一种在本氏烟草中表达猪瘟病毒E2蛋白的方法技术

本发明专利技术提供了一种在本氏烟草中高效表达猪瘟病毒E2蛋白的方法。通过将猪瘟病毒C株蛋白E2、6xHis标签、GS连接序列和GFPuv荧光蛋白在本氏烟草中融合表达，在紫外照射条件下即可以肉眼观察到E2蛋白在叶片中表达。提取烟草叶片蛋白后，用烟草蚀刻病毒蛋白酶处理总蛋白，并用Ni

【技术实现步骤摘要】
一种在本氏烟草中表达猪瘟病毒E2蛋白的方法


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种在本氏烟草中高效表达猪瘟病毒E2蛋白的方法及其应用。

技术介绍

[0002]猪瘟(classical swine fever，CSF)是由猪瘟病毒(classical swine fever virus，CSFV)引起猪的高度接触性、致死性传染病。猪瘟病毒E2蛋白是主要的免疫原性蛋白，是建立CSFV血清学检测的首选抗原。E2蛋白存在于病毒粒子或宿主细胞表面，在病毒吸附、侵入宿主细胞、产生抗体、诱导保护性免疫反应以及毒力中均有重要作用。猪瘟病毒E2蛋白在第75位含有一个O
‑
糖基化位点(OLG)，在第116、121、185、229、260和297位共含有6个N
‑
糖基化位点，这些糖基化位点的突变可导致病毒毒力减弱。研究表明，糖基化核心途径在动植物中十分保守，因此在烟草中表达猪瘟囊膜糖蛋白E2是切实可行的。
[0003]随着药物生物技术和植物基因工程迅速发展,利用转基因植物作为生物反应器表达重要重组蛋白抗原已成本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用本氏烟草表达猪瘟病毒E2蛋白的方法，包括构造用于从本氏烟草中产生免疫原性物质的重组载体以及将重组载体转化、感染或诱导宿主细胞的步骤，其中所述重组载体包括，a)猪瘟病毒E2蛋白序列，b)标签序列，c)Tev识别序列，d)连接序列，e)报告基因序列，f)植物表达载体。2.一种从本氏烟草中产生免疫原性物质的重组载体，包括：a)猪瘟病毒E2蛋白序列，b)标签序列，c)Tev识别序列，d)连接序列，e)报告基因序列，f)植物表达载体。3.根据权利要求1所述的方法或权利要求2的重组载体，其中所述猪瘟病毒E2蛋白序列如SEQ ID NO:1。4.根据权利要求1所述的方法或权利要求2的重组载体，其中所述的b)标签序列是6xHis标签序列，d)连接序列是GS序列,6xHis
‑
Tevsite
‑
GS序列如SEQ ID NO:2。5.根据权利要求1所述的方法或权利要求2的重组载体，其中所述的e)报告基因序列是绿色荧光蛋白基因序列。6.根据权利要求1所述的方法或权利要求2的重组载体，其中所述的e)报告基因序列是突...

【专利技术属性】
技术研发人员：聂俊伟，王愿，瞿志鹏，
申请(专利权)人：南京诺唯赞动物保健有限公司，
类型：发明
国别省市：