一种基于荧光RPA技术检测肠炎沙门氏菌的试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种基于荧光RPA技术检测肠炎沙门氏菌的试剂盒及其应用。本申请所解决技术问题是如何提供一种适用于检测肠炎沙门氏菌的RPA引物和体系。可在芽孢杆菌属、伯克霍尔德菌属、布氏菌属、弗朗西斯菌属、沙门氏菌属、埃希氏菌属、弧菌属和葡萄球菌属干扰下准确鉴定出肠炎沙门氏菌。基因组最低检测限为1.21fg/μL，灵敏度能达到15fg/反应；而阳性质粒的最低检测限可达到0.4拷贝/μL，灵敏度为5.2拷贝/反应。5.2拷贝/反应。5.2拷贝/反应。

【技术实现步骤摘要】
一种基于荧光RPA技术检测肠炎沙门氏菌的试剂盒及其应用


[0001]本专利技术属于微生物检测领域，具体涉及一种基于荧光RPA技术检测肠炎沙门氏菌的试剂盒及其应用。

技术介绍

[0002]肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)属泛嗜性沙门氏菌，能引起各种动物的胃肠炎和败血症，是一种常见的人兽共患致病菌。肠炎沙门氏菌主要是经食物传播，少数经水传播，感染动物后能在其肝脏、脾脏、肠道内大量定植，并向环境中排菌，引起人类的食物中毒。在我国，由沙门氏菌引起的食物中毒案例中约有70～80％是由肠炎沙门氏菌引起的，临床上多表现为败血症、肠热症、腹泻、恶心呕吐等症状。自上世纪80年代爆发于美国以来，肠炎沙门氏菌得到全世界广泛关注。在1981年的英国，肠炎沙门氏菌感染病例仅占沙门氏菌属感染病例的10％，而在1997年爆发之际，这个数字上升到了70％。近年来，有关肠炎沙门氏菌感染的报道越来越多，在肿脓性关节炎、肿胸、关节腔积液、脑膜炎等病症部位中都有检测到肠炎沙门氏菌的报道。因此，加强肠炎沙门氏菌的检测能力对于有效控制其对人类的感染十分重要。<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于检测肠炎沙门氏菌的特异序列，其特征在于：所述特异序列核苷酸序列为SEQ IDNo.1的DNA。2.用于检测肠炎沙门氏菌的组合物，其特征在于：所述组合物包括名称分别为lygD
‑
F3和lygD
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R2的引物对和名称为lygD
‑
P2的探针，所述lygD
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F3是核苷酸序列为SEQ ID No.4的单链DNA分子，所述lygD
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R2是核苷酸序列为SEQ ID No.7的单链DNA分子；所述lygD
‑
P2的结构为SEQ ID No.12
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四氢呋喃残基
‑
SEQ ID No.13，SEQ ID No.12的第31位核苷酸T标记荧光基团，SEQ ID No.13的第2位核苷酸T标记淬灭基团，3
’
端进行阻断修饰。3.根据权利要求2所述的引物组合物，其特征在于：所述荧光基团选自FAM、VIC、HEX、TRT、CY3、CY5、ROX、JOE、FITC、TET、NED、TAMRA、LC RED640、LC RED705、Quasar705或Texas Red中的至少一种，所述淬灭基团选自TAMRA、BHQ1、BHQ2、BHQ3、MGB、Dabcy1中的至少一种，所述SEQ ID No.13的3
’
端连接C3
‑
spacer。4.鉴定或辅助鉴定肠炎沙门氏菌的产品，其特征在于，所述产品包括下述任一种：D1)含有权利要求2或3所述组合物的体外核酸扩增试剂；D2)含有权利要求2或3所述组合物及探针或D1)所述体外核酸扩增试剂的试剂盒；D3)含有权利要求2或3所述引物组合物及探针、D...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁兵，袁媛，徐健皓，王晓东，王景林，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：