报告磁珠及其制备方法和应用、检测试剂盒以及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种报告磁珠、报告磁珠的制备方法、上述报告磁珠在核酸检测领域的应用、包括该报告磁珠的检测试剂盒以及一种采用上述报告磁珠的检测方法。报告磁珠基于CRISPR技术，包括依次连接的磁珠、单链核酸和酶，所述磁珠和所述单链核酸之间通过

【技术实现步骤摘要】
报告磁珠及其制备方法和应用、检测试剂盒以及检测方法


[0001]本专利技术涉及生物检测
，尤其是涉及一种报告磁珠及其制备方法和应用、检测试剂盒以及检测方法。

技术介绍

[0002]CRISPR技术，即CRISPR核酸检测技术，其可以用于植物、动物、微生物、病毒等来源的DNA或RNA分子的检测。CRISPR/Cas体系对核酸具有高选择性和特异性，可以检测到仅一个碱基的突变。
[0003]CRISPR/Cas系统由可轻松编程的引导RNA(crRNA)和Cas蛋白组成，可以根据crRNA与目标序列特异性互补来顺式切割靶标DNA或RNA。除了特异性结合和顺式切割靶标分子外，一些Cas蛋白(包括Cas12和Cas13等)的反式切割活性也被发现。即在Cas
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crRNA复合物与靶标结合后激活反式切割活性，对附近非靶标的单链DNA或RNA进行无差异的切割。这种机制可以被用于裂解外源性引入的、自猝灭的荧光DNA或RNA报告体，并且具有极高周转率，从而实现信号放大。该现象被发现之后，基于CRISPR/Cas的新型诊断技术被广泛开发本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种报告磁珠，基于CRISPR技术，其特征在于，包括依次连接的磁珠、单链核酸和酶，所述磁珠和所述单链核酸之间通过
‑
COO
‑
NH
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连接。2.根据权利要求1所述的报告磁珠，其特征在于，所述磁珠上连接有
‑
COOH，所述单链核酸的3
’
端连接有
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(CH2)
n
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NH2，所述磁珠和所述单链核酸通过
‑
COO
‑
NH
‑
(CH2)
n
连接，其中，n为6～20的自然数。3.根据权利要求2所述的报告磁珠，其特征在于，所述单链核酸的5
’
端连接有
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三甘醇
‑
生物素，所述酶上连接有链霉亲和素，所述报告磁珠的结构为：磁珠
‑
COO
‑
NH
‑
(CH2)
n
‑
单链核酸
‑
三甘醇
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生物素
‑
链霉亲和素
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酶。4.根据权利要求3所述的报告磁珠，其特征在于，所述磁珠为二氧化硅磁珠或聚苯乙烯磁珠，所述磁珠的粒径为100nm～100μm。5.根据权利要求1～4中任意一项所述的报告磁珠，其特征在于，所述单链核酸的序列如SEQ ID NO.1所示或如SEQ ID NO.2所示。6.一种如权利要求3所述的报告磁珠的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：提供磁珠、单链核酸和酶，所述磁珠的表面连接有
‑
COOH，所述单链核酸的3
’
端连接有
‑
(CH2)
n
‑
NH2，所述单链核酸的5
’
端连接有
‑
三甘醇
‑
生物素，所述酶上连接有链霉亲和素，其中，n为6～20的自然数；将所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑峰，张健，徐勇，李俊，曾淮扬，
申请(专利权)人：深圳市第二人民医院深圳市转化医学研究院无锡吐露港生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：