一种抑制肿瘤侵袭转移的多肽组合及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种抑制肿瘤侵袭转移的多肽组合，属于转移性乳腺癌的治疗技术领域。该多肽组合包括2条多肽，2条多肽分别含有靶向肽P1和靶向肽P2，同时在靶向肽P1和靶向肽P2的N端分别连接有穿膜肽。组蛋白

【技术实现步骤摘要】
一种抑制肿瘤侵袭转移的多肽组合及其应用
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请是申请号CN202111122070.0，申请日为2021年09月24日，专利技术名称为“一种抑制肿瘤侵袭转移的多肽组合及其应用”的分案申请，该专利申请的内容在此以全文引用的方式并入本文。


[0003]本专利技术属于转移性乳腺癌的治疗
，特别是抑制肿瘤侵袭转移的多肽组合。

技术介绍

[0004]肿瘤转移与肿瘤的致死率密切相关。肿瘤在生长发育过程中，上皮细胞逐渐丧失其极性及细胞间粘附能力，进而获得高侵袭转移的能力。在肿瘤转移过程中，细胞脱离其原发灶，侵入淋巴管及血管中，逃避机体的免疫监视，并且在异位种植。现阶段，国内外对于转移性肿瘤的治疗办法有限。
[0005]SMAD3这个蛋白质分子是TGF
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β/SMADs信号通路的关键分子。多项研究表明，在多种肿瘤转移过程中，TGF
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β/SMADs信号通路被异常激活。在TGF
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β/SMADs信号通路激活过程中，SMAD3的c
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端可发生磷酸化，磷酸化的SMAD3可以转录调控下游一系列基因的表达。激活的TGF
‑
β/SMADs信号通路诱导肿瘤细胞失去其原有的上皮细胞极性，促进肿瘤细胞的异位定植。最近研究表明，在SMADs家族中，SMAD3可以促进肿瘤的侵袭转移，而SMAD2却可抑制肿瘤的侵袭转移。因此开发靶向针对SMAD3的特异性药物可能成为治疗转移性肿瘤的新方法。蛋白质转录后的甲基化修饰在可以调控本底蛋白质的稳定性，活性以及蛋白质与蛋白质之间的结合。而SMAD3的甲基化修饰尚未见有人报道。
[0006]随着现在制药技术的发展，使用功能性蛋白质多肽治疗肿瘤得到了极大地发展。如何提高转移性肿瘤病人的生存时间，至今是肿瘤治疗过程中的难题。而针对在肿瘤侵袭转移密切相关的TGF
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β/SMADs信号通路的治疗性多肽的研发未见报道。

