一种病毒裂解保存液制造技术

本发明专利技术提供一种病毒裂解保存液，属于生物技术领域。本发明专利技术的病毒裂解保存液兼具裂解和保存病毒核酸的功能，在

【技术实现步骤摘要】
一种病毒裂解保存液


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种病毒裂解保存液。

技术介绍

[0002]快速、准确筛查是控制病毒传播最有效的途径之一，RT
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qPCR作为病毒检测的“金标准”是当前应用最为广泛的病毒核酸筛查手段。然而，RT
‑
qPCR反应的建立需要前端的核酸提取、纯化步骤。尽管核酸提取从传统的液体提取发展到如今的磁珠提取，从之前的手动提取发展到如今的自动化提取，但受制于操作过程多、仪器占地面积大，核酸提取步骤是如今快速筛查的主要限速步骤。
[0003]各类样本裂解液为病毒检测提供了更为快速、方便、低价的检测方案，使用样本裂解液裂解核酸无需经过繁杂的核酸提取流程，无需配套的提取试剂及设备。然而，受制于核酸稳定性、裂解效率所需的环境差异，样本裂解液往往难以同时兼容保存与核酸裂解功能。例如，CN109486903A提供了一种用于将拭子上的细胞洗脱、裂解释放核酸的洗脱裂解液，但是该裂解液的使用需对样本进行高温处理，以提高核酸释放效率。CN111334503A公布了一种灭活型病毒保存液，能够灭活病原微生物，并有效防止核酸的降解，有效解决了病毒灭活和核酸常温运输保存的问题。但是，该保存液不具有裂解功能，还需要额外的裂解/提取步骤。

