脂质基质局部注射制剂制造技术

本发明专利技术涉及一种脂质基质局部注射制剂，其包括长效局部递送脂质、结构性脂质、聚合物共轭脂质和可电离脂质，以及任选地中性磷脂。所述脂质基质局部注射制剂能够实现药物在注射位置的富集递送和蛋白的长时间高效表达。本发明专利技术还涉及所述脂质基质局部注射制剂的制备方法，以及所述脂质基质局部注射制剂在递送生物活性物质如核酸(例如mRNA、miRNA、siRNA、saRNA、ASO、DNA等)中的应用。DNA等)中的应用。

【技术实现步骤摘要】
脂质基质局部注射制剂


[0001]本专利技术涉及药物制剂领域，特别是涉及脂质基质局部注射制剂。本专利技术还涉及所述脂质基质局部注射制剂的制备方法，以及所述基质局部注射制剂在递送生物活性物质如核酸(例如mRNA、miRNA、siRNA、saRNA、ASO、DNA等)中的应用。

技术介绍

[0002]信使核糖核酸(mRNA)能够在体内编码具有特定生物功能的蛋白质，由此可以合理设计基于mRNA的疗法。近年来，随着COVID
‑
19mRNA疫苗的成功，mRNA药物发展迅速，得到了科研及工业界的广泛关注。mRNA药物进入临床最大的障碍在于药物递送，选择合适的药物递送系统是药物研发成功的关键。
[0003]目前，mRNA药物递送系统多选用脂质纳米粒(lipid nanoparticles，LNP)。包括已上市疫苗产品的递送系统，LNP通常由4类脂质成分组成：可离子化的阳离子脂质、磷脂、胆固醇，以及PEG脂质。研究显示，为高效递送mRNA药物，通过2
‑
(对
‑
甲苯氨基)
‑6‑
萘磺酸(TNS)染料结合试验测量的LNP的酸解离常数(pKa)应在6
‑
7的范围内。该pKa特征能够确保其在生理酸碱度下保持中性，提高了在循环系统中的稳定性，但可以在内涵体的酸性环境中被质子化，从而促进mRNA的内涵体逃逸。
[0004]已上市的两种COVID
‑
19mRNA疫苗均采用局部(肌肉)注射给药，显示了LNP采用此种给药方式的潜力。目前已知的已有近千种可导致肌肉功能障碍的的单基因疾病，对于此类疾病，肌肉注射是可考虑的优选给药方式。然而，研究发现，肌肉注射后LNP存在脱靶毒性，其分布并未限于注射的肌肉组织，而是在全身均有分布，很大一部分富集于肝脏。而且，相关蛋白质在肝脏中的表达较肌肉中更快速。
[0005]通过瘤内注射编码细胞因子的mRNA，改善整个肿瘤微环境，激活相关APC及T细胞，达到清除肿瘤细胞并产生免疫记忆的目的。相比系统性给药方式，瘤内注射可以使药物直接进入肿瘤，显著提高局部药物浓度并减少系统性毒性。但mRNA表达的细胞因子分泌后也会通过瘤内血管进入血液循环，使其同样面临系统性暴露导致的脱靶毒性，
[0006]另外，尽管mRNA被脂质包载后稳定性得到提升，本领域仍期待通过对LNP的优化更进一步提高药物的作用时间，以提升患者的顺应性，并使一些半衰期短或副作用大而难以实际应用的药物获得理想的临床效果。mRNA系统性的分布及其不可控的表达可能导致众多严重的副作用，因此将mRNA的LNP制剂靶向于特定的组织器官和细胞是近期研究的热点。

