转铁蛋白受体结合蛋白制造技术

本发明专利技术提供通式H1

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】转铁蛋白受体结合蛋白
[0001]交叉引用
[0002]本申请主张对2020年7月30日提交的序列号为63/058908的美国临时专利申请的优先权，并通过引用将其全部并入本文。
[0003]联邦资助声明
[0004]本专利技术是在国家健康研究院授予的批准编号为P50 AG005136和R01 AG063845的政府支持下完成的。政府在本专利技术人具有某些权利。
[0005]序列表声明
[0006]序列表的计算机可读形式通过电子提交方式与本申请一起提交，并通过引用将其全部内容并入本申请。序列表包含在2021年7月19日创建的文件中，文件名为“20
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9775
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WO
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SeqList_ST25.txt”，大小为55kb。

技术介绍

[0007]人转铁蛋白受体(hTfR)通过受体介导的转运作用，将体内铁的主要载体转铁蛋白转运穿过血脑屏障(BBB)。这一过程可用于将治疗有效载荷输送到脑实质，否则将被血脑屏障阻断。因此，hTfR是开发BBB穿越载体的一个有吸引力的候选靶标。

技术实现思路

[0008]在一个方面，本专利技术提供了包含通式H1
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H2
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E1
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H3
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E2
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E3
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H4的转铁蛋白受体结合多肽，其中
[0009]H1、H2、H3和H4各自独立地包含长度在11
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20个氨基酸之间的α螺旋结构域；
[0010]E1、E2和E3各自独立地包含长度为5个氨基酸的β折叠；和
[0011]结构域之间的任选氨基酸接头；
[0012]其中所述多肽结合转铁蛋白受体。
[0013]在一个实施方案中，H1包含与选自SEQ ID NO：1
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8和86的氨基酸序列至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列，或其中H1包含与选自SEQ ID NO：1
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8的氨基酸序列至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。在另一个实施方案中，H2包含与选自SEQ ID NO：9
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18和87的氨基酸序列至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列，其中H2包含与选自SEQ ID NO：9
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18的氨基酸序列至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。在另一个实施方案中，H3包含与选自SEQ ID NO：19
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27和88
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92的氨基酸序列至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列，或其中H3包含与选自SEQ ID NO：19
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27的氨基酸序列至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。在另一个实施方案中，
H4包含与选自SEQ ID NO：28
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39和93
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97的氨基酸序列至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列，或H4包含与选自SEQ ID NO：28
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39的氨基酸序列至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。
[0014]在一个实施方案中，所述多肽包含与选自表1的行(a)
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(t)的单行的H1、H2、H3和H4结构域的氨基酸序列至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。在另一个实施方案中，E1包含SEQ ID NO：63的氨基酸序列，或E1包含选自SEQ ID NO：40
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45的氨基酸序列。在另一个实施方案中，E2包括SEQ ID NO：64的氨基酸序列，或E2包括选自SEQ ID NO：46
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53和98的氨基酸序列或E2包含选自SEQ ID NO：46
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53的氨基酸序列。在另一个实施方案中，E3包含SEQ ID NO：65的氨基酸序列，或E3包含选自SEQ ID NO：54
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62的氨基酸序列。在一个实施例中，所述E1、E2和E3结构域包含与选自表2的行(a)
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(o)的单行的E1、E2、E3结构域的氨基酸序列至少60％、70％、80％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列，其中相对于所述参考结构域的氨基酸替换是保守的氨基酸替换。
[0015]在一个实施方案中，所述多肽包含与选自SEQ ID NO：66
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85或选自SEQ ID NO：66
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79的氨基酸序列至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。
[0016]本公开还提供了编码本公开多肽的重组核酸；包含与启动子可操作连接的本公开的重组核酸的表达载体；包含本公开的多肽、核酸和/或表达载体的宿主细胞；药物组合物，其包含任何本公开的多肽、重组核酸、表达载体或重组宿主细胞和药学上可接受的载体；和用于将多肽、重组核酸、表达载体、重组宿主细胞和/或本公开的药物组合物用于任何合适目的的方法，包括但不限于治疗或限制沙粒病毒感染；提供治疗肿瘤的药物；以及与生物制剂(包括但不限于蛋白质、核酸和抗体治疗剂)等治疗剂的融合，以增加治疗剂的血清半衰期。
附图说明
