没食子酸在预防和治疗炎症性肠病的药物上的应用制造技术

本发明专利技术涉及生物制药技术领域，尤其涉及没食子酸在预防和治疗炎症性肠病的药物上的应用。没食子酸在预防和治疗炎症性肠病的药物上的应用，没食子酸的体内外安全剂量范围分别为为：0

【技术实现步骤摘要】
没食子酸在预防和治疗炎症性肠病的药物上的应用


[0001]本专利技术涉及生物制药
，尤其涉及没食子酸在预防和治疗炎症性肠病的药物上的应用。

技术介绍

[0002]炎症性肠病(IBD)影响着全球350万人，包括溃疡性结肠炎(UC)和克罗恩病。IBD的主要原因是肠道炎症细胞因子的紊乱，其中白细胞介素1β(IL
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1β)和IL
‑
18起核心作用。哺乳动物结肠存在一个多样的微生物生态系统，宿主和微生物群的相互作用影响机体发展。此外，微生物可以帮助宿主建立完善的免疫系统。通常情况下，由于宿主和微生物群之间复杂的联系，两者可以保持互利共生。
[0003]饮食是影响宿主和微生物群相互作用的重要因素。糖类可通过促进黏液降解细菌嗜粘液阿克曼菌和脆弱拟杆菌的富集来促进DSS诱导的结肠炎。高脂肪饮食(HFD)也是IBD的一个危险因素，HFD衍生的游离脂肪酸直接损害肠道免疫系统，增加对肠道上皮损伤的敏感性，游离脂肪酸的这些作用不依赖于肠道细菌。这些结果表明，肠道菌群以及其代谢物对IBD的发展展均有影响。因此，了解膳食成分与微生物代谢的关系对于理解肠道生态动态对饮食的响应至关重要。
[0004]单宁(TA)是一种高分子量水溶性多酚的混合物，存在于绿茶、葡萄、柿子等各种植物中。红酒中也含有大量的单宁。研究表明，单宁单宁可被单宁酶降解为次级代谢产物。在肠道微生物中，单宁酶被证明为微生物群的核心蛋白之一，因为它可以将高分子量的单宁降解为下游次级代谢物。在大多数情况下，没食子酸(GA)被证实是单宁下游的主要代谢产物。此外，TA对肠道细菌具有毒性，肠道微生物激活单宁酶将TA降解为GA被认为是一种细菌“自我保护”的方式。
[0005]然而，TA代谢在IBD中的作用仍在很大程度上是未知的。为此，我们深入研究了TA代谢在IBD中的作用，并提出了本专利技术的没食子酸在预防和治疗炎症性肠病的药物上的应用。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供没食子酸在预防和治疗炎症性肠病的药物上的应用。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：
[0008]没食子酸在预防和治疗炎症性肠病的药物上的应用。
[0009]进一步的，所述没食子酸的安全剂量范围为：0
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50mg/kg。
[0010]本专利技术至少具备以下有益效果：
[0011]本专利技术通过深入研究，发现TA为通过产生GA来发挥其生物学功能，而GA在IBD的发展过程中起着双重作用，这取决于GA的摄入量，进一步研究发现，GA体内的的安全剂量范围为：0
‑
50mg/kg，在该安全剂量范围内可以有效应用于预防和治疗炎症性肠病的药物，且通过抑制p53信号通路改善DSS诱导的肠上皮细胞的损伤，能实现有效的预防和治疗炎症性肠
病。
附图说明
[0012]为了更清楚地说明本专利技术实施例技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0013]图1为TA显示了在DSS诱导的IBD中的双重效应示意图。用不同剂量的TA处理小鼠7天，然后用2.5％的DSS和TA共同处理小鼠3或7天(n＝5/组)。(A)小鼠处理方法。(B)在DSS存在下，TA预处理小鼠的体重变化。(C)GA预处理小鼠的结肠长度变化。(D)GA预处理小鼠的组织学变化。比例尺，100μm。(E)在DSS摄入7天后，TA50预处理小鼠的结肠组织的炎症细胞因子和趋化因子的变化。(F)DSS给药后第3天，TA50预处理后结肠组织炎症相关蛋白的表达。*p<0.05,**p<0.01,****p<0.0001。
