一种抗CD4抗体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及生物医药技术领域，公开了一种抗CD4抗体及其用途。所述的抗CD4抗体包括重链可变区和轻链可变区，所述的重链可变区具有如下技术特征：1

【技术实现步骤摘要】
一种抗CD4抗体及其用途


[0001]本专利技术涉及生物医药
，特别是涉及一种抗CD4抗体及其用途。

技术介绍

[0002]CD4 T细胞存在功能多样性已被研究者们所熟知。CD8 T细胞在淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(lymphocytic choriomeningitis virus)感染，李斯特菌(Listeria monocytogenes)感染以及移植物排斥反应中发挥细胞毒性作用；而CD4 T细胞被认为可以帮助B细胞产生抗体，增强并维持CD8 T细胞免疫反应，协调一系列抗病原体的免疫反应，以及调节/抑制免疫反应来控制自身免疫性疾病和炎症反应的强度和维持程度。CD4 T细胞是免疫记忆的重要参与者，当其数量大量减少或者功能减退时，宿主就会变得对很多病原体易感。例如，在HIV感染中，当患者血液中CD4 T细胞数量降低至200/mm3时，就很有可能会发生大量机会性感染。
[0003]过继转移经过改造以表达靶向肿瘤细胞表面相关抗原的人工嵌合抗原受体T细胞(Chimeric antigen receptor T cells，CAR
‑
T)是一种革命性的癌症免疫细胞疗法。CAR是人工合成的受体，可以重新定向淋巴细胞，最常见的是T细胞，以识别和杀伤表达特定抗原的靶细胞。近年来，快速发展的CAR
‑
T细胞疗法临床试验积极探索其潜在的应用场景。CAR
‑
T细胞疗法由于其具有持续优化的巨大潜力，如更好的靶点、更好的CAR结构和更高效的制备工艺，因此比传统药物更受关注。
[0004]CAR
‑
T细胞的生产制造包含多个步骤，并且要在整个过程中进行质量控制测试。简单的来说，首先使用白细胞分离术从患者/正常人体内去除血液，分离白细胞，并将剩余的血液重新输回到循环系统，然后将白细胞进行CD4 T细胞和CD8 T细胞分选以富集T细胞，然后将富集得到的T细胞进行激活并通过基因工程方法使其表达特异性的CAR，继续扩增CAR
‑
T细胞达到合适的数量，最后回输至病人体内。
[0005]对于细胞分选来说，抗体是必不可少的，综上所述，开发新的用于分选富集CD4 T细胞的抗CD4抗体具有重要意义。

