一种涂抹微生物的检测方法及其应用技术

本发明专利技术提供一种涂抹微生物的检测方法及其应用，其特征在于，所述方法包括以下步骤：前处理、涂抹、检测。本发明专利技术检测样品中微生物含量的方法，利用消毒过的棉签和扩大涂抹面积排除了涂抹材料自身因素对涂抹结果的影响，扩大了取样面积有利于增加涂抹的可信度。通过所述涂抹方法检测样品中微生物含量，能够有效检测到生产设备及器皿涂抹样品中的菌落总数、霉菌和酵母菌的含量，显著提高了样品中微生物的检出率，提高了检测结果的准确性降低了质量安全风险。险。

【技术实现步骤摘要】
一种涂抹微生物的检测方法及其应用


[0001]本专利技术涉及食品生产微生物领域，具体地，本专利技术涉及一种涂抹微生物的检测方法及其应用。

技术介绍

[0002]按照最新食品安全国家标准《食品微生物学检验》的规定，对菌落总数、大肠菌群、酵母、霉菌等项目的测定的规定方法并未对生产设备及器皿的涂抹方法做出明确规定，涂抹的材料、方法、方式都会对检测结果产生影响。

技术实现思路

[0003]本专利技术旨在一定程度上解决上述相关技术问题。为此，本专利技术提出了一种能够有效检测到生产设备及器皿清洗效果涂抹样品中的微生物含量，能够提高样品中菌落总数、大肠菌群、霉菌酵母菌的检出率。
[0004]本专利技术提供一种涂抹微生物的检测方法，所述方法包括以下步骤：
[0005]步骤一，前处理：对需检测设备消毒，对取样工具进行消毒；
[0006]步骤二，涂抹：用已消毒的棉签，涂抹被涂抹物的表面，将棉签放入灭菌生理盐水中；
[0007]步骤三，检测：在27℃
‑
29℃下培养3
‑
7天，检测待测样品中菌落总数和霉菌酵母菌的含量。
[0008]优选地，所述前处理步骤如下：生产车间按要求进行设备清洗、消毒；涂抹前取样员应洗手，并佩戴口罩，然后用消毒酒精对手和镊子等工具进行彻底消毒；
[0009]涂抹方式选择：按照管路直径可采取无菌棉签进行涂抹，管径类、平面或表面类、错壁类均可采用无菌棉签进行涂抹；
[0010]优选地，所述涂抹为外表面涂抹，步骤如下：用已消毒的棉签，涂抹被涂抹物的外表面，涂抹面积为50cm2‑
100cm
2,
，放入装有灭菌生理盐水中。
[0011]优选地，所述涂抹为管路内壁涂抹，步骤如下：用消毒过的棉签，将棉签沿着涂抹内表面进行旋转涂抹，涂满50cm2后，放入装有无菌生理盐水中。
[0012]优选地，所述旋转涂抹为360
°
旋转涂抹。
[0013]优选地，所述无菌生理盐水装于涂抹瓶中。
[0014]优选地，所述无菌稀释液生理盐水的配制如下：称取8.5g氯化钠溶于1000ml蒸馏水中，经121℃高压灭菌15min。
[0015]本专利技术所述消毒过的棉签是在121℃高压灭菌25min的棉签，无菌稀释液生理盐水装于9ml生理盐水灭菌后的18*180试管，在50cm2的涂抹面积内来回涂抹，在上述涂抹前处理、用量准确的条件下，生产设备及器皿清洗后涂抹样品中微生物的检出率进一步提高。
[0016]本专利技术在27℃
‑
29℃下培养5天后，单菌落形态变大，形态分明，以方便本领域技术人员对菌落进行计数。
[0017]优选地，所述涂抹取相同地方的涂抹样品作对比实验；对菌落检测进行平行实验，结果报告时，以平均菌落数乘以最低稀释倍数报告，未长菌以小于1乘以最低稀释倍数报告。通过检测数据进行对比分析数据，使计数结果更加接近实际值，准确度更高。
[0018]本专利技术还提供一种涂抹微生物的检测方法在检测霉菌和酵母菌含量的应用。
[0019]本专利技术还提出了一种检测生产设备及器皿样品中霉菌和酵母菌含量的方法。所述方法包括：
[0020]1)涂抹前准备：生产车间按要求进行设备清洗、消毒；涂抹前取样员应洗手，并佩戴口罩，然后用消毒酒精对手和镊子等工具进行彻底消毒；
[0021]2)涂抹方式选择：按照管路直径可采取无菌棉签进行涂抹，管径类、平面或表面类、错壁类均可采用无菌棉签进行涂抹；
[0022]3)具体涂抹步骤：
[0023]表面涂抹：经121℃高压蒸汽灭菌25min的棉签，涂抹被涂抹物的表面，涂抹面积50cm
2,
立即放入装有灭菌生理盐水的18*180试管中，立即盖好塞子，使棉签与盐水充分混合并做好标识；
