表达免疫检查点抑制剂的超级DC及其用途制造技术

本发明专利技术涉及表达免疫检查点抑制剂的抗原呈递细胞及其用途。具体地，本发明专利技术提供分泌PD

【技术实现步骤摘要】
表达免疫检查点抑制剂的超级DC及其用途


[0001]本专利技术涉及免疫治疗领域，具体涉及负载抗体的抗原呈递细胞及其用途。

技术介绍

[0002]肿瘤免疫治疗作为一种新型肿瘤治疗模式，主要通过激活机体的免疫系统产生抗肿瘤免疫，从而达到清除肿瘤细胞的目的，不但能引发持久的抗肿瘤免疫，而且对预防术后复发具有重要作用。树突状细胞(dendritic cells，DC)作为机体产生特异性免疫反应的首要环节，是肿瘤免疫治疗的重要靶点。DC疫苗采用自体或异体肿瘤细胞成份致敏患者外周血来源的单核细胞诱导分化的DC，从而直接诱导特异性的免疫反应。
[0003]DC疫苗是将体外培养的负载肿瘤抗原的DC导入体内，这些DC通过抗原提呈功能及分泌细胞因子调节肿瘤抗原特异性Th1细胞增殖活化，并进一步促进NK细胞及CTL活化，介导肿瘤杀伤。体外诱导或构建的可特异性识别肿瘤的DC细胞，回输入肿瘤患者体内，可以激活T细胞对肿瘤的免疫反应，表达高水平的PD
‑
1、CTLA
‑
4。
[0004]靶向树突状细胞的治疗性肿瘤疫苗通常包括三个组成部分。1)肿瘤相关抗原：抗原可以是小分子肽，重组蛋白。经历改造修饰的肿瘤细胞，病毒载体/或改造过的细菌载体来表达的肿瘤抗原，和DNA或者RNA。这些不同方式表达或制备的抗原可能在体内被树突状细胞吸收和处理，并以MHC2表达到细胞表面，可以被T细胞CD8识别。抗原也可以直接表达在树突状细胞上。2)是树突状细胞(体内的，分离提纯的，或是分离在外周血白细胞中的)。3)佐剂或免疫剌激剂。
[0005]尽管临床研究表明，通过患者自体单核细胞诱导的DC疫苗能被患者较好的耐受，并能产生抗肿瘤免疫应答，但仍无法有效治疗肿瘤，原因可能与特异性肿瘤抗原缺乏、抗原负载效率低以及治疗后续调节性T细胞被激活，产生免疫抑制有关。肿瘤免疫微环境和肿瘤免疫抑制机制是限制DC疫苗使用的关键。

