一株黑曲霉菌株及其在腐烂病防治中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一株黑曲霉菌株及其在腐烂病防治中的应用。本发明专利技术从梨树枝干中分离了一种内生真菌，黑曲霉(Aspergillus niger)，其菌株号为La2。其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.40252。其18SrDNA的核苷酸序列含有序列表中序列1所示的DNA分子。实验证明，黑曲霉La2对梨树腐烂病菌和苹果树腐烂病菌菌斑均有一定的抑制效果；使用黑曲霉La2的无菌滤液或孢子悬浮液处理过的梨树枝干可以显著抑制梨树腐烂病菌的生长和梨树枝条腐烂病的发病程度，其作为生防真菌资源，具有很好的应用前景，可对植物腐烂病害进行安全、有效和环保的生物防治。治。

【技术实现步骤摘要】
一株黑曲霉菌株及其在腐烂病防治中的应用


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一株黑曲霉菌株及其在腐烂病防治中的应用。

技术介绍

[0002]腐烂病是果树上的常见病害，对梨、苹果等果树造成严重危害，影响果树正常结果，导致产量下降，并且该病具有分布广、危害重、防治难等特点，发病严重时导致树体死亡，造成的经济损失十分严重，被林果种植区视为林木的“癌症”。林果木腐烂病的频繁、大面积发生已经成为林果业发展和生态环境保护的重要限制性因素，对果农的经济收入也造成了严重的威胁。目前对果树腐烂病的防治以化学防治为主,但长期使用化学药剂会造成环境污染、果品农药残留等问题，违背农业可持续的基本原则，因此寻求更有效的替代方法迫在眉睫。
[0003]生物防治具有高效、安全、低毒等特点，是替代化学防治来减轻梨树腐烂病危害的重要策略之一，目前已成为国内外学者研究的焦点。利用植物内生菌及其代谢产物防治病害是生物防治的重要举措之一。目前，已有内生真菌用于作物病害防治的报道，如哈茨木霉防治玉米锈病、小斑病和大斑病等病害。

