白质水平的试剂盒和方法在肾透明细胞癌诊断和/或预后判断的药物中的应用。本发明专利技术发现COTL1基因是一种新的抑癌基因，特别是肾透明细胞癌发生发展过程中具有重要作用，为癌症的诊断、预后、治疗和药物筛选提供了新靶点和新方法。供了新靶点和新方法。供了新靶点和新方法。

【技术实现步骤摘要】
一种抑癌基因COTL1在制备肾透明细胞癌诊断和/或预后判断药物中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，尤其是指一种抑癌基因COTL1在制备肾透明细胞癌诊断与预后判断药物中的应用。

技术介绍

[0002]肾透明细胞癌是肾癌中最常见的恶性肿瘤，占原发性肾脏恶性肿瘤的75
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82％。在各种临床和基因组研究中，肾透明细胞癌被证明是一种高度免疫浸润的肿瘤，是最早的免疫治疗肿瘤之一。由于肾透明细胞癌对常规放疗和化疗不敏感，其治疗主要依赖于靶向治疗和免疫治疗。靶向治疗包括酪氨酸激酶抑制剂，如舒尼替尼和索拉非尼。然而，肿瘤异质性、动态变化和对治疗的适应细胞死亡相关信号通路的改变显著限制了靶向药物在肾透明细胞癌治疗中的应用。
[0003]COTL1是一种肌动蛋白结合蛋白，可结合α
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肌动蛋白、β
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肌动蛋白和f
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肌动蛋白。此外，当与5
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脂氧合酶(5
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LO)相互作用时，COTL1导致促炎白三烯生物合成时期5
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LO活性增加。COTL1在癌症中的作用是矛盾的，COTL1抑制乳腺癌生长，但在体外和体内促进胶质母细胞瘤生长。有趣的是，很明显COTL1在肺癌中同时具有肿瘤促进和抑制活性。因此，COTL1在肾透明细胞癌(KIRC)中的作用值得研究。