技术实现思路

[0007]针对以上现有技术的不足，本专利技术提供了一种可以抑制TGF
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β/SMADs信号通路的多肽组合，为临床治疗肿瘤转移性病人提供新的治疗药物可能。具体通过以下技术实现。
[0008]一种抑制肿瘤侵袭转移的多肽组合，其特征在于，包括一个多肽单元，所述多肽单元为第一多肽单元，所述第一多肽单元包含穿膜肽、靶向肽P2，所述靶向肽P2的氨基酸序列如SEQ ID NO.02所示。
[0009]进一步地，所述多肽组合还包括第二多肽单元，所述第二多肽单元包括靶向肽P1；所述靶向肽P1的氨基酸序列如SEQ ID NO.01所示。
[0010]进一步地，本专利技术提供了一种抑制肿瘤侵袭转移的多肽组合，包含两条多肽，第一条多肽包含穿膜肽Ⅰ、靶向肽P1，第二条多肽包含穿膜肽Ⅱ、靶向肽P2；所述靶向肽P1的氨基
酸序列如SEQ ID NO.01所示，所述靶向肽P2的氨基酸序列如SEQ ID NO.02所示。
[0011]本专利申请人基于肿瘤细胞的侵袭转移的过程，在研究SMAD3蛋白质分子在肿瘤细胞TGF
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β/SMADs信号通路的激活过程时，偶然发现对SMAD3蛋白质分子进行甲基化处理，能够有效降低SMAD3蛋白质分子的C端磷酸化激活，进而影响肿瘤细胞上皮间质转化的标志性蛋白表达，最终影响肿瘤细胞的侵袭转移能力。
[0012]在此基础上，本专利申请人首先通过分子生物学实验找到了影响SMAD3的C端磷酸化激活的甲基化位点，发现SMAD3蛋白质分子的第53位及第333位的赖氨酸的甲基化，可以实现上述功能。然后，通过质谱分析获取SMAD3的第53位及第333位的组蛋白
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赖氨酸N
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甲基转移酶EZH2，并通过小鼠实验验证了EZH2可以体外甲基化SMAD3的第53位及第333位的赖氨酸。本专利技术则提供的上述多肽组合，EZH2能够与该多肽组合的靶向肽上的赖氨酸结合并完成甲基化，从而避免了EZH2对SMAD3蛋白质分子的第53位及第333位的赖氨酸的甲基化，进而降低了SMAD3蛋白质分子的激活和肿瘤细胞的侵袭转移能力。
[0013]本专利技术提供的多肽组合包含2条多肽，两条多肽均含有穿膜肽和靶向肽，两个靶向肽的氨基酸序列分别与SMAD3蛋白质分子的第53位的赖氨酸及第333位的赖氨酸附近的氨基酸序列对应，穿膜肽连接在靶向肽的N端。穿膜肽能携带靶向肽分子进入细胞。
[0014]优选地，所述穿膜肽Ⅰ和穿膜肽Ⅱ的氨基酸序列均如SEQ ID NO.03所示。多肽组合的两条多肽中，穿膜肽的氨基酸序列可以相同，也可以不同，只要能实现穿膜肽的功能即可。
[0015]更优选地，两条多肽的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.04、SEQ ID NO.05所示。
[0016]更优选地，组蛋白
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赖氨酸N
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甲基转移酶EZH2对所述靶向肽P1、靶向肽P2上的赖氨酸进行甲基化，抑制TGF
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β/SMADs信号通路。
[0017]上述的抑制肿瘤侵袭转移的多肽组合在制备抑制肿瘤侵袭转移的药物的应用。
[0018]优选地，上述多肽组合制备的抑制肿瘤侵袭转移的药物，所述肿瘤为肺癌、结肠癌、宫颈癌、乳腺癌等癌症的肿瘤细胞。只要是基于SMAD3蛋白的氨基酸序列的第53位的赖氨酸及第333位的赖氨酸甲基化，实现其磷酸化激活，并导致肿瘤细胞获得侵袭转移能力的肿瘤或癌症类型，都可以使用上述多肽组合或将多肽组合制备成药物进行治疗，减少肿瘤的侵袭转移。
[0019]更优选地，上述药物为含有抑制肿瘤侵袭转移的多肽组合的静脉注射剂。这种多肽组合主要制备成静脉注射剂注射后发挥作用。
[0020]与现有技术相比，本专利技术的有益之处在于：本专利技术提供了一种位于SMAD3蛋白上并通过甲基化，能够影响其磷酸化激活，影响其肿瘤细胞中上皮间质转化的标志性蛋白表达的氨基酸位点，即SMAD3蛋白的第53位及第333位的赖氨酸的甲基化。针对这一新发现，提供了一种用于抑制肿瘤细胞侵袭转移的多肽组合。
附图说明
[0021]图1为实施例1的SMAD3的第53及333位赖氨酸甲基化的生物学功能验证的结果；
[0022]图2为SMAD3 knock out细胞系验证结果；
[0023]图3为SMAD3第53及333位赖氨酸点成功突变的验证结果；
[0024]图4为实施例2的分别注射SMAD3野生型乳腺癌肿瘤细胞和SMAD3第53及333位赖氨
酸突变的乳腺癌肿瘤细胞后，HE染色后的小鼠肺组织照片；
[0025]图5为图2的HE染色后的小鼠肺组织的肺转移结节的数目和重量；
[0026]图6为实施例3的EZH2甲基化SMAD3的第53位赖氨酸的结果；
[0027]图7为实施例3的EZH2甲基化SMAD3的第333位赖氨酸的结果；
[0028]图8为实施本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抑制肿瘤侵袭转移的多肽组合，其特征在于，包括一个多肽单元，所述多肽单元为第一多肽单元，所述第一多肽单元包含穿膜肽、靶向肽P2，所述靶向肽P2的氨基酸序列如SEQ ID NO.02所示。2.根据权利要求1所述的抑制肿瘤侵袭转移的多肽组合，其特征在于，所述多肽组合还包括第二多肽单元，所述第二多肽单元包括靶向肽P1；所述靶向肽P1的氨基酸序列如SEQ ID NO.01所示。3.根据权利要求1所述的抑制肿瘤侵袭转移的多肽组合，其特征在于，所述穿膜肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.03所示。4.根据权利要求1所述的抑制肿瘤侵袭转移的多肽组合，其特征在于，所述第一条多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.05所示。5.根据权利要求1～4中任一项所述的抑...

【专利技术属性】
技术研发人员：王桂华，胡俊波，黄昌胜，
申请(专利权)人：武汉百英诺生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：