一种柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂及其制备方法和应用，所述柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂的制备方法为：（1）柠檬酸发酵液压滤得柠檬酸菌丝渣，加入离子钙溶液调浆后，得柠檬酸菌丝浆，再经乳化，加入糖蜜、玉米渣蛋白、磷酸氢二钾、硫酸镁和硫酸锰，得到发酵培养基；（2）将产朊假丝酵母种子液、枯草芽孢杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液、植物乳杆菌种子液、粪肠球菌种子液和嗜酸乳杆菌种子液接种于发酵培养基中发酵，待发酵结束，过滤，得到的发酵液，即为柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂。本发明专利技术采用柠檬酸发酵副产物菌丝渣作为原料，经发酵后，得到的饲料添加剂，可有效将菌丝渣中的大分子分解为小分子，更易被动物吸收。更易被动物吸收。更易被动物吸收。

【技术实现步骤摘要】
一种柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及微生物发酵
，具体涉及一种柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂及制备方法和应用。

技术介绍

[0002]中国的柠檬酸产量约占世界总产量的80%，目前柠檬酸生产主要以黑曲霉突变菌株发酵法生产，在柠檬酸生产过程中，每吨柠檬酸产生柠檬酸菌丝渣150 kg
‑
170 kg。柠檬酸菌丝渣含有多种营养成分，其中，总糖约32.6%，粗脂肪约10%，粗纤维约14.5%，粗灰分约21%，还有余量的甲壳素和壳聚糖等，而甲壳素主要存在于细胞壁中，细胞壁中含有20%~22%的甲壳素，甲壳素具有抗菌活性、激活免疫因子，提高免疫力、调节脂肪代谢，降低血脂胆固醇、调节pH值、改善机体内环境等多种生理功能。
[0003]由于柠檬酸菌丝渣中含有多种营养成分，但柠檬酸菌丝渣中甲壳素和纤维素常以大分子的形式存在，不易被动物吸收利用，同时，柠檬酸菌丝渣虽然常作为成年畜禽和反刍动物饲料或饲料添加剂的原料，但目前对柠檬酸菌丝渣作为原料用于水产动物饲料的相关研究较少。