技术实现思路

[0006]鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种抗CD4抗体及其用途。
[0007]本专利技术目的之一在于提供一种抗CD4抗体，所述的抗CD4抗体包括重链可变区和轻链可变区，所述的重链可变区具有如下技术特征；
[0008]1‑
1)氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR
‑
H1；
[0009]1‑
2)氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的CDR
‑
H2；
[0010]1‑
3)氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的CDR
‑
H3。
[0011]根据本申请的技术方案，所述的重链可变区的氨基酸序列包括：
[0012]A1)如SEQ ID No.4所示的氨基酸序列；
[0013]A2)与SEQ ID No.4所示的氨基酸序列具有至少80％以上同源性、且具有A1)所限
定的氨基酸序列功能的氨基酸序列。
[0014]根据本申请的技术方案，所述重链可变区还包括框架区FR1
‑
FR4：所述框架区FR1的氨基酸序列包括如SEQ ID No.8所示，所述框架区FR2的氨基酸序列包括如SEQ ID No.9所示，所述框架区FR3的氨基酸序列包括如SEQ ID No.10所示，所述框架区FR4的氨基酸序列包括如SEQ ID No.11所示。
[0015]根据本申请的技术方案，所述的轻链可变区具有如下技术特征：
[0016]2‑
1)氨基酸序列如SEQ ID No.5所示的CDR
‑
L1；
[0017]2‑
2)氨基酸序列为YAS的CDR
‑
L2；
[0018]2‑
3)氨基酸序列如SEQ ID No.6所示的CDR
‑
L3。
[0019]根据本申请的技术方案，所述的轻链可变区的氨基酸序列包括：
[0020]B1)如SEQ ID No.7所示的氨基酸序列；
[0021]B2)与SEQ ID No.7所示的氨基酸序列具有至少80％以上同源性、且具有B1)所限定的氨基酸序列功能的氨基酸序列。
[0022]根据本申请的技术方案，所述轻链可变区还包括框架区FR1
‑
FR4：所述FR1的氨基酸序列包括如SEQ ID No.12所示，所述FR2的氨基酸序列包括如SEQ ID No.13所示，所述FR3的氨基酸序列包括如SEQ ID No.14所示，所述FR4的氨基酸序列包括如SEQ ID No.15所示。
[0023]根据本申请的技术方案，所述抗体还包括轻链恒定区和重链恒定区。
[0024]优选地，所述轻链恒定区的核苷酸序列包括如SEQ ID No.18。
[0025]优选地，所述重链恒定区的序列包括如SEQ ID No.19所示。
[0026]本专利技术将所述的抗CD4抗体的编码基因插入表达载体，得到构建体，将所述的构建体导入宿主细胞并进行培养，进行分离纯化，得到所述的抗CD4抗体。
[0027]本专利技术目的之二在于提供一种分离的多肽，所述的多肽包括跨膜域、胞外域及胞内域，所述胞外域包括如上文所述的抗体。
[0028]根据本申请的技术方案，所述的多肽为嵌合抗原受体。
[0029]根据本申请的技术方案，所述的多肽自N端至C端依次包括上文所述的抗CD4抗体、跨膜域、胞内域。
[0030]本专利技术目的之三在于提供与如上文所述的抗CD4抗体或上文所述的多肽相关的生物材料，所述生物材料包括如下中的一种或多种：
[0031]a)编码如上文所述的抗CD4抗体的重链可变区和/或轻链可变区的核苷酸，或编码如上文所述的多肽的核苷酸；
[0032]b)含有a)所述的核苷酸的构建体；
[0033]c)含有a)所述的核苷酸的宿主细胞，或含有b)所述的构建体的宿主细胞。
[0034]根据本申请的技术方案，a)中，编码如上文所述的抗体的重链可变区的核苷酸序列包括如SEQ ID No.16所示。
[0035]根据本申请的技术方案，a)中，编码如上文所述的抗体的轻链可变区的核苷酸序列包括如SEQ ID No.17所示。
[0036]根据本申请的技术方案，b)中，所述的构建体为病毒载体或非病毒载体。
[0037]根据本申请的技术方案，c)中，所述的宿主细胞为T细胞和NK细胞中的一种或两
种。
[0038]本专利技术目的之四在于提供一种抗体偶联物，包括如上文所述的抗CD4抗体和标记物或分离辅助物，所述标记物选自生物素、荧光素、辣根过氧化物酶中的一种或多种；本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗CD4抗体，所述的抗CD4抗体包括重链可变区和轻链可变区，其特征在于，所述的重链可变区具有如下技术特征：1
‑
1)氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR
‑
H1；1
‑
2)氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的CDR
‑
H2；1
‑
3)氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的CDR
‑
H3。2.如权利要求1所述的抗CD4抗体，其特征在于，所述的重链可变区包括1)
‑
2)中的至少一项：1)所述的重链可变区的氨基酸序列包括A1)或A2)：A1)如SEQ ID No.4所示的氨基酸序列；A2)与SEQ ID No.4所示的氨基酸序列具有至少80％以上同源性、且具有A1)所限定的氨基酸序列功能的氨基酸序列；2)所述的重链可变区还包括框架区FR1
‑
FR4：所述框架区FR1的氨基酸序列包括SEQ ID No.8所示，所述框架区FR2的氨基酸序列包括如SEQ ID No.9所示，所述框架区FR3的氨基酸序列包括如SEQ ID No.10所示，所述框架区FR4的氨基酸序列包括如SEQ ID No.11所示。3.如权利要求1所述的抗CD4抗体，其特征在于，所述的轻链可变区具有如下技术特征：2
‑
1)氨基酸序列如SEQ ID No.5所示的CDR
‑
L1；2
‑
2)氨基酸序列为YAS的CDR
‑
L2；2
‑
3)氨基酸序列如SEQ ID No.6所示的CDR
‑
L3。4.如权利要求3所述的抗CD4抗体，其特征在于，所述的轻链可变区包括1)
‑
2)中的至少一项：1)所述的轻链可变区的氨基酸序列包括B1)或B2)：B1)如SEQ ID No.7所示的氨基酸序列；B2)与SEQ ID No.7所示的氨基酸序列具有至少80％以上同源性、且具有B1)所限定的氨基酸序列功能的氨基酸序列；2)所述的轻链可变区还包括框架区FR1
‑
FR4：所述FR1的氨基酸序列包括如SEQ ID No.12所示，所述FR2的氨基酸序列包括如SEQ ID No.13所示，所述FR3的氨基酸序列包括如SEQ ID N...

【专利技术属性】
技术研发人员：石磊，狄升蒙，张世伟，李照润，余学军，孙嘉熙，郭涛，张罕思，曹逸，郑真真，王宇，
申请(专利权)人：华道上海生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：