技术实现思路

[0007]本专利技术旨在解决上述问题，提供一种脂质基质局部注射制剂，能够实现药物在注射位置局部的富集递送和蛋白的长时间高效表达。
[0008]为了开发靶向肌肉的LNP制剂，专利技术人对处方进行了多种尝试和调整，发现将长效局部递送脂质(Long
‑
Acting SusTained delivering lipid,LASTing lipid)，如带有永久正电形式的阳离子脂质(DOTAP、EPC等)与可电离脂质相配合后，与mRNA序列通过静电作用
相结合形成的脂质纳米颗粒可以降低局部注射mRNA
‑
LNP药物的脱靶效应，显著提高药物在注射位组织中的药峰浓度和生物利用度，还可以延长药物在注射位组织中的达峰时间和半衰期。
[0009]为了达到上述目的，本专利技术提供了一种用于局部注射的脂质纳米颗粒，其包括长效局部递送脂质和可电离脂质，所述脂质纳米颗粒能够在注射部位发挥作用。
[0010]在优选的实施方案中，所述局部注射的部位为肌肉或肿瘤组织，优选为肌肉。
[0011]在优选的实施方案中，与不含长效局部递送脂质的脂质纳米颗粒相比，所述脂质纳米颗粒具有更长的作用时间。
[0012]在优选的实施方案中，所述脂质纳米颗粒能够降低在非注射部位的组织或器官的脱靶作用。
[0013]在优选的实施方案中，所述非注射部位的组织或器官为肝。
[0014]在优选的实施方案中，所述脂质纳米颗粒包括以下组分：长效局部递送脂质、结构性脂质、聚合物共轭脂质和可电离脂质，以及任选地中性磷脂。
[0015]在优选的实施方案中所述脂质纳米颗粒，其包括以下组分：永久性阳离子脂质、结构性脂质、聚合物共轭脂质和可电离脂质，并且不含中性磷脂。
[0016]在另一个方面，本专利技术提供了一种脂质纳米颗粒组合物，其包括上述任一的脂质纳米颗粒和荷载。
[0017]在另一个方面，本专利技术提供了上述脂质纳米颗粒组合物的制备方法，包括：将所述各种脂质组分混合，再与荷载混合。
[0018]在另一个方面，本专利技术提供了一种药物组合物，其包括上述任一的脂质纳米颗粒组合物，以及药物上可接受的辅料。
[0019]在另一个方面，本专利技术提供了上述任一的脂质纳米颗粒组合物，或上述药物组合物在制备用于治疗、诊断或预防疾病的药物中的用途。
[0020]在另一个方面，本专利技术提供了上述任一的脂质纳米颗粒组合物，或上述药物组合物在制备递送荷载的药物中的用途，所述荷载选自治疗剂、预防剂或诊断剂中的一种或多种。
[0021]在另一个方面，本专利技术提供了一种在受试者中治疗、诊断或预防疾病的方法，包括向所述受试者给药上述任一的脂质纳米颗粒组合物，或上述药物组合物。
[0022]在另一个方面，本专利技术提供了上述任一的脂质纳米颗粒组合物，或上述的药物组合物，其用于治疗、诊断或预防疾病。
[0023]在另一个方面，本专利技术提供了一种向受试者体内中递送荷载的方法，包括向所述受试者施用上述任一的脂质纳米颗粒组合物，或上述的药物组合物。
[0024]在另一个方面，本专利技术提供了上述任一的脂质纳米颗粒组合物，或上述的药物组合物，其用于递送荷载。
[0025]在具体实施方案中，所述荷载选自治疗剂、预防剂或诊断剂中的一种或多种；优选地，所述治疗剂、预防剂或诊断剂为核酸。
[0026]在更具体实施方案中，所述核酸选自ASO、RNA或DNA中的一种或多种。
[0027]在更具体实施方案中，所述RNA选自干扰RNA(RNAi)、小干扰RNA(siRNA)、短发夹RNA(shRNA)、反义RNA(aRNA)、信使RNA(mRNA)、修饰的信使RNA(mmRNA)、长非编码RNA
(lncRNA)、微RNA(miRNA)、小激活RNA(saRNA)、多聚编码核酸(MCNA)、聚合编码核酸(PCNA)、引导RNA(gRNA)、CRISPRRNA(crRNA)或核酶中的一种或多种，优选为mRNA，更优选为修饰的mRNA。
[0028]定义
[0029]化学定义
[0030]下面更详细地描述具体官能团和化学术语的定义。
[0031]当列出数值范围时，既定包括每个值和在所述范围内的子范围。例如“C1‑6烷本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于局部注射的脂质纳米颗粒，其包括长效局部递送脂质和可电离脂质，所述脂质纳米颗粒在注射部位发挥作用。2.权利要求1的脂质纳米颗粒，所述局部注射的部位为肌肉或肿瘤组织，优选为肌肉；优选地，与不含长效局部递送脂质的脂质纳米颗粒相比，所述脂质纳米颗粒具有更长的作用时间。3.权利要求1的脂质纳米颗粒，其能够降低在非注射部位的组织或器官的脱靶作用；优选地，所述非注射部位的组织或器官为肝。4.权利要求1
‑
3任一项的脂质纳米颗粒，包括以下组分：长效局部递送脂质、结构性脂质、聚合物共轭脂质和可电离脂质，以及任选地中性磷脂。5.权利要求1
‑
