蛋白稳定剂、试剂盒和保护蛋白的方法技术

本申请公开了蛋白稳定剂、试剂盒和保护蛋白的方法。本申请中，所述蛋白稳定剂包括：牛血清白蛋白(BSA)1～10重量份；非离子表面活性剂0.1～5重量份；多元醇5～40重量份；其他添加剂1～10重量份；和水35～92.9重量份；其中，所述其他添加剂选自糖类添加剂、聚乙烯吡咯烷酮和碳酰二胺中至少一种。本发明专利技术提供的蛋白稳定剂配方简单，组分安全，制造成本低，且适用范围广；添加本发明专利技术提供的蛋白稳定剂的蛋白可常温保存，避免反复冻融与分装，使用方便。使用方便。使用方便。

【技术实现步骤摘要】
蛋白稳定剂、试剂盒和保护蛋白的方法


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，特别涉及蛋白稳定剂、试剂盒和保护蛋白的方法。

技术介绍

[0002]蛋白质制品，例如抗原抗体等，常温保存容易变质失活。为提高蛋白质的保存时间，现有技术中，常使用低温存放、冷冻干燥、提高蛋白质浓度和加入蛋白酶抑制剂等方法使蛋白质在较长的时间内保持活性。低温存放即将蛋白质置于低温冷冻冰箱，该方法可以增加其稳定性，但需要冻融后才可以使用，反复冻融可能使抗体变性，导致抗体形成聚集体，从而降低其结合能力，容易使其降解。冷冻干燥法即将蛋白质使用冻干机冻干形成粉末保存，该方法需要配备由干燥室、制冷系统、真空系统、加热系统和控制系统等组成的大型冻干设备，造价高，且变为粉剂耗时长(约2～3天)，此外低温脱水导致一部分微生物难以净化，可能使细菌和对低温具有抗性的病原体存留在产品中，储存和包装过程中稍遇水分即可能致使蛋白质失活。提高蛋白质浓度需要将蛋白质纯化后进行浓缩，该方法可一定程度上减缓蛋白质变质，但操作繁琐，且纯化条件和浓缩条件不易控制。蛋白酶抑制剂具有毒性，危害健康。
[0003]为克服低温存放、冷冻干燥、提高蛋白质浓度和加入蛋白酶抑制剂等方法的缺陷，常在蛋白制品中添加各种蛋白稳定剂。授权公告号为CN106199007B的中国专利公开了一种蛋白保护剂，包括0.318％磷酸盐(磷酸二氢钠)、0.5％牛血清清蛋白、0.2％吐温、和选自磷酸腺苷(AMP)、肝素钠、MgCl2、聚乙烯吡咯烷酮40(PVP40)、茶多酚、环糊精和K2SO4中任一种或几种的组合，这种保护剂成分复杂，且仅表现在对Hsp90α蛋白质稳定效果较好，不具有普适性。此外，当前市场上在售的蛋白稳定剂大多配方复杂且稳定性不佳，无法在高温、反复冻融、稀释等极端条件下维持蛋白质稳定等缺陷。因此，本领域尚需寻找一种配方简单，成本低廉，并且可稳定多种蛋白质、稳定效果好的蛋白稳定剂。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种蛋白稳定剂，其配方简单、成本低廉、使用方便，可普适性稳定多种蛋白质、且稳定效果好。
[0005]为解决上述技术问题，本专利技术的第一方面提供了一种蛋白稳定剂，所述蛋白稳定剂包括：
[0006][0007]其中，所述其他添加剂选自糖类添加剂、聚乙烯吡咯烷酮和碳酰二胺中至少一种。
[0008]在一些优选的方案中，所述非离子表面活性剂选自曲拉通、聚山梨酯(吐温80)、聚氧乙烯脂肪酸酯、卵磷脂和泊洛沙姆中至少一种，更优选为曲拉通。
[0009]在一些优选的方案中，所述多元醇选自甘油和丙二醇中至少一种，更优选为甘油。
[0010]在一些优选的方案中，所述糖类添加剂选自蔗糖、壳聚糖、海藻糖和甲基葡糖聚醚中至少一种，更优选为蔗糖或海藻糖。
[0011]在一些优选的方案中，所述蛋白稳定剂包括：
[0012][0013]在一些优选的方案中，所述蛋白稳定剂由：
[0014][0015]在一些优选的方案中，所述蛋白稳定剂由：
[0016][0017]在一些优选的方案中，所述蛋白稳定剂由
[0018][0019]在一些优选的方案中，所述蛋白选自NGAL抗原、β2
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MG抗原、TRF抗原、RBP抗原、SAA单抗、PG2单抗、PG1单抗和FSH单抗中至少一种。
[0020]本专利技术第二方面提供了一种稳定液体样本中蛋白的方法，所述方法包括步骤：
[0021]将本专利技术第一方面所述的蛋白稳定剂和含待保护蛋白的液体样本混合。