技术实现思路

[0004]本专利技术旨在针对现有技术的不足，提供一种病毒裂解保存液，其兼具裂解和保存病毒核酸的功能，且适用于各类样本。
[0005]本申请的第一方面提供一种病毒裂解保存液，所述裂解保存液包含缓冲成分、螯合剂、阴离子表面活性剂和蛋白变性剂。
[0006]在一些实施方案中，所述缓冲成分是Tris(三羟甲基氨基甲烷)，所述螯合剂是EDTA(乙二胺四乙酸)，所述蛋白变性剂是NaOH(氢氧化钠)，所述阴离子表面活性剂是SDS(十二烷基硫酸钠)。
[0007]在一些实施方案中，所述病毒裂解保存液包含Tris、EDTA、NaOH和SDS。
[0008]在一些实施方案中，所述病毒裂解保存液还包含稳定剂；优选地，所述稳定剂包括非离子表面活性剂和/或氨基酸，所述非离子表面活性剂是例如PEG200(聚乙二醇200)、PEG2000、PEG400、PEG4000、PEG800和PEG8000中的一种或多种，优选PEG200，所述氨基酸是例如碱性氨基酸，优选赖氨酸。
[0009]在一些实施方案中，所述病毒裂解保存液包含Tris、EDTA、NaOH、SDS、PEG200和/或赖氨酸。
[0010]在一些实施方案中，所述Tris在所述裂解保存液中的浓度是1
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50mM，优选2
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30mM，更优选5
‑
20mM，包括所述范围内的5mM、6mM、7mM、8mM、9mM、10mM、11mM、12mM、13mM、14mM、15mM、15.5mM、16mM、16.5mM、17mM、17.5mM、18mM、18.5mM、19mM、19.5mM和20mM。
[0011]在一些实施方案中，所述EDTA在所述裂解保存液中的浓度是1
‑
10mM，优选1
‑
5mM，包括所述范围内的1mM、1.25mM、1.5mM、1.75mM、2mM、2.2mM、2.5mM、2.8mM、3mM、3.5mM、4mM、4.5mM和5mM。
[0012]在一些实施方案中，所述NaOH在所述裂解保存液中的浓度是5
‑
20mM，优选6
‑
18mM，更优选8
‑
15mM，包括所述范围内的8mM、8.2mM、8.5mM、8.8mM、9mM、9.2mM、9.5mM、9.8mM、10mM、10.2mM、10.5mM、10.8mM、11mM、11.2mM、11.5mM、11.8mM、12mM、12.5mM、13mM、13.5mM、14mM、14.5mM和15mM。
[0013]在一些实施方案中，所述SDS在所述裂解保存液中的浓度是0.005
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0.1mM，优选0.008
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0.08mM，更优选0.01
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0.05mM，包括所述范围内的0.01mM、0.015mM、0.02mM、0.025mM、0.03mM、0.035mM、0.04mM、0.045mM和0.05mM。
[0014]在一些实施方案中，所述PEG200在所述裂解保存液中的浓度(体积分数)是0.5
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20％，优选1
‑
15％，更优选1
‑
12％，包括所述范围内的1％、2％、3％、4％、5％、5.5％、6％、6.5％、7％、7.5％、8％、8.5％、9％、9.5％、10％、10.5％、11％、11.5％和12％。
[0015]在一些实施方案中，所述赖氨酸在所述裂解保存液中的浓度是0.5
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20mM，优选1
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15mM，更优选1
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12mM，包括所述范围内的1mM、2mM、3mM、4mM、5mM、5.5mM、6mM、6.5mM、7mM、7.5mM、8mM、8.5mM、9mM、9.5mM、10mM、10.5mM、11mM、11.5mM和12mM。
[0016]在一些实施方案中，所述裂解保存液包含5
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25mM Tris、1
‑
2mM EDTA、10
‑
12mM NaOH、0.01
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0.02mM SDS、1
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10％PEG200和/或1
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10mM赖氨酸；优选地，所述裂解保存液包含5
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20mMTris、1mM EDTA、10mM NaOH、0.01mM SDS、1
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10％PEG200和/或1
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10mM赖氨酸；更优选地，所述裂解保存液包含5
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20mMTris、1mM EDTA、10mM NaOH、0.01mM SDS、1
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8％PEG200和/或1
‑
8mM赖氨酸；最优选地，所述裂解保存液包含5
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15mM Tris、1mM EDTA、10mM NaOH、0.01mM SDS、1
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5％PEG200和/或1
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5mM赖氨酸。
[0017]本申请的第二方面提供一种试剂盒，所述试剂盒包含第一方面所述的病毒裂解保存液。
[0018]本申请的第三方面提供第一方面所述的病毒裂解保存液和第二方面所述的试剂盒在裂解病毒样本中的用途。
[0019]在一些实施方案中，所述病毒样本是拭子样本或液体样本，所述拭子样本是例如咽拭子、鼻拭子或物体表面拭子，所述液体样本是例如痰液、唾液、血清、血浆和全血。
[0020]在一些实施方案中，所述病毒是DNA病毒或RNA病毒；所述DNA病毒是例如天花病毒，乙肝病毒本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种病毒裂解保存液，所述裂解保存液包含缓冲成分、螯合剂、阴离子表面活性剂和蛋白变性剂。2.根据权利要求1所述的裂解保存液，所述缓冲成分是Tris(三羟甲基氨基甲烷)，所述螯合剂是EDTA(乙二胺四乙酸)，所述蛋白变性剂是NaOH(氢氧化钠)，所述阴离子表面活性剂是SDS(十二烷基硫酸钠)。3.根据权利要求2所述的裂解保存液，所述裂解保存液还包含稳定剂；优选地，所述稳定剂是非离子表面活性剂和/或氨基酸；更优选地，所述非离子表面活性剂是PEG200(聚乙二醇200)，所述氨基酸是赖氨酸。4.根据权利要求3所述的裂解保存液，所述Tris在所述裂解保存液中的浓度是1
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50mM，优选2
‑
30mM，更优选5
‑
20mM；所述EDTA在所述裂解保存液中的浓度是1
‑
10mM，优选1
‑
5mM；所述NaOH在所述裂解保存液中的浓度是5
‑
20mM，优选6
‑
18mM，更优选8
‑
15mM；所述SDS在所述裂解保存液中的浓度是0.005
‑
0.1mM，优选0.008
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0.08mM，更优选0.01
‑
0.05mM；所述PEG200在所述裂解保存液中的浓度(体积分数)是0.5
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20％，优选1
‑
15％，更优选1
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12％；所述赖氨酸在所述裂解保存液中的浓度是0.5
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20mM，优选1
‑
15mM，更优选1
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12mM。5.根据权利要求3所述的裂解保存液，所述裂解保存液包含5
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25mMTris、1
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2mMEDTA、10
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12mMNaOH、0.01
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0.02mMSDS、1
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10％PEG200和/或1
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10mM赖氨酸；优选地，所述裂解保存液包含5
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20mMTris、1mMEDTA、10mMNaOH、0.01mMSDS、1
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10％PEG200和/或1
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10mM赖氨酸；更优选地，所述裂解保存液包含5
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20mMTris、1m...

【专利技术属性】
技术研发人员：樊安琪，曹林，杨程程，瞿志鹏，吴恒，李雅男，
申请(专利权)人：南京诺唯赞动物保健有限公司，
类型：发明
国别省市：