技术实现思路

[0004]本专利技术所要解决的技术问题是如何防治腐烂病或如何对植物腐烂病进行生物防治。
[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术首先提供了一种黑曲霉。所述黑曲霉为黑曲霉(Aspergillus niger)，其菌株号为La2，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.40252。
[0006]所述黑曲霉的18S rDNA的核苷酸序列含有序列表中序列1所示的DNA分子；所述黑曲霉的微管蛋白的编码序列含有序列表中序列2所示的DNA分子。
[0007]上述黑曲霉的培养物也属于本专利技术的保护范围。所述培养物可为将上文所述的黑曲霉在微生物培养基中培养得到的物质(即发酵产物，如含有黑曲霉菌株La2和分泌到液体培养基内的物质即发酵液，或如含有黑曲霉菌株La2和分泌到固体培养基内的物质即固体发酵物)。
[0008]上述培养物中，所述微生物培养基可为固体培养基或液体培养基。
[0009]术语“培养物”是指经人工接种和培养后，长有微生物群体的液体或固体产物(培养容器内的所有物质即发酵产物)的统称。即通过将微生物进行生长和/或扩增而获得的产物，其可以是微生物的生物学纯培养物，也可以含有一定量的培养基、代谢物和/或培养过程中产生的其他成分。术语“培养物”还包括通过将微生物传代而获得的传代培养物，其可以是某一代的培养物，也可以是若干代的混合物。
[0010]为了解决上述技术问题，本专利技术还提供了一种菌剂。所述菌剂的活性成分是上述
述黑曲霉和/或上述黑曲霉的代谢物和/或上述黑曲霉的培养物。
[0011]上文中，所述黑曲霉菌株La2的代谢物可为黑曲霉菌株La2的发酵液或孢子悬浮液或无菌滤液。
[0012]黑曲霉菌株La2的发酵液可按照如下方法制备：在液体发酵培养基中培养黑曲霉菌株La2，收集发酵液(含有黑曲霉菌株La2和分泌到液体培养基内的物质)，该发酵液即为黑曲霉菌株La2的代谢物。
[0013]黑曲霉菌株La2的孢子悬浮液可按照如下方法制备：在固体发酵培养基中培养黑曲霉菌株La2，用无菌水将固体发酵培养基中黑曲霉菌株La2的孢子洗脱后收集(含有黑曲霉菌株La2孢子和分泌到固体培养基上的物质)，即获得黑曲霉菌株La2的孢子悬浮液。
[0014]黑曲霉菌株La2的无菌滤液可按照如下方法制备：将黑曲霉菌株La2的发酵液使用微孔滤膜过滤，即得到黑曲霉菌株La2的无菌滤液。
[0015]上述菌剂中，所述菌剂还可包括载体。所述载体可为固体载体或液体载体。
[0016]上述菌剂中，所述菌剂的剂型可为多种剂型，包括但不限于液剂、乳剂、悬浮剂、粉剂、颗粒剂、可湿性粉剂或水分散粒剂等。
[0017]上文所述菌剂可具有下述至少一种特性：
[0018]A1)抑制植物腐烂病菌；
[0019]A2)抑制植物腐烂病；
[0020]A3)防治植物腐烂病。
[0021]为了解决上述技术问题，本专利技术还提供了上文所述的黑曲霉的下述任一种应用：
[0022]A)上文所述的黑曲霉在制备植物腐烂病菌抑制剂中的应用；
[0023]B)上文所述的黑曲霉在抑制植物腐烂病菌中的应用；
[0024]C)上文所述的黑曲霉在制备植物腐烂病抑制剂中的应用；
[0025]D)上文所述的黑曲霉在抑制植物腐烂病中的应用；
[0026]E)上文所述的黑曲霉在防治植物腐烂病中的应用。
[0027]为了解决上述技术问题，本专利技术还提供了上文所述的培养物的下述任一种应用：
[0028]A)上文所述的培养物在制备植物腐烂病菌抑制剂中的应用；
[0029]B)上文所述的培养物在抑制植物腐烂病菌中的应用；
[0030]C)上文所述的培养物在制备植物腐烂病抑制剂中的应用；
[0031]D)上文所述的培养物在抑制植物腐烂病中的应用；
[0032]E)上文所述的培养物在防治植物腐烂病中的应用。
[0033]为了解决上述技术问题，本专利技术还提供了上文所述菌剂的下述任一种应用：
[0034]A)上文所述菌剂在制备植物腐烂病菌抑制剂中的应用；
[0035]B)上文所述菌剂在抑制植物腐烂病菌中的应用；
[0036]C)上文所述菌剂在制备植物腐烂病抑制剂中的应用；
[0037]D)上文所述菌剂在抑制植物腐烂病中的应用；
[0038]E)上文所述菌剂在防治植物腐烂病中的应用。
[0039]上文所述植物腐烂病菌可为苹果腐烂病菌或梨腐烂病菌。上文所述植物腐烂病可为苹果腐烂病或梨腐烂病。
[0040]为了解决上述技术问题，本专利技术还提供了培养上文所述的黑曲霉的方法。所述方
法可包括将上文所述的黑曲霉在微生物培养基中培养的步骤。
[0041]本专利技术目的是针对现有腐烂病化学防治中存在的问题，提供一株从梨树枝条中分离获得的内生真菌Aspergillus niger，利用其拮抗作用，对梨树腐烂病和苹果树腐烂病害进行安全、有效和环保的生物防治方法。
[0042]本专利技术从梨树枝干中分离内生真菌，其中一个菌株经形态学和分子生物学鉴定为黑曲霉菌Aspergillus niger，命名为La2。随后，本专利技术采用平板对峙试验，发现该黑曲霉菌株对梨树腐烂病菌和苹果树腐烂病菌生长均具有很好抑制效果，抑制率均达到80％以上。同样，黑曲霉菌株过滤液也可以显著抑制梨树腐烂病菌和苹果树腐烂病菌生长。进一步利用黑曲霉菌孢子悬浮液处理梨树枝条，腐烂病的发病程度显著降低。这些结果表明，La2作为生防真菌资源，在防治腐烂病中具有很好的应用前景。
[0043]保藏说明
[0044]菌种名称：黑曲霉
[0045]拉丁名：Aspergillus niger
[0046]菌株编号：La2
[0047]保藏机构：中国微本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.黑曲霉，其特征在于：所述黑曲霉为黑曲霉(Aspergillus niger)，其菌株号为La2，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.40252。2.根据权利要求1所述的黑曲霉，其特征在于：所述黑曲霉的18S rDNA的核苷酸序列含有序列表中序列1所示的DNA分子；所述黑曲霉的微管蛋白的编码序列含有序列表中序列2所示的DNA分子。3.权利要求1或2所述的黑曲霉的培养物，是将权利要求1或2中所述的黑曲霉在微生物培养基中培养得到的物质。4.一种菌剂，其特征在于：所述菌剂的活性成分是权利要求1或2中所述黑曲霉和/或权利要求1或2中所述黑曲霉的代谢物和/或权利要求3所述黑曲霉的培养物。5.根据权利要求4所述的菌剂，其特征在于：所述菌剂具有下述至少一种特性：A1)抑制植物腐烂病菌；A2)抑制植物腐烂病；A3)防治植物腐烂病。6.权利要求1或2中所述的黑曲霉的下述任一种应用：A)权利要求1或2中所述的黑曲霉在制备植物腐烂病菌抑制剂中的应用；B)权利要求1或2中所述的黑曲霉在抑制植物腐烂病菌中的应用；C)权利要求1或2中所述的黑曲霉在制备植物腐烂病抑制剂中的应用；D)权利要求1或2中所述的黑曲霉在抑制植物腐烂病...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁洪波，涂洪涛，侯珲，王丽，石冰柯，
申请(专利权)人：中国农业科学院郑州果树研究所，
类型：发明
国别省市：