[0024]管路内壁涂抹：用经121℃高压蒸汽灭菌25min的棉签，将棉签沿着涂抹内表面进行3600旋转涂抹，使棉签3600与涂抹面充分接触，并保证涂满50cm2后，立即放入装有无菌稀释水的试管中，盖好塞子，做好标识。
[0025]4)将步骤3)所得的样品做好记录。并在27℃
‑
29℃下培养5天，以便对所述待测样品中菌落总数和霉菌酵母菌的含量进行测定。其中，所述样品涂抹样品。
[0026]本专利技术优点
[0027]本专利技术检测样品中微生物含量的方法，利用消毒过的棉签和扩大涂抹面积排除了涂抹材料自身因素对涂抹结果的影响，扩大了取样面积有利于增加涂抹的可信度。通过上述涂抹方法检测样品中微生物含量，能够有效检测到生产设备及器皿涂抹样品中的菌落总数、霉菌和酵母菌的含量，显著提高了样品中微生物的检出率，提高了检测结果的准确性降低了质量安全风险。
[0028]需要说明的是，本专利技术的技术方案是专利技术人通过大量的试验而获得的。例如，专利技术人采用过脱脂棉球、涂抹纸等材料做涂抹材料；不同面积的涂抹等梯度试验。综合各因素得出此专利技术。
具体实施方式
[0029]下面将结合实施例对本专利技术的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限定本专利技术的范围。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
[0030]实施例1
[0031]检测生产设备及器皿清洗后涂抹微生物的含量的仪器、材料和操作方法如下所述：
[0032]1、实验仪器
[0033]恒温培养箱：28℃
±
1℃；
[0034]冰箱：2℃～5℃；
[0035]天平：感量为0.1g；
[0036]高压灭菌釜。
[0037]2、实验试剂与材料
[0038]无菌吸管：1mL(具0.01mL刻度)；
[0039]无菌锥形瓶：容量500mL；
[0040]药匙、无菌平皿：直径90mm；
[0041]3、培养基的配制
[0042]称取孟加拉红培养基36.6g于1000ml蒸馏水中，称取平板计数琼脂23.5g于1000ml蒸馏水中搅拌溶解，在121℃高压灭菌15分钟备用。
[0043]4、操作过程
[0044]进入车间先经过消毒池消毒，在洗手池洗手进行二次消毒，涂抹前用75％的酒精棉球对手和镊子消毒，用消毒镊子分别取灭菌棉签涂于被涂抹物表面使之充分接触涂完50cm2来回涂抹后，立即放入装有9mL无菌生理盐水的涂抹瓶中，立即盖好塞子，使棉签与盐水充分混合并做好标识涂抹五个点；并在28℃下培养5天后取出样品；分别吸取1mL样品匀液于4块无菌平皿内，分别倾入18mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养基和孟加拉红琼脂各两个平皿，转动平皿使其混合均匀。待琼脂凝固后，将平板翻转，36℃培养48h和28℃培养5天。
[0045]对比例1
[0046]检测生产设备及器皿清洗后涂抹微生物本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种涂抹微生物的检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：步骤一，前处理：对需检测设备消毒，对取样工具进行消毒；步骤二，涂抹：用已消毒的棉签，涂抹被涂抹物的表面，将棉签放入灭菌生理盐水中；步骤三，检测：在27℃
‑
29℃下培养3
‑
7天，检测待测样品中菌落总数和霉菌酵母菌的含量。2.如权利要求1所述的一种涂抹微生物的检测方法，其特征在于，所述涂抹为外表面涂抹，步骤如下：用已消毒的棉签，涂抹被涂抹物的外表面，涂抹面积为50cm2‑
100cm2,，放入装有灭菌生理盐水中。3.如权利要求1所述的一种涂抹微生物的检测方法，其特征在于，所述涂抹为管路内壁涂抹，步骤如下：用消毒过的棉签，将棉签沿着涂抹内表面进行旋转涂抹，涂满50cm2后...

【专利技术属性】
技术研发人员：茶树桥，彭金国，彭少晶，杨发光，彭克香，田灿先，石舟琼，梁家伟，
申请(专利权)人：大理欧亚乳业有限公司，
类型：发明
国别省市：