低氧激活型BRD4蛋白降解剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种低氧激活型BRD4蛋白降解剂及其制备方法和应用，该降解剂是一类前药型分子，由BRD4蛋白降解剂与可被肿瘤低氧微环境激活的结构通过碳氮键连接而成，具有式Ⅰ结构，其中，n＝0、1、2、3或4；R1、R2为氢、羟基、氯、溴、氟、C1～C6烷基、C1～C6含烯基的烷基或C1～C6含炔基的烷基。本发明专利技术的前药分子在体内外非靶部位稳定，能够靶向并富集于肿瘤低氧区域，并被肿瘤低氧组织中高度表达的酶类激活，特异性还原释放出原药，从而进入泛素化途径，降解BRD4蛋白，进而杀伤癌细胞。该前药策略不仅能够提高原药分子的靶向性，降低毒副作用，并且能够进入肿瘤低氧区域，增强疗效。增强疗效。增强疗效。增强疗效。

【技术实现步骤摘要】
低氧激活型BRD4蛋白降解剂及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及一种化合物及其制备方法和应用，尤其涉及一种低氧激活型BRD4蛋白降解剂及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，与其他类型的乳腺癌相比，具有恶性程度高、预后较差的特点，其复发率高且易发生远处转移，尤其是向肝、肺和脑转移，目前三阴性乳腺癌已成为临床癌症治疗的一大难题。TNBC是一种侵袭性癌症，靶向治疗有限。肿瘤部位的缺氧是TNBC的一个关键标志，缺氧能够促进肿瘤细胞从免疫监视和免疫治疗中逃逸，从而导致更高的死亡率，并且TNBC的缺氧情况比其他乳腺癌亚型更明显。因此靶向缺氧区域进行治疗，能够提高最终疗效。
[0003]含溴结构域蛋白4(BRD4)是溴结构域和末端外结构域(BET)蛋白家族的成员，在过去几年中已成为包括乳腺癌在内的许多肿瘤的有前途的分子靶标。据报道，TNBC细胞对BET抑制剂表现出优先敏感性。目前已报道多种BRD蛋白降解剂比如dBET1,ARV
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825,BETd
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246等，均能有效降解BRD蛋白。其中BETd
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246能够有效抑制13种三阴性乳腺癌细胞的生长，并且其衍生物BETd
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260能够抑制三阴性乳腺癌细胞MDA
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MB
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231及MDA
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MB
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468荷瘤鼠的肿瘤的生长。但是尽管蛋白降解剂表现出优良的药物特性，但同时具有潜在的缺点，其在针对肿瘤用药时，有可能降解正常组织细胞内的蛋白，造成脱靶毒性。因此在PROTAC(proteolysis targeting chimera)分子，即蛋白降解剂上添加一个可控的开关就显得尤为重要，这类前药设计策略可以调节及增强药物的靶向性，使其能够在癌细胞特殊的环境中激活并释放protac分子，在减少脱靶产生的毒副作用的同时，提高疗效。