技术实现思路

[0004]为解决上述技术问题，本专利技术提供了一种抑癌基因COTL1在制备肾透明细胞癌诊断与预后判断药物中的应用。<br/>[0005]本专利技术的第一个目的在于提供一种抑癌基因COTL1及其突变体在制备肾透明细胞癌的诊断和/或预后判断的药物中的应用。
[0006]在本专利技术的一个实施例中，所述抑癌基因COTL1的序列如SEQ ID NO.1所示。
[0007]在本专利技术的一个实施例中，所述药物还包括药学上可以接受的药物载体。
[0008]在本专利技术的一个实施例中，所述药物载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、润滑剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体以及香味剂和甜味剂中的一种或多种。
[0009]在本专利技术的一个实施例中，所述赋形剂包括水，所述填充剂包括淀粉、蔗糖或乳糖中的至少一种；所述粘合剂包括纤维素衍生物、藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷酮中的至少一种；所述湿润剂包括甘油；所述崩解剂包括琼脂、碳酸钙或碳酸氢钠中的至少一种；所述吸收促进剂包括季铵化合物；所述表面活性剂包括十六烷醇；所述吸附载体包括高岭土或皂粘土中的至少一种；所述润滑剂包括滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁或聚乙二醇中的至少一种。
[0010]在本专利技术的一个实施例中，所述药物的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸或口服液。
[0011]本专利技术的第二个目的在于提供一种用于肾透明细胞癌诊断和/或预后判断的实时定量检测试剂盒，包括所述抑癌基因COTL1及其突变体。
[0012]在本专利技术的一个实施例中，所述实时定量检测试剂盒还包括至少一对特异性扩增COTL1基因的引物，引物序列：上游引物为ATATGACGGCTCCACCAT，下游引物为AATTCTGTACGACCTCCTTC。
[0013]本专利技术的第三个目的在于提供一种药物组合物，所述药物组合物包括所述抑癌基因COTL1。
[0014]本专利技术的第四个目的在于提供所述药物组合物在制备肾透明细胞癌的诊断和/或预后判断的药物中的应用。
[0015]本专利技术的第五个目的在于提供所述的抑癌基因COTL1的RNA干扰靶点序列如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示。干扰靶点：GTTTGTGATCAGTGATCGGAA(SEQ ID NO.2)和AGATTTCATCAAGAGCGAGCT(SEQ ID NO.3)。
[0016]本专利技术的第六个目的在于提供所述的RNA干扰靶点序列在制备治疗肾透明细胞癌药物中的应用。
[0017]在本专利技术的一个实施例中，所述药物还包括药学上可以接受的药物载体。
[0018]在本专利技术的一个实施例中，所述药物载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、润滑剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体以及香味剂和甜味剂中的一种或多种。
[0019]在本专利技术的一个实施例中，所述赋形剂包括水，所述填充剂包括淀粉、蔗糖或乳糖中的至少一种；所述粘合剂包括纤维素衍生物、藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷酮中的至少一种；所述湿润剂包括甘油；所述崩解剂包括琼脂、碳酸钙或碳酸氢钠中的至少一种；所述吸收促进剂包括季铵化合物；所述表面活性剂包括十六烷醇；所述吸附载体包括高岭土或皂粘土中的至少一种；所述润滑剂包括滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁或聚乙二醇中的至少一种。
[0020]在本专利技术的一个实施例中，所述药物的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸或口服液。
[0021]本专利技术通过免疫组化发现COTL1在肾透明细胞癌中相比于癌旁为低表达，进一步通过敲低COTL1的表达，探讨COTL1在肾透明细胞癌细胞中的增殖，克隆，迁移和周期的作用。首先通过PCR和蛋白印迹确认COTL1敲低成功，发现干扰COTL1表达可以抑制肾透明细胞癌细胞增殖、克隆、迁移等。同时还发现干扰COTL1表达，细胞周期S期增加。同时评估了COTL1表达与KIRC中肿瘤免疫浸润的关系。研究结果揭示了COTL1在KIRC中与免疫浸润淋巴细胞密切相关。
[0022]本专利技术的上述技术方案相比现有技术具有以下优点：
[0023]本专利技术首次证实COTL1是一个肾透明细胞癌诊断标记物，首次发现COTL1可作为肾透明细胞癌诊断和预后判断的分子标记及治疗药物的靶标。COTL1可以作为肾透明细胞癌的免疫治疗靶点。
附图说明
[0024]为了使本专利技术的内容更容易被清楚的理解，下面根据本专利技术的具体实施例并结合
附图，对本专利技术作进一步详细的说明，其中
[0025]图1是本专利技术COTL1在肾透明细胞癌组织中呈现低表达。
[0026]图2是本专利技术COTL1在肾透明细胞癌细胞中敲低COTL1 mRNA的表达。
[0027]图3是本专利技术COTL1肾透明细胞癌细胞中敲低COTL1蛋白的表达。
[0028]图4是本专利技术敲低COLT1表达促进肾透明细胞癌细胞中细胞增殖。
[0029]图5是本专利技术敲低COTL1表达促进肾透明细胞癌细胞克隆能力。
[0030]图6是本专利技术敲低COTL1表达促进肾透明细胞癌细胞迁移能力。
[0031]图7是本专利技术敲低COTL1表达使肾透明细胞癌周期阻滞在G1期。
[0032]图8是本专利技术COTL1与肾透明细胞癌免疫浸润相关性。
具体实施方式
[0033]下面结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好地理解本专利技术并能予以实施，但所举实施例不作为对本专利技术的限定。本专利技术所使用的试剂或试剂盒均属于市售产品，检测方法均为常规检测方法。
[0034]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抑癌基因COTL1及其突变体在制备肾透明细胞癌的诊断和/或预后判断的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抑癌基因COTL1的序列如SEQ ID NO.1所示。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物还包括药学上可以接受的药物载体。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸或口服液。5.一种用于肾透明细胞癌诊断和/或预后判断的实时定量检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1中所述抑癌基因COTL1及其突变体。6.根据权利要求5所述的实时定量检测试剂盒，其特征在于，所述实时定量检测试剂盒还包括至少一对特异性扩...

【专利技术属性】
技术研发人员：王北，陈丹丹，赵李淼，
申请(专利权)人：江南大学附属医院，
类型：发明
国别省市：