4任一项的脂质纳米颗粒，所述长效局部递送脂质为永久性阳离子脂质，优选为pKa>10的永久性阳离子脂质或含有季铵结构的永久性阳离子脂质。6.权利要求5的脂质纳米颗粒，其中所述永久性阳离子脂质选自式(I)化合物的药学上可接受的盐：其中，R
11
和R
12
独立地选自C6‑
30
烷基、C6‑
30
烯基或C6‑
30
炔基，其任选地被1、2、3、4或5个选自如下的取代基取代：
‑
OH、卤素、氰基、C1‑
30
烷基、C1‑
30
卤代烷基、
‑
O
‑
C1‑
30
烷基、
‑
S
‑
C1‑
30
烷基、氨基、
‑
NH
‑
C1‑
30
烷基和
‑
N(C1‑
30
烷基)2；R
13
、R
14
和R
15
独立地选自C1‑6烷基、C1‑6卤代烷基、C2‑6烯基或C2‑6炔基；或者他们中任两个以及他们连接的N原子一起形成4
‑
8元杂环；n1和n2独立地选自0或1；优选地，R
11
和R
12
独立地选自C
10
‑
25
烷基、C
10
‑
25
烯基或C
10
‑
25
炔基，其任选地被1、2、3、4或5个选自如下的取代基取代：
‑
OH、卤素、氰基、C1‑
25
烷基、C1‑
25
卤代烷基、
‑
O
‑
C1‑
25
烷基、
‑
S
‑
C1‑
25
烷基、氨基、
‑
NH
‑
C1‑
25
烷基和
‑
N(C1‑
25
烷基)2；R
13
、R
14
和R
15
独立地选自C1‑6烷基、C1‑6卤代烷基、C2‑6烯基或C2‑6炔基；或者他们中任两个以及他们连接的N原子一起形成5
‑
6元杂环；n1和n2独立地选自0或1；优选地，R
11
和R
12
独立地选自C
13
‑
20
烷基、C
13
‑
20
烯基或C
13
‑
20
炔基，优选选自C
13
‑
18
烷基、C
13
‑
18
烯基或C
13
‑
18
炔基，优选选自C
15
‑
18
烷基、C
15
‑
18
烯基或C
15
‑
18
炔基，例如C
17
‑
18
烷基、C
17
‑
18
烯基或C
17
‑
18
炔基，其任选地被1、2、3、4或5个选自如下的取代基取代：
‑
OH、卤素、氰基、C1‑
20
烷基、C1‑
20
卤代烷基、
‑
O
‑
C1‑
20
烷基、
‑
S
‑
C1‑
20
烷基、氨基、
‑
NH
‑
C1‑
20
烷基和
‑
N(C1‑
20
烷基)2；R
13
、R
14
和R
15
独立地选自C1‑6烷基、C1‑6卤代烷基、C2‑6烯基或C2‑6炔基，优选C1‑6烷基，例如Me；
n1和n2独立地选自0或1。7.权利要求5的脂质纳米颗粒，其中所述永久性阳离子脂质选自式(II)化合物的药学上可接受的盐：其中，R
21
和R
22
独立地选自C6‑
30
烷基、C6‑
30
烯基或C6‑
30
炔基，其任选地被1、2、3、4或5个选自如下的取代基取代：
‑
OH、卤素、氰基、C1‑
30
烷基、C1‑
30
卤代烷基、
‑
O
‑
C1‑
30
烷基、
‑
S
‑
C1‑
30
烷基、氨基、
‑
NH
‑
C1‑
30
烷基和
‑
N(C1‑
30
烷基)2；R
23
选自C1‑6烷基、C1‑6卤代烷基、C2‑6烯基或C2‑6炔基，其任选地被1、2或3个R
23s
取代；R
23s
独立地选自C1‑6烷基、C1‑6卤代烷基、
‑
OC(O)R
2a
或
‑
C(O)OR
2a
；R
2a
独立地选自H、C1‑6烷基或C1‑6卤代烷基；R
24
、R
25
和R
26
独立地选自C1‑6烷基、C1‑6卤代烷基、C2‑6烯基或C2‑6炔基；或者他们中任两个以及他们连接的N原子一起形成4
‑
8元杂环；优选地，R
21
和R
22
独立地选自C
10
‑
25
烷基、C
10
‑
25
烯基或C
10
‑
25
炔基，其任选地被1、2、3、4或5个选自如下的取代基取代：
‑
OH、卤素、氰基、C1‑
25
烷基、C1‑
25
卤代烷基、
‑
O
‑
C1‑
25
烷基、
‑
S
‑
C1‑
25
烷基、氨基、
‑
NH
‑
C1‑
25
烷基和
‑
N(C1‑
25
烷基)2；R
23
选自C1‑6烷基、C1‑6卤代烷基、C2‑6烯基或C2‑6炔基，其任选地被1、2或3个R
23s
取代；R
23s
独立地选自C1‑6烷基、C1‑6卤代烷基、
‑
OC(O)R
2a
或
‑
C(O)OR
2a
；R
2a
独立地选自H、C1‑6烷基或C1‑6卤代烷基；R
24
、R
25
和R
26
独立地选自C1‑6烷基、C1‑6卤代烷基、C2‑6烯基或C2‑6炔基；或者他们中任两个...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨柳，郎佳妍，张林，江天，王旭辉，雷佳霓，刘安东，赖才达，王文首，
申请(专利权)人：杭州剂泰医药科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：