技术实现思路

[0004]针对上述现有技术，本专利技术的目的是提供一种柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂及其制备方法和应用。本专利技术采用产朊假丝酵母、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪肠球菌和嗜酸乳杆菌共同发酵得到微生物饲料添加剂，同时，所述微生物饲料添加剂与水产饲料混合后用于喂养水产动物，其中富含多聚糖、氨基酸、脂肪酸、低分子量甲壳素和壳聚糖营养物质，能更好的被水产动物吸收，同时，能提高水产动物消化能力、免疫能力、促生长能力、水体调节能力。
[0005]为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术的第一方面，提供了一种柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：（1）将柠檬酸发酵液压滤得到柠檬酸菌丝渣，再加入离子钙溶液进行调浆，得到柠檬酸菌丝浆，将柠檬酸菌丝浆乳化后，再加入糖蜜、玉米渣蛋白、磷酸氢二钾、硫酸镁和硫酸锰，经灭菌后得到发酵培养基；（2）将产朊假丝酵母种子液、枯草芽孢杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液、植物乳杆菌种子液、粪肠球菌种子液和嗜酸乳杆菌种子液分别接种于步骤（1）得到的发酵培养基中进行发酵，待发酵结束，过滤，得到的发酵液即为柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂。
[0006]优选的，步骤（1）中，柠檬酸菌丝浆中的固形物的质量分数为10%。
[0007]优选的，步骤（1）中，乳化后柠檬酸菌丝浆的目数为100~200目。
[0008]优选的，步骤（1）中，发酵培养基的组成为：糖蜜5.0份、柠檬酸菌丝浆80份、玉米渣蛋白2.0份、磷酸氢二钾1.0~3.0份、硫酸镁0.1~0.5份和硫酸锰0.01~0.10份。
[0009]优选的，步骤（1）中，发酵培养基的pH为6.5~7.0。
[0010]优选的，步骤（1）中，所述离子钙溶液中Ca
2+
浓度为600~700 mg/mL。
[0011]优选的，步骤（1）中，灭菌温度为115 ℃，灭菌时间为20 min。
[0012]优选的，步骤（2）中，产朊假丝酵母的保藏编号为ACCC 20060，枯草芽孢杆菌的保藏编号为ACCC 60429，地衣芽孢杆菌的保藏编号为ACCC 19372，植物乳杆菌的保藏编号为ACCC11118，粪肠球菌的保藏编号为ACCC 19855，嗜酸乳杆菌的保藏编号为ACCC 11073。
[0013]优选的，步骤（2）中，产朊假丝酵母种子液的接种量为发酵培养基体积的0.5~1.5%，枯草芽孢杆菌种子液的接种量为发酵培养基体积的0.5~1.5%，地衣芽孢杆菌种子液的接种量为发酵培养基体积的0.5~1.5%，植物乳杆菌种子液的接种量为发酵培养基体积的2.0~5.0%、粪肠球菌种子液的接种量为发酵培养基体积的2.0~5.0%，嗜酸乳杆菌种子液的接种量为发酵培养基体积的2.0~5.0%。
[0014]优选的，步骤（2）中，发酵方法为采用好氧
‑
静态发酵模式。
[0015]进一步优选的，好氧
‑
静态发酵处理为：先于33℃、pH为6.0~6.5、搅拌转速为100~150r/min、通风量为0.5~1.5vvm进行好氧发酵，待好氧发酵结束后，调节发酵温度为33℃、pH为6.5，并停止通气和搅拌，进行静态发酵。
[0016]进一步优选的，好氧发酵时间为18~22h。
[0017]进一步优选的，当发酵体系中pH降低至2.5~3.5、每小时产气量小于5mL、总菌落数≥2
×
108cfu/g时结束静态发酵。
[0018]进一步优选的，静态发酵时间为95~105h。
[0019]本专利技术的第二方面，提供了一种柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂。
[0020]本专利技术的第三方面，提供了一种柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂在水产饲料中的应用，包括以下步骤：将柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂加水稀释后，得稀释液，将稀释液与水产饲料拌匀，每五天使用一次。
[0021]优选的，柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂加水稀释2倍。
[0022]优选的，水产饲料和柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂的质量比为100:1。
[0023]本专利技术的有益效果：1.本专利技术采用离子钙溶液和柠檬酸菌丝渣进行调浆、并利用剪切泵对柠檬酸菌丝浆进行乳化，使处理后的柠檬酸菌丝浆更均一稳定，从而，更有利于产朊假丝酵母、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌在含有柠檬酸菌丝浆的培养基中发酵。
[0024]2.本专利技术采用现有的柠檬酸发酵副产物菌丝体废渣为主要原料，产朊假丝酵母、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌协同发酵，制得柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂，一方面，通过微生物发酵产生的淀粉酶、纤维素酶、果胶酶、蛋白酶、脂肪酶和几丁质酶将柠檬酸菌丝渣中的营养成分转化为小分子的多聚糖、氨基酸、脂肪酸、甲壳素和壳聚糖，易被动物体吸收；另一方面，发酵产生的乳酸、短链脂肪酸和乙醇，使其具有较好的诱食性和营养性，同时，甲壳素和壳聚糖可防治甲壳类动物蜕壳不遂症，减少疾病发生率，降低动物的死亡率，另外，枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌对水体调节有良好的效果，制得的微生物饲料添加剂显著提高水产动物消化能力、免疫能力、促生长能力。
[0025]3.本专利技术还采用好氧
‑
静态发酵模式，其中，好氧发酵有利于酵母菌和芽孢杆菌大量繁殖，酵母菌和芽孢杆菌在有氧发酵过程中，可将柠檬酸菌丝渣中大分子的多聚糖、脂肪、蛋白质、维生素分解成小分子，为乳酸菌厌氧静态发酵提供营养物质。
[0026]4.本专利技术制得的微生物饲料添加剂与水产饲料拌匀喂养时，使用45天后，每100尾虾平均增重6.56g，饲料添加剂中的钙离子、甲壳素和壳聚糖可以缩短脱壳周期，提高虾脱壳率，减少脱壳不遂引起的死亡率；饲料添加剂中的益生菌具有改善肠道微环境的效果，对白便病具有良好的防治效果。
附图说明
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将柠檬酸发酵液压滤得到柠檬酸菌丝渣，再加入离子钙溶液进行调浆，得到柠檬酸菌丝浆，将柠檬酸菌丝浆乳化，再加入糖蜜、玉米渣蛋白、磷酸氢二钾、硫酸镁和硫酸锰，经灭菌后得到发酵培养基；（2）将产朊假丝酵母种子液、枯草芽孢杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液、植物乳杆菌种子液、粪肠球菌种子液和嗜酸乳杆菌种子液接种于步骤（1）得到的发酵培养基中进行发酵，待发酵结束，过滤，得到的发酵液即为柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂。2.如权利要求1所述的柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，所述柠檬酸菌丝浆中固形物的质量分数为10%，乳化后柠檬酸菌丝浆的目数为100~200目。3.如权利要求1所述的柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，所述发酵培养基由如下重量份的原料组成：糖蜜5.0份、柠檬酸菌丝浆80份、玉米渣蛋白2.0份、磷酸氢二钾1.0~3.0份、硫酸镁0.1~0.5份和硫酸锰0.01~0.10份；所述发酵培养基的pH为6.5~7.0。4.如权利要求1所述的柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，灭菌温度为115℃，灭菌时间为20min。5.如权利要求1所述的柠檬酸菌丝渣微生物饲料添加剂的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，产朊假丝酵母种子液的接种量为发酵培养基体积的0.5~1.5%，枯草芽孢杆菌种...

【专利技术属性】
技术研发人员：齐圣，王腾飞，宋龙祥，绍伟，孟光兵，赵俊锋，时振，
申请(专利权)人：莱芜泰禾生化有限公司，
类型：发明
国别省市：