烟草黄连素桥酶样核酸的靶向诱变制造技术

本发明专利技术涉及黄连素桥酶样核酸的修饰，以及它们在调控植物内烟碱生物合成中的用途。它们在调控植物内烟碱生物合成中的用途。它们在调控植物内烟碱生物合成中的用途。

【技术实现步骤摘要】
烟草黄连素桥酶样核酸的靶向诱变
[0001]本申请是申请日为2016年12月2日、专利技术名称为“烟草黄连素桥酶样核酸的靶向诱变”的中国专利技术专利申请No.201680078771.X的分案申请。
[0002]优先权声明
[0003]根据35U.S.C.
§
119(e)，本申请要求2015年12月4日提交的美国临时申请No.62/263,151的权益，该申请的全部内容以引用方式并入本文。


[0004]本专利技术涉及黄连素桥酶样核酸(bridge enzyme
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like nucleic acid)的修饰，以及它们在调控植物内烟碱类生物碱的生物合成中的用途。

技术介绍

[0005]烟草(普通烟草(Nicotiana tabacum L.))的吡啶生物碱是研究最多的一类植物次生化合物。在大部分烟草基因型中，烟碱构成了总生物碱池的超过90％，并且主要造成烟草产品用户所经历的药理学应答。按相对丰度递减的顺序，烟草中其余的主要生物碱包括新烟草碱,降烟碱和假木贼碱。烟草中生物碱的水平受环境条件、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.烟草属植物、其种子或后代植物、或烟草属植物部分在生产烟草产品中的用途，其中所述植物、其种子或后代植物、或植物部分：(a)被修饰以降低BBLa、BBLb和BBLc中至少其一的活性或者降低编码BBLa、BBLb和BBLc中至少其一的核酸的表达；和(b)包含在选自下组的至少一种内源性多核苷酸或多核苷酸组合中的突变：(i)与SEQ ID NO：1具有约97％至约100％序列同一性的多核苷酸和与SEQ ID NO：2具有约97％至约100％序列同一性的多核苷酸；(ii)与SEQ ID NO:1具有约97％至约100％序列同一性的多核苷酸和与SEQ ID NO:3具有约97％至约100％序列同一性的多核苷酸；(iii)与SEQ ID NO:2具有约97％至约100％序列同一性的多核苷酸；和(iv)与SEQ ID NO:3具有约97％至约100％序列同一性的多核苷酸，以使得所述烟草属植物的烟碱类生物碱含量与未按照(a)进行修饰且不包含(b)的突变的植物相比降低。2.根据权利要求1所述的用途，其中所述烟草属植物、其种子或后代植物、或烟草属植物部分被修饰以降低BBLa、BBLb和BBLc中至少两种的活性或者降低编码BBLa、BBLb和BBLc中至少两种的核酸的表达。3.根据权利要求2所述的用途，其中所述烟草属植物、其种子或后代植物、或烟草属植物部分被修饰以降低BBLa、BBLb和BBLc中每一种的活性或者降低编码BBLa、BBLb和BBLc中每一种的核酸的表达。4.根据权利要求3所述的用途，其中所述烟草属植物、其种子或后代植物、或烟草属植物部分在(i)
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(iv)的至少两个多核苷酸或多核苷酸组合中的每一个中包含突变。5.根据权利要求4所述的用途，其中所述烟草属植物、其种子或后代植物、或烟草属植物部分在(i)
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(iv)的多核苷酸或多核苷酸组合中的每一个中包含突变。6.根据权利要求3所述的用途，其中所述烟草属植物、其种子或后代植物、或烟草属植物部分的烟碱类生物碱含量与未根据(a)进行修饰并且不包括(b)的突变的植物相比降低了至少90％。7.根据权利要求6所述的用途，其中所述烟草属植物、其种子或后代植物、或烟草属植物部分的烟碱类生物碱含量与未按照(a)进行修饰并且不包括(b)的突变的植物相比减少了至少95％。8.根据权利要求6所述的用途，其中所述烟草属植物、其种子或后代植物、或烟草属植物部分的烟碱类生物碱含量与未按照(a)进行修饰并且不包括(b)的突变的植物相比降低了至少97％。9.根据权利要求1所述的用途，其中所述烟草属植物、其种子或后代植物、或烟草属植物部分：(a)被修饰以降低BBLa、BBLb和BBLc中每一种的活性或者降低编码BBLa、BBLb和BBLc中每一种的核酸的表达，并且(b)在至少多核苷酸(iv)中包含突变，并且其中，与未按照(a)进行修饰并且不包含(b)的突变的植物相比，所述烟草属植物的烟碱类生物碱含量降低了至少90％。
10.根据权利要求1所述的用途，其中所述烟草属植物或烟草属植物部分选自烟叶、烟丝、切丝、磨碎的烟草、粉末烟草、烟草提取物、无烟烟草、湿润或干燥鼻烟、烟斗烟草、雪茄烟草、小雪茄烟草、香烟烟草和嚼烟。11.根据权利要求1所述的用途，其中所述烟草属植物部分包含一个或多个烟草属植物细胞。12.根据权利要求1所述的用途，其中所述烟碱类生物碱包括烟碱和新烟草碱中的一种或多种。13.根据权利要求1所述的用途，其中所述烟草产品选自小雪茄、丁香香烟、不通风的凹陷过滤嘴香烟，通风的凹陷过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟、含烟草口香糖、含烟草的锭剂和嚼烟。14.一种生产具有降低的烟碱类生物碱含量的烟草属植物或烟草属植物部分的方法，包括在烟草属植物或烟草属植物部分中组合：(A)降低BBLa、BBLb和BBLc中至少一种的活性或者降低编码BBLa、BBLb和BBLc中至少一种的核酸的表达的修饰；和(B)选自下述的至少一种内源性多核苷酸或多核苷酸组合中的突变：(i)与SEQ ID NO：1具有约97％至约100％序列同一性的多核苷酸和与SEQ ID NO：2具有约97％至约100％序列同一性的多核苷酸；(ii)与SEQ ID NO:1具有约97％至约100％序列同一性的多核苷酸和与SEQ ID NO:3具有约97％至约100％序列同一性的多核苷酸；(iii)与SEQ ID NO:2具有约97％至约100％序列同一性的多核苷酸；和(iv)与SEQ ID NO:3具有约97％至约100％序列同一性的多核苷酸，从而使得所述烟草属植物部分具有的烟碱类生物碱含量与未按照(A)进行修饰且不包含(B)的突变的植物部分相比降低。15.根据权利要求14所述的方法，其中所述烟草属植物或烟草属植物部分被修饰以降低BBLa、BBLb和BBLc中的至少两种的活性或者降低编码BBLa、BBLb和BBLc中的至少两种的核酸的表达，。16.根据权利要求14所述的方法，其中所述烟草属植物或烟草属植物部分被修饰以降低BBLa、BBLb和BBLc中每一种的活性或者降低编码BBLa、BBLb和BBLc中每一种的核酸的表达.17.根据权利要求14所述的方法，其中所述突变的产生包括向所述烟草属植物或烟草属植物部分中引入至少一种重组核酸，该重组核酸编码靶向(i)
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(iv)的多核苷酸或多核苷酸组合中的至少两种的核酸酶。18.根据权利要求14所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：R，
申请(专利权)人：北卡罗来纳州立大学，
类型：发明
国别省市：