一种灵芝母种提纯复壮方法技术

本申请涉及微生物培养选育技术领域，具体公开了一种灵芝母种提纯复壮方法，包括包括提纯、菌种制备、培养，S1提纯：试管用酒精消毒和紫外灯消毒后，装入试管体积的25％

【技术实现步骤摘要】
一种灵芝母种提纯复壮方法


[0001]本专利技术涉及微生物培养选育
，特别涉及一种灵芝母种提纯复壮方法。

技术介绍

[0002]灵芝为多孔菌科真菌赤芝或紫芝的干燥子实体。具有补气安神，止咳平喘的功效。主治心神不宁，失眠，惊悸，咳喘痰多，虚劳证等。灵芝多糖具有免疫调节、降血糖、降血脂、抗氧化、抗衰老及抗肿瘤作用；三萜类化合物能净化血液，保护肝功能；灵芝多种制剂分别具有镇静、抗惊厥、强心、抗心律失常、降压、镇咳平喘作用；此外，灵芝还有抗凝血、抑制血小板聚集及抗过敏作用。
[0003]目前随着灵芝的药用价值的研究，市场对灵芝的需求日益增加，野生灵芝已经无法满足需求，需进行人工培养；目前我国的大部分灵芝的生产基地的第一代母种都从外引进，但经过多代培养后，灵芝生长不断弱势，抗逆性差，最终导致种植户减产甚至绝产。主要原因是在于现有复壮方法中所用的培养基大多数只含有葡萄糖、土豆、蛋白胨等，导致培养基的营养物质不充足，无法满足菌丝生长需求，得到的菌丝长势不佳、洁白度和紧密度低。

