一种Subplenodomus属真菌、抗菌化合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种Subplenodomus属真菌、抗菌化合物及其制备方法和应用。本发明专利技术以药用植物内生真菌为研究对象发现了一株Subplenodomus属真菌，并在其发酵产物中发现了结构新颖的强效抗菌化合物，特别是对耐药菌株也具有强抑菌活性，具有非常好的应用前景和研发价值，为后续抗菌药物研发提供了基础。为后续抗菌药物研发提供了基础。为后续抗菌药物研发提供了基础。

【技术实现步骤摘要】
一种Subplenodomus属真菌、抗菌化合物及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及化学医药
，具体涉及一种Subplenodomus属真菌、抗菌化合物及其制备方法和应用

技术介绍

[0002]细菌感染是危害人类健康的主要因素之一。细菌感染性疾病，指由细菌感染引起的疾病。临床上常见的致病菌中，革兰氏阴性菌较多，如，埃希氏菌属、肠杆菌属和假单胞菌属细菌，也有革兰氏阳性菌，如，葡萄球菌属和肠球菌属细菌。
[0003]目前，常用细菌感染性疾病的药物大多为抗生素和广谱抗菌药物，如，亚胺培南、万古霉素、替考拉宁等，副作用大，且大量使用会产生耐药性，导致超级细菌的出现，例如，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、耐甲氧西林表面葡萄球菌(MRSE)、抗万古霉素肠球菌(VRE)等，其已成为医院感染的重要病原菌。细菌耐药性使得全球公共卫生面临的挑战更为严峻。
[0004]为了缓解抗生素耐药菌造成的公共健康危机，开发新的抗菌药物的需求尤为迫切。
[0005]Subplenodomus属隶属于子囊菌门，座囊菌纲，格孢腔菌目，小球腔菌科，主要分离自龙胆科植物。目前尚无关于该属菌株次级代谢产物的报道。