[0017]图1.计算设计流程(pipeline)。短β折叠基序与目标边缘股线(edgestrand)叠合比对(align)。叠合比对后，对接股线被最小化并与骨架文库中的蛋白中存在的边缘股线匹配。随后设计产生的边到边对接的界面。
[0018]图2(A
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B).人转铁蛋白受体含有适合对接的边缘股线。A)转铁蛋白受体外结构域包含远离转铁蛋白结合位点(椭圆形框)的暴露边缘股线(框)。B)全长新的铁氧还本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种转铁蛋白受体结合多肽，其包含通式H1
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H2
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E1
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H3
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E2
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E3
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H4，其中H1、H2、H3和H4各自独立地包含长度在11
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20个氨基酸之间的α螺旋结构域；E1、E2和E3各自独立地包含长度为5个氨基酸的β折叠；和一个或多个结构域之间的任选氨基酸接头；其中所述多肽结合转铁蛋白受体。2.根据权利要求1所述的转铁蛋白受体结合多肽，其中H1的长度在15至20个氨基酸之间。3.根据权利要求1
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2中任一项所述的转铁蛋白受体结合多肽，其中H1包含与选自SEQ ID NO：1
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8和86的氨基酸序列至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列，或其中H1包含与选自SEQ ID NO：1
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8的氨基酸序列至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。4.根据权利要求1
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3中任一项所述的转铁蛋白受体结合多肽，其中H2中至少40％、50％或60％的残基是疏水的。5.根据权利要求1
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4中任一项所述的转铁蛋白受体结合多肽，其中H2的长度在11
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13个氨基酸之间。6.根据权利要求1
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5中任一项所述的转铁蛋白受体结合多肽，其中H2包含与选自SEQ ID NO：9
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18和87的氨基酸序列至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列，其中H2包含与选自SEQ ID NO：9
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18的氨基酸序列至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。7.根据权利要求6所述的转铁蛋白受体结合多肽，其中粗体的H2残基相对于参考氨基酸序列是保守的。8.根据权利要求1
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7中任一项所述的转铁蛋白受体结合多肽，其中H3的长度在13
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14个氨基酸之间。9.根据权利要求1
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8中任一项所述的转铁蛋白受体结合多肽，其中H3包含与选自SEQ ID NO：19
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27和88
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92的氨基酸序列至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列，或其中H3包含与选自SEQ ID NO：19
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27的氨基酸序列至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。10.根据权利要求1
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9中任一项所述的转铁蛋白受体结合多肽，其中H4的长度在14
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15个氨基酸之间。11.根据权利要求1
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10中任一项所述的转铁蛋白受体结合多肽，其中H4包含与选自SEQ ID NO：28
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39和93
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97的氨基酸序列至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列，或H4包含与选自SEQ ID NO：28
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39的氨基酸序列至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。12.根据权利要求11所述的转铁蛋白受体结合多肽，其中粗体残基相对于参考多肽保守。
13.根据权利要求1
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12中任一项所述的转铁蛋白受体结合多肽，其中所述多肽包含与选自表1的行(a)
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(t)的单行的H1、H2、H3和H4结构域的氨基酸序列至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。14.根据权利要求1
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12中任一项所述的转铁蛋白受体结合多肽，其中所述多肽包含与选自表1的行(a)
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(n)的单行的H1、H2、H3和H4结构域的氨基酸序列至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。15.根据权利要求1
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14中任一项所述所述的转铁蛋白受体结合多肽，其中E1、E2和E3中的每一个中的至少3、4或全部5个氨基酸是疏水的。16.根据权利要求1
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15中任一项所述的转铁蛋白受体结合多肽，其中E1包含SEQ ID NO：63的氨基酸序列。17...

【专利技术属性】
技术研发人员：丹尼，
申请(专利权)人：华盛顿大学，
类型：发明
国别省市：