技术实现思路

[0004]针对现有技术不足，本专利技术解决的技术问题是提供一种灵芝母种提纯复壮方法，解决现有灵芝复壮后得到菌丝长势不佳、洁白度和紧密度低的问题。
[0005]为了解决上述问题，本专利技术所采用的技术方案是:一种灵芝母种提纯复壮方法，包括提纯、菌种制备、培养，S1提纯：试管用酒精消毒和紫外灯消毒后，装入试管体积的25％
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60％的培养基，取三代及三代以内的健壮的母种菌丝放入培养基中后塞入试管塞，放入的恒温箱中进行培养6
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8天，得灵芝母种；S2菌种的制备：灵芝母种继续培养10
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14天，得灵芝菌种；S3一次培养：取小米粉，加水拌湿使得小米粉的含水量为50
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60％的小米粉培养基，将灵芝菌种置于小米粉培养基中，于23
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28℃下培养10
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13天后，得一次培养灵芝菌种；S4二次培养：将一次培养灵芝菌种转入装有培养基的试管中，塞入试管塞，于25
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28℃恒温培养，待菌丝生长满试管时停止培养，即得。
[0006]本方案产生的有益效果是：本方案提供的灵芝母种的提纯复壮方法，充分考虑到灵芝菌种复壮对培养基内营养物质的需求，并设计了一次培养和二次培养，灵芝菌丝在提纯步骤的培养基中将菌种培养至菌丝；然后将菌丝置于灵芝菌种复壮步骤的培养基中培养得到复壮灵芝菌种；通过本方案培养得到的灵芝菌丝生长状态好，得到的菌丝洁白度、紧密度和长势好。
[0007]进一步，所述培养基按质量份计算，主要由葡萄糖18
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23份、酵母膏4
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5份、土豆190
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210份、蛋白胨1
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3份、海藻粉18
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23份、大蒜粉0.2
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0.4份、琼脂18
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23份、细胞分裂素0.3
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0.4份、苦参5
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10份制成。
[0008]进一步，所述S1提纯中试管消毒采用消毒设备完成；消毒设备包括消毒箱、可拆卸连接在消毒箱侧壁的储液盒和设置在消毒箱外壁的电加热装置，设置在消毒箱内且与消毒
箱底部偏心转动连接的转盘，消毒箱底部设有用于驱动转盘偏心转动的电机，消毒箱的内侧壁设有喷洒装置；喷洒装置包括L型的气道、进液道和设置在消毒箱内顶部的喷头，进液道一端与喷头的进水口连通，进液道另一端贯穿消毒箱侧壁并连接有进液管，进液管一端位于储液盒底部；气道一端与进液道连通且另一端与转盘水平；气道与进液道连通的一端设有排气单向阀，气道内设有可沿气道滑动的充气机构，充气机构一端延伸出气道与转盘侧壁贴触，充气机构可在转盘的推动下在气道内往复移动为气道充气；所述进液道的下方的消毒箱侧壁内沿竖直方向设有滑槽，滑槽内滑动连接有滑块，滑块与滑槽底部之间连接有伸缩片，所述伸缩片受热时伸直且在冷却时弯曲。
[0009]通过转盘转动使得转盘上的试管能被紫光灯均匀照射，其次转盘转动驱动充气机构运动，不断对气道充气进而形成负压，在负压吸附作用下将喷洒装置内的消毒液吸入进液管，从而通过喷头喷洒至试管表面，对试管表面进行消毒；其次在达到消毒要求后，启动电热丝对试管进行烘干，伸缩片受热伸直封堵进液道，从而消毒液无法通过喷头喷洒至试管；转盘转动使得试管烘干均匀，其次转盘对充气机构充气，使得气体经过气道、喷头后吹向试管表面，进一步加速试管烘干。
[0010]进一步，所述充气机构包括滑动连接在气道内的活塞和与活塞连接的推杆，活塞上设有进气单向阀，推杆一端连接有推块，推块与转盘贴触；气道靠近转盘的端部设有限位块，限位块与活塞之间连接有拉簧。
[0011]采用简单的活塞结构配合偏心转动的转盘，实现充气机构的来回滑动，从而实现对气道的反复充气，本方案的结构简单易于实现。
[0012]进一步，所述伸缩件采用1
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10个双金属片依次首尾相连接而成，相邻两个双金属片的弯折方向相反。通过将多个双金属片首尾相连，从令双金属片在冷却状态下为波浪状，在受热后由伸展的趋势从而趋向伸直进而将推块推出将进液道堵塞。
[0013]进一步，所述转盘表面设有试管槽，试管槽内套接有弹性橡胶。通过设置弹性橡胶可保护试管不受损伤，并可利用弹性橡胶的弹力将试管紧握住，避免试管在转盘转动时被甩出。
附图说明
[0014]图1为本方案实施例1示意图。
[0015]图2为图1中A部分的放大图。
[0016]图3为图1中B部分的放大图。
具体实施方式
[0017]下面通过具体实施方式进一步详细说明：
[0018]说明书附图中的附图标记包括：消毒箱1、转盘11、电机12、储液盒2、进液管21、气道3、进液道31、进液单向阀311、喷头32、排气单向阀33、活塞34、推杆341、限位块342、拉簧343、推块345、滑块35、伸缩件351、紫外灯4、电热丝5、控制器51。
[0019]实施例1本如附图1所示：一种灵芝母种提纯复壮方法，包括提纯、菌种制备、培养，
[0020]S1提纯：试管用酒精消毒和紫外灯消毒后，装入试管体积的40％的培养基，取三代及三代以内的健壮的母种菌丝放入培养基中，且使培养基覆盖母种菌丝2cm，然后塞入试管
塞，放入温度为26℃恒温箱中培养7天，得灵芝母种；
[0021]S2菌种的制备：灵芝母种在25
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27℃的恒温箱中继续培养10天，得灵芝菌种；
[0022]S3一次培养：取小米粉，加水拌湿使得小米粉的含水量为55％的小米粉培养基，将灵芝菌种置于小米粉培养基中，于25℃下培养10天后，得一次培养灵芝菌种；
[0023]S4二次培养：将一次培养灵芝菌种转入装有培养基的试管中，塞入试管塞，于27℃恒温培养，待菌丝生长满试管时停止培养，即得。
[0024]S4的培养基原料按质量份计算，葡萄糖2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种灵芝母种提纯复壮方法，包括提纯、菌种制备、培养，其特征在于：S1提纯：试管用酒精消毒和紫外灯消毒后，装入试管体积的25％
‑
60％的培养基，取三代及三代以内的健壮的母种菌丝放入培养基中后塞入试管塞，放入的恒温箱中进行培养6
‑
8天，得灵芝母种；S2菌种的制备：灵芝母种继续培养10
‑
14天，得灵芝菌种；S3一次培养：取小米粉，加水拌湿使得小米粉的含水量为50
‑
60％的小米粉培养基，将灵芝菌种置于小米粉培养基中，于23
‑
28℃下培养10
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13天后，得一次培养灵芝菌种；S4二次培养：将一次培养灵芝菌种转入装有培养基的试管中，塞入试管塞，于25
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28℃恒温培养，待菌丝生长满试管时停止培养，即得。2.根据权利要求1所述的一种灵芝母种提纯复壮方法，其特征在于：所述S4的培养基按质量份计算，主要由葡萄糖18
‑
23份、酵母膏4
‑
5份、土豆190
‑
210份、蛋白胨1
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3份、海藻粉18
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23份、大蒜粉0.2
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0.4份、琼脂18
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23份、细胞分裂素0.3
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0.4份、苦参5
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10份制成。3.根据权利要求1所述的一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：兰永权，胡德军，
申请(专利权)人：贵州黔芝灵药业有限公司，
类型：发明
国别省市：