一种寡霉素A的提纯方法技术

本发明专利技术涉及一种寡霉素的提纯方法，使用有机溶剂浸泡湿菌渣后用过滤得到浸提液，C18反相制备层析得到层析液，并经过精制得到目标产品。本发明专利技术的提纯工艺步骤少、操作简单，使用溶剂种类少，成本低，适合工业化生产。本方法同时避免了使用硅胶层析和氯仿等不易处理或有毒害的物质。采用本发明专利技术提供的方法提纯的寡霉素A纯度可稳定达到98％以上。A纯度可稳定达到98％以上。

【技术实现步骤摘要】
一种寡霉素A的提纯方法


[0001]本专利技术属于生物制药领域，涉及寡霉素A的提取和纯化，特别涉及一种在发酵培养后提取并纯化寡霉素的方法。

技术介绍

[0002]寡霉素A，来源于淀粉酶产色链霉菌，其结构式如下。寡霉素A是ATP合成酶的抑制剂，抑制氧化磷酸化和所有发生在线粒体耦合膜的ATP依赖性过程。寡霉素A通过阻断其质子通道(Fo亚基)抑制ATP合成，进而影响ADP通过氧化磷酸化转化为ATP。
[0003][0004]CN101368166A记载了一种寡霉素A菌株及其生产方法，其中涉及提取部分为获得菌渣后，使用丙酮或乙酸乙酯浸提，减压蒸馏除去有机溶剂，然后在水相沉淀或通过正己烷
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乙醇体系进行萃取、蒸馏拿到粗品，最后用正己烷
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乙醇体系进行高压制备，再用相同的体系进行沉淀，最后烘干。该技术方案的特点是步骤较长，涉及大量的有机溶剂。
[0005]Masamune.S等人于1960年发表的《Separation and Preliminary Characterization of Oligomy本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种寡霉素A的提纯方法，包括使用有机溶剂浸泡发酵液湿菌渣后过滤得到浸提液，制备层析得到层析液，并经过精制得到目标产品；其特征在于，所述的制备层析为反相填料制备层析。2.一种如权利要求1所述的寡霉素A提纯方法，其包括如下步骤：a.发酵液浸提：取寡霉素A发酵液过滤得湿菌渣，使用有机溶剂浸泡后搅拌并过滤得到浸提液；b.制备层析：将步骤a中得到的浸提液稀释过滤后，使用反相填料高压制备层析得到层析液；c.精制：将步骤b中得到的层析液合并并浓缩，加入打浆溶液打浆并烘干后，得到目标产物。3.一种如权利要求2所述的寡霉素A提纯方法，所述步骤a中使用的有机溶剂为C1～C5的低沸点有机溶剂，所述的有机溶剂选自甲醇、丙酮、乙醇和乙酸乙酯中任一种或两种以上，优选甲醇；和/或，所述步骤a中浸提时间为1～24小时，优选6～8小时；和/或，所述步骤a中菌渣与有机溶剂用量的体积比为1:1～1:10，优选1:1.5～1:3。4.一种如权利要求2所述的寡霉素A提纯方法，所述步骤b中的反相填料为C18填料，所述C18填料的修饰类型选自BP、P、ODS、AQ、Amide，优选为C18和/或，所述步骤b中反相色...

【专利技术属性】
技术研发人员：周陈峰，张扬，吴开凯，张翔，侯宏波，朱家骏，张正，陈斌，
申请(专利权)人：杭州中美华东制药有限公司，
类型：发明
国别省市：