一种生物相容性微生物生长抑制剂配方组成比例

本发明专利技术涉及一种壳寡糖与芦荟蒽醌提取物为主要成分的微生物生长抑制剂配方，显示出对革兰氏阴性细菌、阳性细菌及真菌的生长抑制。显示出与复杂蛋白溶液样本的高度生物相容性，不干扰MSC提取物中活性蛋白的生物学功能。显示与细胞的高度生物学相容性，不干扰传代MSC细胞的生物学功能。该抑制剂可在某种程度上取代干细胞培养基存储过程中所使用的抗生素及化学抑菌剂。抑制剂组分入列欧洲药典化学，成分明晰，安全性高，符合干细胞药物开发基本理念，可作为间充质干细胞类药物开发过程中核心辅助性原料使用。辅助性原料使用。辅助性原料使用。

【技术实现步骤摘要】
一种生物相容性微生物生长抑制剂配方


[0001]本专利技术涉及生物
，特别是涉及一种生物相容性微生物生长抑制剂配方。

技术介绍

[0002]现有技术中生长抑制剂有微生物生长抑制剂，物理类和化学类生长抑制剂，抗生素类生长抑制剂。
[0003]微生物的生长抑制剂：食品、日用品及医药产品中有机物成分可作为外源性微生物生长的重要能量来源。如果不对微生物污染限度进行有效控制，将直接造成终产品失效。依据对微生物生长抑制程度，包括：防腐(抑制细菌过度生长防止产品腐败)、消毒(选择性杀灭一般病源性微生物)、灭菌(消灭所有微生物实现污染控制)。消毒剂和防腐剂之间无严格的界限，可调节使用浓度将同一种物质分别作为消毒剂与防腐剂。微生物的生长抑制可藉由物理方法，化学方法，抗生物抑制、其他生物学方法来实现。
[0004]物理类与化学类生长抑制因素：通过物理途径来改变微生物的最适生长状态(温度、湿度)；通过物理损伤直接杀灭微生物(紫外线及电离辐射抑制)；物理性隔绝(滤过除菌法)。常用的消毒剂、防腐剂属于进行化学类微生物生长抑制剂。化学制剂控制微生物生长基于两个方面实现，改变微生物最适生长环境(pH，渗透压，表面张力)；干扰微生物正常代谢，抑制微生物生长繁殖或对其进行直接杀伤。
[0005]抗生素类抑制剂：抗生素是指由微生物或高等动植物生长过程中的次级代谢产物，具有干扰、杀伤其他活细胞(细菌、真菌、动植物细胞)的功能。利用抗生素的选择性杀伤或抑制病原微生物生长，而不对机体产生过度损害，是临床上进行感染类控制的重要手段。
[0006]微生物抑制剂的使用策略：无论从抑制效率，使用成本及使用程序上，通过物理化学手段都是抑制微生物生长的首选策略。抗生素由于其来源珍贵价格相对高昂，一般局限使用于医药领域；另外一方面，微生物在抗生素环境中面临极高的选择压力，过度使用抗生素会造成其在环境中蓄积并可能导致细菌的抗药性突变。曾经在畜牧业、生物医药工业中广泛使用的抗生素添加剂抑制有害微生物的策略，已经被逐步淘汰。依据产品特性不同，可采用不同的微生物生长抑制策略；在单一抑制剂无法实现目的时，可采用多重抑制策略。但是，理化手段在抑制微生物生长的同时也会影响到产品本身，其包括产品性状改变、热稳定性变化、防腐剂残留等。相较于传统的食品工业，在生物医药领域(特别是生物活性物质产品)这类影响对产品质量影响则更为明显，因此有必要开发新型的生物相容性微生物生长抑制剂。
[0007]生物学抑制策略
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植物源性生长抑制剂：多种植物具有抗菌功能，植源性生长抑制剂是植物抗菌成分的高浓度提取物，包括植物香辛料、抗菌中草药提取物。日用化妆品领域使用植物提取物已经非常成熟。芦荟提取物具有良好的保湿功能、抗氧化功能，有效刺激基底层细胞活化与再生，是目前化妆品领域中应用最为广泛的植物活性添加物。研究表明芦荟提取物在伤口愈合治疗中能够有效地抑制微生物感染。芦荟粗提物能有效地杀死因使用抗生素而产生的耐性菌。
[0008]生物学抑制策略
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动物来源的生长抑制剂：抗菌肽(antimicrobial peptide)是指昆虫体内经诱导而产生的一类具有抗菌活性的碱性多肽物质。溶菌酶(lysozyme)不仅存在于家禽的蛋清中，也存在于哺乳动物的泪、唾液、血浆、尿、乳汁等体液中，可分解溶壁微球菌、巨大芽孢杆菌、黄色八叠球菌等革兰阳性菌。壳寡糖(chitosan)是采用虾壳或蟹壳甲壳素，经浓碱处理脱乙酰化所得；壳寡糖经过进一步的降解处理(酶解、化学降解、微波降解)成为聚合度2～20，分子量≤3200Da的壳寡糖(Chitosan oligosaccharide)。作为功能性食品，壳寡糖与壳寡糖在调节免疫力、人体肠道菌群方面得到广泛应用。壳寡糖/壳寡糖具有明显的微生物生长抑制功能(体外可抑制金黄色葡萄球菌、大肠埃希杆菌、放线杆菌、突变链球菌等)；抑菌活性随脱乙酰度和浓度的提高而增强。其作用机理有以下两点：吸附在病菌微生物细胞外表阻止其养；渗透入微生物细胞内吸附阴离子物质，使其生理活动失常。
[0009]相比于理化类微生物生长抑制剂，生物学抑制策略则更为温和，对终产品的体系稳定性冲击较小；这一特征使得其保存生物活性物质(细胞，蛋白，外泌体)中更具备使用价值，是典型的生物亲和性物质；与使用抗生素抑制剂相比，细菌对生物抑制耐药性的产生则更为困难；生物提取物的特征，使得废弃物处理的环境压力减至最低。