[0022]在一些优选的方案中，所述的蛋白稳定剂和所述含待保护蛋白的液体样本的混合液中，所述含待保护蛋白的摩尔浓度为0.05～0.3μg/mL，更优选为0.1～0.2μg/mL，例如0.15μg/mL。
[0023]本专利技术第三方面提供了一种试剂盒，所述试剂盒包括本专利技术第一方面所述的蛋白稳定剂。
[0024]本专利技术相对于现有技术而言，至少具有以下优点：
[0025](1)本专利技术提供的蛋白稳定剂配方简单，组分安全，制造成本低，且适用范围广；
[0026](2)本专利技术提供的蛋白稳定剂稳定蛋白效果好，添加本专利技术提供的蛋白稳定剂的蛋白可常温保存，避免反复冻融与分装；
[0027](3)本专利技术提供的蛋白稳定剂使用方便，直接与待保护蛋白样本混匀即可。
[0028]应理解，在本专利技术范围内中，本专利技术的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
附图说明
[0029]一个或多个实施例通过与之对应的附图中的图片进行示例性说明，这些示例性说明并不构成对实施例的限定。
[0030]图1是根据本专利技术测试例1中蛋白稳定剂稳定NGAL抗原实验结果图；
[0031]图2是本专利技术测试例2中蛋白稳定剂稳定RBP抗原实验结果图。
具体实施方式
[0032]本专利技术人在研究中发现，现有的蛋白稳定剂适用范围小，且配方复杂，稳定蛋白的效果不佳。因此，本专利技术人经过大量实验，筛选出一种蛋白稳定剂，包含牛血清白蛋白(BSA)1％～10％；非离子表面活性剂0.1～5％；多元醇5％～40％；其他添加剂1～10％；和水，其中，所述其他添加剂选自糖类添加剂、聚乙烯吡咯烷酮和碳酰二胺中至少一种。该蛋白稳定剂不仅配方简单，制备成本低，而且还可以稳定包含抗原、抗体等多种蛋白，且对各种蛋白的稳定效果均很好，以此完成本专利技术。
[0033]进一步地，专利技术人对配方进行了优化，所述非离子表面活性剂为曲拉通，且其他添加剂选择糖类添加剂，尤其是蔗糖和海藻糖时，稳定蛋白的效果最好。
[0034]本文所用“底物稳定剂CCD”和“抗体稳定剂DS”为市售效果广谱蛋白稳定剂。
[0035]在本专利技术的一些优选的实施方式中提供了所述蛋白稳定剂包括：
[0036][0037]其中，所述其他添加剂选自糖类添加剂、聚乙烯吡咯烷酮和碳酰二胺中至少一种。
[0038]在一些优选的方案中，所述非离子表面活性剂选自曲拉通、聚山梨酯(吐温80)、聚
氧乙烯脂肪酸酯、卵磷脂和泊洛沙姆中至少一种，更优选为曲拉通。
[0039]在一些优选的方案中，所述多元醇选自甘油和丙二醇中至少一种，更优选为甘油。
[0040]在一些优选的方案中，所述糖类添加剂选自蔗糖、壳聚糖、海藻糖和甲基葡糖聚醚中至少一种，更优选为蔗糖或海藻糖。
[0041]在一些优选的方案中，所述蛋白稳定剂包括：
[0042][0043]在一些优选的方案中，所述蛋白稳定剂由：
[0044][0045][0046]在一些优选的方案中，所述蛋白稳定剂由：
[0047][0048]在一些优选的方案中，所述蛋白稳定剂由
[0049][0050]在一些优选的方案中，所述蛋白选自NGAL抗原、β2
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MG抗原、TRF抗原、RBP抗原、SAA单抗、PG2单抗、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蛋白稳定剂，其特征在于，所述蛋白稳定剂包括：其中，所述其他添加剂选自糖类添加剂、聚乙烯吡咯烷酮和碳酰二胺中至少一种。2.根据权利要求1所述的蛋白稳定剂，其特征在于，所述非离子表面活性剂选自曲拉通、聚山梨酯(吐温80)、聚氧乙烯脂肪酸酯、卵磷脂和泊洛沙姆中至少一种，优选为曲拉通。3.根据权利要求1所述的蛋白稳定剂，其特征在于，所述多元醇选自甘油和丙二醇中至少一种，优选为甘油。4.根据权利要求1所述的蛋白稳定剂，其特征在于，所述糖类添加剂选自蔗糖、壳聚糖、海藻糖和甲基葡糖聚醚中至少一种，优选为蔗糖或海藻糖。5.根据权利要求1所述的蛋白稳定剂，其特征在于，所述蛋白稳定剂包括：6.根据权利要求5所述的蛋白稳定剂，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋析文，黄黉，张盈盈，何祖强，
申请(专利权)人：广州达安基因股份有限公司，
类型：发明
国别省市：