多重幽门螺杆菌单碱基突变体的电化学分阶段检测方法技术

本发明专利技术属于生物检测技术领域，涉及多重幽门螺杆菌单碱基突变体的电化学分阶段检测方法。方法中采用的电化学传感器包括传感电极、辅助DNA、sgRNA和Cas9核酸酶；传感电极由导电基体、金纳米颗粒、探针DNA和纳米CdS，探针DNA的两端分别连接金纳米颗粒和纳米CdS，导电基体与金纳米颗粒连接；探针DNA、所述辅助DNA与目标DNA能相互杂交形成Y型结构；所述sgRNA和所述Cas9核酸酶能够形成Cas9/sgRNA复合物，Cas9/sgRNA复合物能够破坏Y型结构，使纳米CdS从Y型结构上分离。本发明专利技术通过对核酸总量和单碱基突变体的检测，实现对幽门螺杆菌感染状况和耐药状况的全面评估。和耐药状况的全面评估。和耐药状况的全面评估。

【技术实现步骤摘要】
多重幽门螺杆菌单碱基突变体的电化学分阶段检测方法


[0001]本专利技术属于生物检测
，涉及多重幽门螺杆菌单碱基突变体的电化学分阶段检测方法。

技术介绍

[0002]公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
[0003]幽门螺杆菌(H.pylori)是一种革兰氏阴性杆菌，其感染与许多消化系统疾病密切相关。当前，H.pylori感染防治面临着感染率上升和单核苷酸突变体(SNV)引起的耐药率上涨的难题。在H.pylori临床诊断中常用的检测技术包括胃镜检查、13C/14C尿素呼吸法、血清法、粪便检查和尿检。目前，针对SNV的检测技术主要有：用于SNV检测的熔融曲线分析、使用增强杂交探针的SNV检测和蛋白质辅助的SNV检测。但至今尚无一种方法能在同时分析核酸总量与检测单一基因型。因此，进一步研究一种高通量、高选择性检测幽门螺杆菌DNA和单碱基突变体的新方法显得尤为重要。

技术实现思路

[0004]为了解决现有本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种电化学传感器，其特征是，包括传感电极、辅助DNA、sgRNA和Cas9核酸酶；所述传感电极由导电基体、金纳米颗粒、探针DNA和纳米CdS，所述探针DNA为发夹结构，且所述探针DNA的两端分别连接金纳米颗粒和纳米CdS，导电基体与金纳米颗粒连接；所述探针DNA、所述辅助DNA与目标DNA能相互杂交形成Y型结构；所述sgRNA和所述Cas9核酸酶能够形成Cas9/sgRNA复合物，所述Cas9/sgRNA复合物能够破坏Y型结构，使纳米CdS从Y型结构上分离。2.如权利要求1所述的电化学传感器，其特征是，探针DNA一端修饰有巯基，金纳米颗粒通过Au
‑
S键连接探针DNA。3.如权利要求1所述的电化学传感器，其特征是，探针DNA一端修饰有胺基，纳米CdS通过酰胺键连接探针DNA。4.如权利要求1所述的电化学传感器，其特征是，所述导电基体为玻碳电极或导电玻璃。5.如权利要求1所述的电化学传感器，其特征是，探针DNA如SEQ ID NO.2所示；或，辅助DNA如SEQ ID NO.3所示；或，目标DNA如SEQ ID NO.1、4和/或5所示；或，sgRNA如SEQ ID NO.11、12和/或13所...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡善文，杨欢，黄冠泽，邓媛，叶为民，
申请(专利权)人：福建医科大学，
类型：发明
国别省市：