一种双RNA多靶标检测引物探针组、检测试剂及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种双RNA多靶标检测引物探针组、检测试剂及检测方法，包括：miR

【技术实现步骤摘要】
一种双RNA多靶标检测引物探针组、检测试剂及检测方法


[0001]本专利技术涉及生物RNA检测及检测智能自动控制领域。具体地，本专利技术涉及一种双RNA多靶标检测引物探针组、检测试剂及检测方法。

技术介绍

[0002]冠心病患者需要高度敏感和特异性的诊断工具来进行适当的诊断；现有的几种经典生物标记物主要用于心梗的诊断，包括肌钙蛋白T(cTnT)，肌钙蛋白I(cTnI)，血清肌红蛋白(Myo)和肌酸激酶同工酶MB(CK
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MB)；肌钙蛋白现在被常规用于心梗的诊断，虽然具有高灵敏性但特异性差，在不是心梗的患者中也发现其升高；此外，现有生物学标志物不能区分肌钙蛋白阴性的不稳定型心绞痛和非冠状动脉性胸痛；这些工具并不理想，寻找用于冠心病的新潜在生物标志物具有积极的临床意义；目前，miRNA的检测都是通过RT
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PCR，检测时间长，通常需要1.5
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3个小时；并且需要专用的荧光PCR仪，仪器价格昂贵；同时PCR需要变性、复性和延伸三个温度，变性；这些极大限制了miRNA在基层医疗、现场快速检测以及家庭本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种双RNA多靶标检测引物探针组，其特征在于，包括：miR
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126和miR
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222检测引物探针组；miR
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126和miR
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222检测引物探针组包括：miR
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126反转录引物SEQ ID NO.1，正向引物SEQ ID NO.2，miR
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126反向引物SEQ ID NO.3和miR
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126探针SEQ ID NO.4；以及miR
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222反转录引物SEQ ID NO.5，miR
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222正向引物SEQ ID NO.6，miR
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222反向引物SEQ ID NO.7和miR
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222探针SEQ ID NO.8。2.一种双RNA多靶标检测试剂，其特征在于，包括：如权利要求1所述一种双RNA多靶标检测引物探针组的双RNA多靶标检测试剂；双RNA多靶标检测试剂为：miR
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126和miR
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222检测试剂；所述miR
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126和miR
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222检测试剂包括：0.5μmol/LmiR
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126反转录引物、0.5μmol/LmiR
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126正向引物、0.5μmol/LmiR
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126反向引物、0.4μmol/LmiR
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126探针、0.5μmol/LmiR
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222反转录引物、0.5μmol/LmiR
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222正向引物、0.5μmol/LmiR
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222反向引物、0.4μmol/LmiR
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222探针、0.025U DNA重组酶、0.025U DNA聚合酶、0.025U单链结合蛋白、4mM氯化镁、25mM氯化钾、1mM dNTP、20mM三羟甲基氨基甲烷和水。3.根据权利要求2所述的一种双RNA多靶标检测试剂，其特征在于，所述双RNA多靶标检测试剂的pH值为8.5
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8.9。4.一种双RNA多靶标检测方法，其特征在于，包括：(1)制备miR
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126和miR
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222检测试剂；(2)样本miR
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126和miR
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222扩增检测。5.根据权利要求4所述的一种双RNA多靶标检测方法，其特征在于，所述步骤(1)制备miR
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126和miR
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222检测试剂包括：按照双RNA多靶标检测试剂组份含量制备miR
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126和miR
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222检测试剂。6.根据权利要求4所述的一种双RNA多靶标检测方法，其特征在于，所述步骤(2)样本miR
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126和miR
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222扩增检测，包括：(2.1)提取外周血样本的总RNA；取200μL冠心病患者血液样本，加入到离心管中并加入600μL裂解液和20μL磁珠，振荡混匀，80℃裂解10min，磁吸附弃上清；加入500μL去蛋白液振荡30sec，磁吸附弃上清；加入500μL漂洗液振荡30sec，磁吸附弃上清，室温晾干5min；加入100μL洗脱液，80℃洗脱5min；磁吸附，吸取上清到一新离心管中，即获...

【专利技术属性】
技术研发人员：王国新，廖滔，陈敏文，
申请(专利权)人：深圳无微华斯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：