肠道干细胞及其在改善肠道微环境以及抗肠道衰老中的应用制造技术

本申请公开了一种肠道干细胞及其在制备改善肠道微环境以及抗肠道衰老制剂中的应用。该肠道干细胞包括表达Lgr5的肠道干细胞和表达Bim1的肠道干细胞，并经过WB检测和mRNA水平检测，发现二者的P2代细胞还分别表达了c

【技术实现步骤摘要】
肠道干细胞及其在改善肠道微环境以及抗肠道衰老中的应用


[0001]本申请涉及肠道微环境
，尤其涉及肠道干细胞及其在改善肠道微环境以及抗肠道衰老中的应用。

技术介绍

[0002]在机体衰老过程中，肠道干细胞的自我更新和多向分化潜能会发生改变。研究发现，老年人小肠上皮干细胞的子代细胞呼吸链缺陷导致其增殖减少、凋亡增加7。而且机体衰老过程中肠道不同类型的上皮细胞数量会发生改变，但在不同的物种、不同的肠道部位，发生的变化不同。Sandstrom等Dz
‑
isl研究发现，老年人十二指肠和衰老小鼠的大肠内分泌细胞数量增加，但老年人直肠的内分泌细胞数量并未发生变化。
[0003]目前关于肠道衰老过程中微环境的研究主要集中于平滑肌细胞、间质细胞、肠神经细胞及淋巴细胞。衰老过程中肠道的消化吸收功能、免疫屏障功能等的改变与肠道微环境细胞变化紧紧相关，然而由于肠道系统的复杂性，衰老过程中所发生的变化仍有待进一步研究。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本申请的目的在于至少提供一种用于缓解或者改善衰老过程中肠道微环境相本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肠道干细胞的传代培养方法，包括以下步骤：分离得到表达Lgr5的肠道干细胞和表达Bim1的肠道干细胞，所述表达Lgr5的肠道干细胞和所述表达Bim1的肠道干细胞均来自于十二场上皮组织；将所述表达Lgr5的肠道干细胞和所述表达Bim1的肠道干细胞分别于原代培养液和传代培养液进行传代培养，传代次数不超过4代，每次代培养时间不超过48h。2.根据权利要求1所述的传代培养方法，其特征在于，用于培养所述表达Lgr5的肠道干细胞的原代培养液为含10～20mM HEPES、5～10mM谷氨酰胺、0.2～2倍N2细胞培养添加剂、0.2～2mg/mL CD Feed 002、80～100U/mL青霉素、80～100mg/mL链霉素、2～5μg/mL转铁蛋白、10～20μg/mL胰岛素、0.10～0.25mM非必需氨基酸、0.2～1mM丙酮酸钠的DMEM/F12培养基；用于传代培养所述表达Lgr5的肠道干细胞的传代培养液为含8～15mM HEPES、3～8mM谷氨酰胺、0.2～1mg/mL CD Feed 002、80～100U/mL青霉素、80～100mg/mL链霉素、2～5μg/mL转铁蛋白、10～20μg/mL胰岛素、0.10～0.25mM非必需氨基酸、0.2～1丙酮酸钠的DMEM/F12培养基。3.根据权利要求1所述的传代培养方法，其特征在于，用于培养所述表达Bim1的肠道干细胞的原代培养液为含10～20mM HEPES、5～10mM谷氨酰胺、0.5～2mg/mL CD Feed 002、80～100U/mL青霉素、80～100mg/mL链霉素、2～5μg/mL转铁蛋白、10～20μg/mL胰岛素、0.10～0.25mM非必需氨基酸、0.2～1mM丙酮酸钠的DMEM/F12培养基；用于培养所述表达Bim1的肠道干细胞的传代培养液为含5～10mM HEPES、2～6mM谷氨酰胺、0.1～0.5mg/mL CD Feed 002、50～80U/mL青霉素、50～80mg/mL链霉素、2～5μg/mL转铁蛋白、10～20μg/mL胰岛素、0.10～0.25mM非必需氨基酸、0.2～1mM丙酮酸钠的DMEM/F12培养基。4.一种细胞制剂，包含由权利要求1～...

【专利技术属性】
技术研发人员：宫田秀明，
申请(专利权)人：广东格林邦卡新材料生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：