一种核糖体蛋白S11及制备方法和在疫苗佐剂中的应用技术

本发明专利技术公开了一种核糖体蛋白S11及制备方法和在疫苗佐剂中的应用，提供了一种新的核糖体蛋白S11，是一种粪肠球菌产生的诱导先天免疫记忆活性物质核糖体蛋白；与灭活的白色念珠菌相比，其显示出较强的诱导天然免疫记忆作用；该核糖体蛋白具有良好的稳定性，低细胞毒性和溶血活性，为实际应用奠定理论基础，确定了核糖体蛋白作为疫苗佐剂的作用，为未来开发为新型佐剂、同时具备先天免疫记忆和适应性免疫的双记忆疫苗奠定坚实的基础。疫的双记忆疫苗奠定坚实的基础。疫的双记忆疫苗奠定坚实的基础。

【技术实现步骤摘要】
一种核糖体蛋白S11及制备方法和在疫苗佐剂中的应用


[0001]本专利技术公开一种诱导天然免疫记忆的核糖体蛋白及其制备方法，同时还提供其作为疫苗佐剂的用途，属于生物医药


技术介绍

[0002]疫苗是预防和控制疾病感染的有效措施。疫苗佐剂是指加入疫苗中能够非特异地增强疫苗抗原免疫原性的物质，可以促进、延长或增强疫苗抗原特异性免疫应答。在疫苗中使用佐剂能够提高弱免疫原性抗原的免疫效果；改善现有疫苗的免疫效果；减少抗原用量从而降低抗原产能压力或提高疫苗的产量；降低疫苗的价格。疫苗佐剂的生物学作用包括如下几个方面：使抗原缓慢释放、延长抗原在体内停留时间；扩大抗原的表面积，增强吞噬细胞的吞噬和抗原提呈；增强抗原的免疫原性，使无免疫原性或仅有微弱免疫原性的物质变成有效的免疫原；引起或增强迟发型超敏反应，促进局部的炎症反应；增强机体对抗原刺激的反应性，可以提高初次应答和再次应答所产生抗体的滴度；改变抗体类型，使由产生IgM转变为产生IgG。
[0003]近些年，随着DNA重组技术的快速发展，重组亚单位疫苗、合成肽疫苗和核酸疫苗等新型疫苗的研本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种核糖体蛋白S11，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码基因如SEQ ID NO.2所示。2.如权利要求1所述的一种核糖体蛋白S11的纯化制备方法，包括如下步骤：（1）发酵上清制备：将保存于
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80℃的粪肠球菌于TSB平皿划线，37℃恒温培养至出现单菌落，然后挑取单菌落至5 mL TSB液体培养基中，37℃、180 rpm振荡培养3 h，然后以1%（v/v）比例转接至10 L TSB液体培养基中，37℃、180 rpm振荡培养6 h，10000g、4℃下离心10 min，0.22μm滤器过滤得发酵上清；（2）粗蛋白捕获：将发酵上清以80%饱和度硫酸铵溶液在4℃沉淀16 h，然后12000g、4℃下离心20 min，收集沉淀，使用蒸馏水复溶，然后用1000 Da的透析袋透析除去硫酸铵，直至硫酸铵被完全去除，采用1%氯化钡检测硫酸铵是否除干净，最后通过真空冷冻干燥获得粗蛋白，保存于
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80℃；（3）纯化：将粗蛋白应用离子交换层析和制备型HPLC进行纯化；将粗蛋白通过Q
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Tanrose 6FF阴离子交换层析柱，采用阶梯固定梯度洗脱方式，以0 M NaCl
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1.0 M NaCl固定时间程序进行洗脱，每个梯度洗脱3个柱体积，流速为1mL/min，以280nm为检测波长，收集各洗脱峰，利用小鼠腹腔巨噬细胞天然免疫记忆模型，确定诱导天然免疫记忆的目标活性峰；将目标峰利用Ultimate XB
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C18液相色谱柱...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨勇军，张建刚，彭自然，陈巍，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：