一种改构鸡蛋清溶菌酶及其应用制造技术

本发明专利技术涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种改构鸡蛋清溶菌酶及其应用。本发明专利技术针对鸡蛋清溶菌酶进行改造，替换其中98～112位序列为如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。改构后的蛋白已不具胞壁水解酶活性，但却比改构前的鸡蛋清溶菌酶具有更强的抑菌活性，尤其是针对棉花黄萎病菌。本发明专利技术还提供了相应的制备转基因植物的方法，将改构鸡蛋清溶菌酶的编码序列转导至棉花中进行表达，可以显著提高棉花对于黄萎病菌的抗性，而且与传统的、依赖于组织培养的方法相比，棉花活体茎尖遗传转化棉花方法转化方法操作简便、经济、不受棉花基因型限制，可快速获得T0代转基因种子。速获得T0代转基因种子。速获得T0代转基因种子。

【技术实现步骤摘要】
heraclei)和(Alternaria dauci)。
[0008]尽管此前已经有将鸡蛋清溶菌酶应用于植物抗病基因工程研究的报道，但应该指出的是，表达野生型鸡蛋清溶菌酶的转基因植物抗病性一般都不高，不能满足商业化生产的需求。在本专利技术之前，还没有人对鸡蛋清溶菌酶蛋白分子进行过类似改构，也没有人尝试将改构的鸡蛋清溶菌酶基因导入棉花以培育抗病性更高的转基因植物。

技术实现思路

[0009]为了解决现有技术存在的问题，本专利技术提供改构鸡蛋清溶菌酶及其应用。
[0010]第一方面，本专利技术提供一种改构鸡蛋清溶菌酶，所述改构鸡蛋清溶菌酶为将鸡蛋清溶菌酶的C端第98～112位氨基酸序列替换为如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列得到。
[0011]T4溶菌酶是由T4噬菌体在感染大肠杆菌时所产生的一种具有较高胞壁水解活性的溶菌酶，是由164个氨基酸残基所组成的，分子量为18,700Da。尽管分子内不含二硫键，但在pH 6.0～6.53和37℃的环境条件下，T4溶菌酶可以稳定存在20个小时，该酶作用的最适pH值是7.4～7.7。它在动物胃中(酸性环境本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种改构鸡蛋清溶菌酶，其特征在于，所述改构鸡蛋清溶菌酶为将鸡蛋清溶菌酶的C端第98～112位氨基酸序列替换为如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列得到。2.根据权利要求1所述的改构鸡蛋清溶菌酶，其特征在于，所述改构鸡蛋清溶菌酶包括如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。3.一种核酸，其特征在于，所述核酸用于编码如权利要求1或2所述的改构鸡蛋清溶菌酶。4.根据权利要求3所述的核酸，其特征在于，所述核酸包括如SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列。5.一种生物材料，其特征在于，所述生物材料包括如权利要求3或4所述的核酸；所述生物材料为表达盒、载体、工程菌或转基因细胞。6.权利要求1或2所述的改构鸡蛋清溶菌酶，或权利要求3或4所述的核酸，或权利要求5所述的生物材料在抑制微生物中的应用，所述微生物优选为链球菌、大肠杆菌、黄萎病菌或...

【专利技术属性】
技术研发人员：王楠，郭文芳，刘德虎，李刚强，王梦琪，
申请(专利权)人：中国农业科学院生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：