【技术实现步骤摘要】
乳腺癌早期筛查的多重基因甲基化检测荧光定量PCR试剂盒
[0001]本专利技术属于生物基因工程
，涉及一种乳腺癌早期筛查的多重基因甲基化检测荧光定量PCR试剂盒。
技术介绍
[0002]乳腺癌是女性最常见的癌症，也是导致女性癌症死亡的主要原因之一。据2020年全球癌症统计数据显示，乳腺癌已超过肺癌，成为世界上发病率最高的恶性肿瘤，估计每年约有230万新发病例和68.5万死亡病例，对人类健康构成严重威胁。早期诊断是降低癌症死亡率的关键，降低的程度从15%到25%不等。但现有的诊断方法，如钼靶和B超因其假阳性率较高，诊断准确性主要于检查设备和检查医生的个人经验，主观性强，容易导致过度诊断和过度治疗。因此，迫切需要开发一种灵敏度高、特异性强的乳腺癌早期诊断方法，以提高乳腺癌的诊治和预后水平。
[0003]DNA甲基化是一种重要的表观遗传修饰，是指在DNA甲基转移酶的催化下，以S
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腺苷甲硫氨酸为甲基供体，将甲基转移到特定碱基上的过程。它可以在不改变DNA序列的情况下控制基因表达，在许多生物学过程中发...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.人外周血单个核细胞DNA中KLRK1、KLRD1、PLXNA4、TRDJ3基因在早期乳腺癌诊断试剂盒中的应用。2.一种用于乳腺癌早期筛查的无创多基因甲基化联合检测荧光定量PCR试剂盒，所述试剂盒包括用于检测KLRK1、KLRD1、PLXNA4、TRDJ3基因甲基化的引物对和基因特异的水解探针；用于检测KLRK1基因目的位点的甲基化特异引物对为：正向GTTATGATTAGGAAAGTTATAATTGAAGATG、反向CACTTACCACTTTACCTTTATTAATACGA，KLRK1基因特异的水解探针序列为ACATAAATCTTACTATCTAATAAAACAAAACTCCCACA；用于检测KLRD1基因目的位点的甲基化特异引物对为：正向TATCTAATTATCCTAACCACGACAAAC、反向CTATTCTCTACCTAATTATCCTAACCACG，KLRD1基因特异的水解探针序列为AATAAATCTAAATAAATTTCCCACTTAAACGCC；用于检测PLXNA4基因目的位点的甲基化特异引物对为：正向TTTTAAAGTTTATTATAGGAAGAGGTTGTT、反向CAATCATTTACAACCTTATCTTTAACG，PLXNA4基因特异的水解探针基因为CACTCCTTTAATACACACGTCACATAAAACG；用于检测TRDJ3基因目的位点的甲基化特异引物对为：正向GATGTGTAGTTTAGGTAGGGGATGT、反向TACCTCATCACCATAAATCAAAATCG，TRDJ3基因特异的水解探针基因为CTAAAACCAAACAAAAAAAATAACAATTATATAAAACC。3.根据权利要求2所述用于乳腺癌早期筛查的无创多基因甲基化联合检测荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，还包括内参基因ACTB的引物对和探针，其中内参ACTB的引物对为正向TGGTGATGGAGGAGGTTTAGTAAGT、反向AACCAATAAAACCTACTCCTCCCTTAAA ，探针序列为ACCACCACCCAACACACAATAACAAACACA。4.根据权利要求3所述用于乳腺癌早期筛查的无创多基因甲基化联合检测荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，KLRK1、KLRD1、PLXNA4、T...
【专利技术属性】
技术研发人员：王传新，杜鲁涛，李培龙，李娟，王恬恬，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：
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