技术实现思路

[0006]有鉴于此，本专利技术提供了一种Subplenodomus属真菌、抗菌化合物及其制备方法和应用。
[0007]在本专利技术第一方面，提供一种Subplenodomus属真菌。
[0008]具体地，所述Subplenodomus属真菌菌株的ITS基因序列如SEQ ID NO：1所示。
[0009]具体地，所述Subplenodomus属真菌的性状包括：菌落在PDA培养基上生长边缘平整，中间隆起，气生菌丝白色，较发达；菌丝体浅黄色至灰色，表面无光泽，干燥；反面边缘白色，中间褐色至棕色。
[0010]在本专利技术的一个实施方式中，所述Subplenodomus属真菌为来自于麻花艽(Gentiana straminea Maxim.)的内生菌；具体地，所述麻花艽为来自沼地、湿草地、河边、山坡或林缘的麻花艽；所述麻花艽为来自西藏、云南、贵州、山西、陕西、甘肃、内蒙、东北等地的麻花艽。
[0011]优选地，所述Subplenodomus属真菌菌株的ITS基因序列与菌株Subplenodomus drobnjacensis PRG11
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03在ITS序列相似性为100％；与Comoclathris incompta isolate CH
‑
12在tublin序列相似性为89％；与Subplenodomus drobnjacensis PRG11
‑
03在LSU序列相似性为100％。根据该菌株形态特征和ITS基因序列，确定菌株为Subplenodomus sp.
[0012]最为优选地，所述Subplenodomus属真菌为CPCC 401465，其已于2022年4月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.40181。
[0013]在本专利技术第二方面，提供一种组合物，其包含第一方面所述的Subplenodomus属真菌和/或其代谢产物。
[0014]具体地，该代谢产物可以为上述Subplenodomus属真菌的培养物、菌悬液、裂解物等。
[0015]在本专利技术的一些实施例中，该培养物为上述Subplenodomus属真菌的发酵产物，例如发酵液、发酵液的澄清液体(例如上清液、滤液等，其中已不包含发酵液中的固体物质(例如菌体)、发酵液的浓缩物、发酵液的提取物等。优选地，所述Subplenodomus属真菌的发酵产物由下述的发酵方法获得。
[0016]在本专利技术第三方面，提供第一方面所述的Subplenodomus属真菌的发酵方法。
[0017]具体地，所述发酵方法包括所述Subplenodomus属真菌在培养基中进行发酵的步骤。
[0018]具体地，所述培养基为真菌发酵培养基，其可为固体培养基、半固体培养基或液体培养基；更具体地，所述培养基可为稻米培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基或其他本领域专业人员熟知的真菌发酵培养基等。
[0019]优选地，所述稻米培养基包括稻米和水，更优选地，所述稻米培养基还包括无机盐、氮源中的一种或者多种。
[0020]具体地，所述稻米培养基可由稻米和水制成，也可由稻米、水和无机盐制成，也可由稻米、水和氮源制成，也可由稻米、水、氮源和无机盐制成。
[0021]其中，所述稻米可为大米或糙米。大米或糙米均为稻谷的制品。稻谷是指没有去除水稻谷壳的果实，稻谷由谷壳、果皮、种皮、外胚乳、糊粉层、胚乳和胚构成。糙米是指稻谷脱去谷壳，保留稻谷其它各部分的制品；大米是指仅保留胚乳，而将稻谷其余部分全部脱去的制品。
[0022]优选地，所述马铃薯葡萄糖琼脂培养基包括马铃薯、葡萄糖和琼脂；更优选地，所述马铃薯葡萄糖琼脂培养基还包括水、无机盐、氮源中的一种或者多种；
[0023]具体地，所述马铃薯葡萄糖琼脂培养基可由马铃薯、葡萄糖、琼脂和水制成，也可由马铃薯、葡萄糖、琼脂、水和无机盐制成，也可由马铃薯、碳源、琼脂、水和氮源制成，也可由马铃薯、碳源、琼脂、氮源和无机盐制成。
[0024]具体地，所述其他本领域专业人员熟知的真菌发酵培养基可由某一种或几种速效、迟效碳源、某一种或几种速效、迟效氮源、水和/或无机盐等制成。
[0025]在本专利技术的一些实施例中，该培养基为稻米培养基，特别是大米培养基。
[0026]具体地，大米培养基中大米与水的质量比可以为1:0.8
‑
1.2(例如1:0.8、1:0.9、1:1、1:1.1、1:1.2)，特别是1:1。
[0027]具体地，发酵的接种量可以为1
‑
10％(例如1％、2％、4％、5％、6％、7％、8％、10％)，特别是5
‑
8％。
[0028]具体地，发酵的温度可以为20
‑
35℃(例如20、22、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35℃)，特别是28
‑
30℃。
[0029]具体地，发酵的时间可以为1
‑
40天(例如1、5、10、15、20、25、30、35、40天)，特别是25
‑
35天。
[0030]具体地，发酵为静置培养发酵。
[0031]具体地，上述方法还可以包括(在发酵前)菌种扩大培养的步骤，例如将经过斜面培养基活化的菌种在种子培养基中进行扩大培养。
[0032]具体地，扩大培养的温度可以为20
‑
35℃(例如20、22、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35℃)，特别是28℃。
[0033]具体地，扩大培养的时间可以为1
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5天，特别是1
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种Subplenodomus属真菌，其特征在于，所述Subplenodomus属真菌的ITS基因序列如SEQ ID NO：1所示。2.如权利要求1所述的真菌，其特征在于，所述真菌的保藏号为CGMCC No.40181。3.一种权利要求1
‑
2任一项所述真菌的发酵方法，其特征在于，所述发酵方法包括所述Subplenodomus属真菌在培养基中进行发酵的步骤，优选地，所述培养基为真菌发酵培养基，更优选地，所述培养基为稻米培养基或马铃薯葡萄糖琼脂培养基；优选地，所述发酵的温度为20
‑
35℃，更优选为28
‑
30℃；优选地，所述发酵的时间为1
‑
40天，更优选为25
‑
35天。4.一种组合物，其特征在于，所述组合物包含权利要求1
‑
2任一项所述的真菌和/或其代谢产物。5.如权利要求4所述的组合物，其特征在于，所述代谢产物包括Subplenodomus属真菌的培养物、菌悬液或裂解物；优选地，所述培养物为Subplenodomus属真菌发酵产物，例如发酵液、发酵液的澄清液体、发酵液的浓缩物、发酵液的提取物，更优选地，所述发酵产物由权利要求3所述的发酵方法获得。6.一种化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、前药或溶剂化物，所述化合物具有如下结构：其中，代表单键或双键；X和Y独立地选自：R1和R2独立地选自：H、
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OH、
‑
O
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(C1‑3烷基)、
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OCO
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(C1‑3烷基)；R5和R6独立地选自：H、
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OH、
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O
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(C1‑3烷基)、
‑
OCO
‑
(C1‑3烷基)。7.如权利要求6所述的化合物，其特征在于，所述化合物具有如下结构：
8.如权利要求6所述的化合物，其特征在于，所述化合物选自如下结构：9.如权利要求6所述的化合物，其特征在于，所述化合物的立体异构体选自如下结构：
10.权利要求8或9所述化合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包含将权利要求1
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2任一项所述真菌进行发酵，对发酵产物进行提取分离获得所述化合物。11.如权利要求10所述的制备方法，其特征在于，所述提取分离包括：(1)将发酵产物用有机溶剂Ⅰ提取，得到粗提物；(2)将步骤(1)所得粗提物分散，用有机溶剂Ⅱ提取，得...

【专利技术属性】
技术研发人员：余利岩，何文妮，蔡国伟，张涛，柏菁璘，张冉，王菊仙，游雪甫，胡辛欣，苏静，郭哲，陈秀菲，
申请(专利权)人：中国医学科学院医药生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：