技术实现思路

[0006]本专利技术第一方面提供分泌PD
‑
1结合分子和CTLA
‑
4结合分子和/或含有其编码序列的抗原呈递细胞。
[0007]在一个或多个实施方案中，所述细胞含有和/或表达所述PD
‑
1结合分子和CTLA
‑
4结合分子。
[0008]在一个或多个实施方案中，所述抗原呈递细胞来自哺乳动物外周血。
[0009]在一个或多个实施方案中，所述抗原呈递细胞来自哺乳动物PBMC。
[0010]在一个或多个实施方案中，所述抗原呈递细胞负载有肿瘤相关抗原或其编码序列。优选地，所述抗原呈递细胞表达所述肿瘤相关抗原；所述抗原呈递细胞含有肿瘤相关抗原的编码序列。更优选地，所述抗原呈递细胞包含肿瘤相关抗原的编码mRNA。
[0011]在一个或多个实施方案中，所述肿瘤相关抗原包含癌
‑
睾丸抗原、过表达抗原、分化抗原的一个或多个，优选包含选自以下的一个或多个：MAGE
‑
A3、survivin、CEA。
[0012]在一个或多个实施方案中，所述PD
‑
1结合分子是抗PD
‑
1抗体或其抗原结合片段。
[0013]在一个或多个实施方案中，所述CTLA
‑
4结合分子是抗CTLA
‑
4抗体或其抗原结合片段。
[0014]在一个或多个实施方案中，所述抗原呈递细胞包括选自巨噬细胞、B细胞和树突状细胞中的一种或多种。
[0015]在一个或多个实施方案中，所述抗原呈递细胞是成熟或未成熟的树突状细胞。
[0016]在一个或多个实施方案中，所述PD
‑
1结合分子的编码序列是RNA，和/或，所述CTLA
‑
4结合分子的编码序列是RNA。
[0017]在一个或多个实施方案中，所述肿瘤相关抗原的编码序列是RNA。
[0018]本专利技术第二方面提供一种产生负载有肿瘤相关抗原的抗原呈递细胞的方法，包括：
[0019](1)使本文第一方面所述的抗原呈递细胞负载肿瘤相关抗原；
[0020](2)使负载了肿瘤相关抗原的抗原呈递细胞分泌PD
‑
1结合分子和CTLA
‑
4结合分子；或
[0021](3)使抗原呈递细胞接触肿瘤相关抗原或其编码序列以及PD
‑
1结合分子和CTLA
‑
4结合分子的编码序列。
[0022]在一个或多个实施方案中，所述抗原呈递细胞包括选自巨噬细胞、B细胞和树突状细胞中的一种或多种。
[0023]在一个或多个实施方案中，(2)包括使细胞表达并分泌所述PD
‑
1结合分子和CTLA
‑
4结合分子。
[0024]在一个或多个实施方案中，(2)包括在细胞中引入PD
‑
1结合分子和CTLA
‑
4结合分子的编码序列，例如mRNA。
[0025]在一个或多个实施方案中，负载肿瘤相关抗原包括：接触或表达肿瘤相关抗原，和/或，接触或引入肿瘤相关抗原的编码序列。
[0026]在一个或多个实施方案中，树突状细胞衍生自单核细胞。
[0027]在一个或多个实施方案中，所述PD
‑
1结合分子是抗PD
‑
1抗体或其抗原结合片段。
[0028]在一个或多个实施方案中，所述CTLA
‑
4结合分子是抗CTLA
‑
4抗体或其抗原结合片段。
[0029]在一个或多个实施方案中，所述抗原负载之前或之后，使所述树突状细胞接触成熟组合物(例如成熟鸡尾酒(maturation cocktails))。所述成熟组合物包含选自IFN
‑
γ、PolyI:C、R848、PGE2的一个或多个。
[0030]在一个或多个实施方案中，所述肿瘤包括呼吸系统肿瘤、消化系统肿瘤、泌尿系统肿瘤、神经系统肿瘤、生殖系统肿瘤、皮肤肿瘤；优选包括选自以下的一种或多种：肝癌、胃肠癌、肺癌、胰腺癌、卵巢癌、胃癌、结肠癌、黑色素瘤、子宫内膜癌、宫颈癌、子宫肉瘤、外阴癌、乳腺癌、脑胶质瘤、前列腺癌、输卵管癌、喉癌、甲状腺癌、胆囊癌、肾癌、膀胱癌和脑癌。
[0031]在一个或多个实施方案中，所述肿瘤相关抗原包含癌
‑
睾丸抗原、过表达抗原、分化抗原的一个或多个，优选包含选自以下的一个或多个：MAGE
‑
A3、survivin、CEA。
[0032]在一个或多个实施方案中，所述结合分子的编码序列是RNA。
[0033]在一个或多个实施方案中，所述肿瘤相关抗原的编码序列是RNA。
[0034]本专利技术第三方面还提供一种药物组合物，其包含本专利技术第一方面所述的抗原呈递细胞或由本专利技术第二方面所述方法产生的抗原呈递细胞，和药学上可接受的辅料。
[003本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.分泌PD
‑
1结合分子和CTLA
‑
4结合分子的抗原呈递细胞，优选地，所述PD
‑
1结合分子是抗PD
‑
1抗体或其抗原结合片段，和/或，所述CTLA
‑
4结合分子是抗CTLA
‑
4抗体或其抗原结合片段。2.如权利要求1所述的抗原呈递细胞，其特征在于，所述抗原呈递细胞选自巨噬细胞、B细胞或树突状细胞。3.如权利要求1或2所述的抗原呈递细胞，其特征在于，所述抗原呈递细胞含有PD
‑
1结合分子的编码序列和CTLA
‑
4结合分子的编码序列；优选地，所述PD
‑
1结合分子的编码序列是RNA，和/或，所述CTLA
‑
4结合分子的编码序列是RNA。4.如权利要求1或2所述的抗原呈递细胞，其特征在于，所述抗原呈递细胞负载有肿瘤相关抗原；优选地，所述抗原呈递细胞表达所述肿瘤相关抗原。5.一种产生负载有肿瘤相关抗原的树突状细胞的方法，包括：(1)使权利要求1
‑
4中任一项所述的抗原呈递细胞负载肿瘤相关抗原；(2)使负载了肿瘤相关抗原的抗原呈递细胞分泌PD
‑
1结合分子和CTLA
‑
4结合分子；或(3)使抗原呈递细胞接触肿瘤相关抗原或其编码序列以及PD
‑
1结合分子和CTLA
‑
4结合分子的编码序列，优...

【专利技术属性】
技术研发人员：莫南德，
申请(专利权)人：上海细胞治疗集团有限公司，
类型：发明
国别省市：