技术实现思路

[0004]专利技术目的：本专利技术旨在提供一种针对三阴性乳腺癌治疗的低氧激活型BRD4蛋白降解剂；本专利技术的另一目的在于提供一种所述BRD4蛋白降解剂的制备方法；本专利技术的另一目的在于提供一种所述BRD4蛋白降解剂在制备治疗三阴性乳腺癌疾病的药物的应用。
[0005]技术方案：本专利技术所述的针对三阴性乳腺癌治疗的低氧激活型BRD4蛋白降解剂，其结构式如式Ⅰ所示：
[0006][0007]本专利技术的前药在低氧条件下，经硝基还原酶还原形成苯胺类前药，释放出原药。
[0008][0009]本专利技术所述低氧激活型BRD4蛋白降解剂利用低氧激活型母核(以对硝基苯类母核为例)，能够被肿瘤内低氧区域高表达的硝基还原酶还原，从而转化为苯胺类分子，然后进行自发的1，6
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消除以释放BRD4蛋白降解剂，杀伤肿瘤细胞。
[0010]其中，X选自饱和或不饱和的杂环基、芳基和杂芳基；
[0011]其中，n＝0、1、2、3或4；
[0012]其中，R1、R2为氢、羟基、氯、溴、氟、C1～C6烷基、C1～C6含烯基的烷基或C1～C6含炔基的烷基。
[0013]优选地，所述X选自苯基。
[0014]优选地，所述n＝2。
[0015]优选地，所述R1、R2为氢。
[0016]优选地，所述的低氧激活型BRD4蛋白降解剂结构式如下所示：
[0017][0018]当X选自苯基时，所述的低氧激活型BRD4蛋白降解剂制备步骤如下所示：
[0019][0020]所述的低氧激活型蛋白降解剂，包括以下实验步骤：
[0021]进一步地，制备DNP的实验步骤如下：
[0022](1)在氮气保护条件下，将2
‑
(2,6
‑
二氧代哌啶
‑3‑
基)
‑4‑
羟基异吲哚啉
‑
1,3
‑
二酮、碳酸钾、碘化钾溶解在N,N
‑
二甲基甲酰胺溶液，搅拌，再将溴乙酸叔丁酯溶于N,N
‑
二甲基甲酰胺中，滴加至反应体系。室温条件下反应，得到中间体化合物1；
[0023](2)在室温下，将中间体化合物1溶解在二氯甲烷和三氟乙酸的混合溶液中，搅拌至反应结束后，将反应液中的二氯甲烷和大部分三氟乙酸旋蒸除去，再用油泵除去剩余的三氟乙酸，得到中间体化合物2；
[0024](3)在室温下，将JQ
‑
1溶解在二氯甲烷和三氟乙酸混合溶液中，搅拌至反应结束后，将反应液中的二氯甲烷和大部分三氟乙酸旋蒸除去，再用油泵除去剩余的三氟乙酸，得到中间体化合物3；
[0025](4)在氮气保护下，将化合物4与化合物5溶于无水二氯甲烷中，然后加入乙酸回流搅拌一小时，后加入三乙酰氧基硼氢化钠，反应结束后得到中间体化合物6；
[0026](5)在室温，氮气保护下将化合物6溶于无水二氯甲烷中，加入2
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(7
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偶氮苯并三氮唑)
‑
N,N,N',N'
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四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、N,N
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二异丙基乙胺(DIPEA)并搅拌后加入化合物3的无水二氯甲烷溶液，过夜反应得到中间体化合物7；
[0027](6)在室温下，将中间体化合物7溶解在二氯甲烷和三氟乙酸的混合溶液中，搅拌至反应结束后，将反应液中的二氯甲烷和大部分三氟乙酸旋蒸除去，再用油泵除去剩余的三氟乙酸，得到中间体化合物8；
[0028](7)在室温，氮气保护下将化合物2溶于无水N,N
‑
二甲基甲酰胺中，加入HATU、DIPEA后，搅拌后加入化合物8的无水N,N
‑
二甲基甲酰胺溶液，过夜反应得到产物DNP。
[0029]所述的针对三阴性乳腺癌治疗的低氧激活型BRD4蛋白降解剂在常氧和低氧条件下对三阴性乳腺癌细胞的杀伤力。
[0030]有益效果：与现有技术相比，本专利技术具有如下显著优点：该低氧激活型BRD4蛋白降解剂在体内外稳定，能够在肿瘤组织的低氧区域富集，并被肿瘤低氧组织中高度表达的酶类激活，特异性还原释放出BRD4蛋白降解剂(dBET1)，从而进入泛素化途径，杀伤三阴性乳腺癌细胞，能够提高抗肿瘤药物的靶向性，降低毒副作用，增强疗效。
附图说明
[0031]图1为DNP化合物在常氧条件下对MDA
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MB
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231细胞存活率影响的数据谱图；
[0032]图2为DJP化合物在常氧条件下对MDA
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MB
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231细胞存活率影响的数据谱图；
[0033]图3为DSP化合物在常氧条件下对MDA
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MB
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231细胞存活率影响的数据谱图；
[0034]图4为DNP化合物在低氧条件下对MDA
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231细胞存活本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种低氧激活型BRD4蛋白降解剂，其特征在于，其结构式如式Ⅰ所示：其中，X选自芳基、杂芳基或饱和或不饱和的杂环基；其中，n＝0、1、2、3或4；其中，R1、R2为氢、羟基、氯、溴、氟、C1～C6烷基、C1～C6含烯基的烷基或C1～C6含炔基的烷基。2.如权利要求1所属的低氧激活型BRD4蛋白降解剂，其特征在于，所述X选自苯基。3.如权利要求1所述的低氧激活型BRD4蛋白降解剂，其特征在于，所述n＝1或2。4.如权利要求2所述的低氧激活型BRD4蛋白降解剂，其特征在于，所述R1、R2为氢或甲基，其结构式如下所示：
5.一种权利要求2所述的低氧激活型BRD4蛋白降解剂的制备方法，其特征在于，合成路线如下：
6.如权利要求5所述低氧激活型BRD4蛋白降解剂的制备方法，其特征在于，当结构式中n＝2，R1、R2为氢时，该化合物的合成步骤如下：
(1)在氮气保护条件下，将2
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(2,6
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二氧代哌啶
‑3‑
基)
‑4‑
羟基异吲哚啉
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1,3
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二酮、碳酸钾、碘化钾溶解在N,N
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二甲基甲酰胺溶液，搅拌，再将溴乙酸叔丁酯溶于N,N
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二甲基甲酰胺中，滴加至反应体系，室温条件下反应，得到中间体化合物1；(2)在室温下，将中间体化合物1溶解在含有二氯甲烷的三氟乙...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨静，张海丽，邓大伟，毛传雨，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：