[0014]图2为TA诱导的没食子酸富集是TA的作用的原因示意图。收集TA处理后的粪便进行代谢组学研究(n＝5/组)。(A)TA处理和未处理小鼠之间代谢物组成的主成分分析(PCA)。(B)火山图分析明显改变的代谢物。(C)用GA和DSS处理的NCM460细胞的MTT检测。(D)经GA和DSS处理的NCM460细胞中e
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钙粘蛋白的IFA染色。比例尺，50μm。(E)用TA处理小鼠的粪便测定单宁酶活性。(F)HPLC测定GA的含量。*p<0.05,**p<0.01,****p<0.0001。
[0015]图3为GA与TA处理的小鼠的观察结果相似示意图。小鼠在DSS前或与DSS一起给予不同剂量的GA(n＝5/组)。(A)小鼠处理方法。(B)不同剂量GA处理小鼠体重变化。(C)不同剂量TA处理小鼠体重变化。(D)小鼠组织学变化。比例尺，100μm。(E)在DSS摄入后第7天，GA0和GA50处理的小鼠的炎症细胞因子和趋化因子的变化。(F)在摄入DSS后的第7天，WB检测GA0和GA50预处理的小鼠的炎症相关蛋白。(G)在摄入DSS后第7天，WB检测GA0和GA250同时处理的小鼠的炎症相关蛋白。*p<0.05,**p<0.01,****p<0.0001。
[0016]图4中GA显示了对GF小鼠的有益和致病作用示意图。在DSS存在的情况下，用GA50和GA250处理GF小鼠(n＝5/组)。(A)小鼠处理方法。(B)GA50延长了GF小鼠的存活时间。(C)GF小鼠的组织学变化。比例尺，100μm。(D)e
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钙粘蛋白和γ
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H2AX在结肠组织中的表达。
[0017]图5中GA主要通过影响杯状细胞来发挥其作用示意图。小鼠分别喂食GA50和GA250，并在不同时间点收取样本(n＝5/组)。(A)小鼠处理方法。(B)WT小鼠肠道组织的PAS
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Alcine蓝染色和IFA染色。(C)用抗muc2抗体和荧光原位杂交探针检测通用细菌16SrRNA。比例尺，50μm。(D)Ga250处理小鼠的肠道组织的PAS
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Alcine蓝染色和IFA染色。(E)GA250长期处理小鼠的方法。(F)RT
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PCR检测炎症细胞因子和趋化因子。(G)长期GA250处理小鼠的炎症相关蛋白检测，粘蛋白和肠道细菌评估。比例尺，50μm。
[0018]图6为保护剂量的GA通过抑制p53信号通路抑制DSS诱导的细胞损伤，而毒性剂量的GA通过影响细胞周期导致细胞损伤示意图。NCM460细胞分别用GA(50和10μg/ml)处理。然后进行RNA
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Seq分析。(A)DSS处理细胞和对照细胞的KEGG富集通路分析。(B)DSS加保护剂量GA(10μg/ml)和DSS处理的对照细胞的KEGG富集分析。(C)WB检测p53及其下游蛋白。(D)采用MTT检测方法检测p53在DSS诱导的细胞损伤中的作用。(E)毒性剂量GA的KEGG富集途径分析本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.没食子酸在预防和治疗炎症性肠病的药物上的应用。2.根据权利要求1所述的没食子酸在预防和治疗炎症性肠病的药物上的...

【专利技术属性】
技术研发人员：李传根，王勇，贺秋月，谢飞，赵清远，
申请(专利权)人：中国人民解放军陆军军医大学，
类型：发明
国别省市：