【技术实现步骤摘要】
亚胺还原酶及其制备方法和编码亚胺还原酶的DNA
[0001]本专利技术涉及生物
,特别涉及一种亚胺还原酶,同时本专利技术还涉及一种编码上述亚胺还原酶的DNA以及上述亚胺还原酶的制备方法。
技术介绍
[0002]亚胺还原酶(Imine reductases,EC 1.5.1.48)是一类可以还原手性亚胺为对应的手性胺的氧化还原酶,其辅酶依赖性为NADPH。在较大位阻环状亚胺的不对称还原、酮羰基化合物的不对称还原胺化和多酶级联反应制备手性胺方面,亚胺还原酶都被投入了深入的研究和应用。
[0003]虽然目前已经报道过一些亚胺还原酶的种类,但亚胺还原酶在制备手性胺的应用方面仍存在问题:高活性种类少、来源不丰富、应用范围待扩展等。针对现有研究中存在的问题,对酶进行定点突变得到更优的突变体日渐发展,这类工作的常规包括从IRED数据库中选择合适菌种来源的酶、选择位点进行突变,并对突变体进行酶学性质的验证。目前对于亚胺还原酶的定点突变及应用具有广阔的发展空间。
技术实现思路
[0004]有鉴于此,本专利技术提出 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种亚胺还原酶,其特征在于,所述亚胺还原酶的氨基酸序列为:SEQ IDNO.1。2.一种编码权利要求1所述的亚胺还原酶的DNA,其特征在于,所述DNA的核苷酸序列为:SEQ ID NO.2。3.一种权利要求1所述的亚胺还原酶的制备方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:活化菌株:将负载有SEQ ID NO.2基因的基因工程菌接种至LB培养基中,控制摇床温度35
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38℃,转速150
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200rpm,培养12
‑
16h,获得种子液;制备粗酶液:将所述种子液接种至TB培养基中,控制摇床温度35
‑
38℃,转速150
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200rpm,培养菌液2.5
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3.5h,当OD600值为0.6
‑
0.8时添加诱导剂,控制摇床温度18
‑<...
【专利技术属性】
技术研发人员:高静,刘茜琳,姜艳军,李春柳,王立晖,宋浩雷,李霆,贺莹,周丽亚,刘运亭,
申请(专利权)人:河北工业大学,
类型:发明
国别省市:
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