技术实现思路

[0010]基于此，本专利技术进行深入研究，(1)使用壳寡糖与芦荟蒽醌提取物为主要成分构微生物生长抑制剂，该体系显示出对部分革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌及真菌的抑制效果。(2)天然的抗菌抑制剂与生物活性蛋白体系相容度良好；抑制剂与间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSC)培养活性提取物混合后不仅显示出微生物生长抑制功能，还显示蛋白浓度、活性保持功能。(3)该抑制剂与传统细胞培养体系兼容良好；在MSC培养体系中添加活性抑制剂，MSC的增殖、分化及生物学标记未发生明显变化。(4)壳寡糖与芦荟蒽醌提取物已入列欧洲药典名录的植物组分，满足干细胞药物生产制备环节中所宣称的化学成分明晰这一特征；新型的抑制剂可作为核心辅助性原料进入细胞药物产业环节。
[0011]具体地本专利技术提供一种生物相容性微生物生长抑制剂配方，所述配方包括壳寡糖与芦荟蒽醌提取物。
[0012]优选的芦荟蒽醌提取物为芦荟苷。
[0013]优选的壳寡糖的质量浓度(m/V)为10
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30％，芦荟苷的质量浓度(m/V)为0.5
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3％。
[0014]更优选的壳寡糖的质量浓度为20％，芦荟苷的质量浓度为1％。
[0015]本专利技术还涉及一种生物相容性微生物生长抑制剂配方的配制方法，包括以下步骤：
[0016]1)称取芦荟苷，溶解于氯化钠溶液中，除菌过滤；
[0017]2)称取壳寡糖，溶于溶解于氯化钠溶液中，用盐酸调节pH值，除菌过滤；
[0018]3)称取右旋糖酐，溶解于氯化钠溶液中，加入步骤1)的芦荟苷和步骤2)的壳寡糖，配制微生物生长抑制剂配方母液。
[0019]优选的配制方法中氯化钠溶液浓度为0.9％，除菌过滤采用0.22um滤膜，壳寡糖聚合度为2～20，分子量为2000。
[0020]微生物生长抑制剂配方母液中含右旋糖酐质量浓度(m/V)为10
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30％，壳寡糖的质
量浓度(m/V)为10
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30％，所述芦荟苷的质量浓度(m/V)为0.5
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3％。
[0021]优选的微生物生长抑制剂配方母液中含右旋糖酐质量浓度为20％，壳寡糖的质量浓度为20％，所述芦荟苷的质量浓度为1％，调节pH至6.5，优选用1M盐酸溶液调节pH。
[0022]本专利技术生物相容性微生物生长抑制剂用于革兰氏阴性细菌、革兰氏阳性细菌及真菌的生长抑制。
[0023]本专利技术的有益效果：
[0024本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种生物相容性微生物生长抑制剂配方，其特征在于，所述配方包括壳寡糖与芦荟蒽醌提取物。2.根据权利要求1所述的生物相容性微生物生长抑制剂配方，其特征在于，所述芦荟蒽醌提取物为芦荟苷。3.根据权利要求2所述的生物相容性微生物生长抑制剂配方，其特征在于，所述壳寡糖的质量浓度为10
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30％，所述芦荟苷的质量浓度为0.5
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3％。4.根据权利要求3所述的生物相容性微生物生长抑制剂配方，其特征在于，所述壳寡糖的质量浓度为20％，所述芦荟苷的质量浓度为1％。5.根据权利要求1
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4任一所述的生物相容性微生物生长抑制剂配方，其特征在于，所述配方的配制方法包括以下步骤：1)称取芦荟苷，溶解于氯化钠溶液中，除菌过滤；2)称取壳寡糖，溶于溶解于氯化钠溶液中，用盐酸调节pH值，除菌过滤；3)称取右旋糖酐，溶解于氯化钠溶液中，加入步骤1)的芦荟苷和步骤2)的壳寡糖，配制微生物生长抑制剂配...

【专利技术属性】
技术研发人员：王云虹，丁炜，柏小丽，万兴中，
申请(专利权)人：北京京蒙细胞生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：