一种利用酒酒球菌提取原料香气成分的提取方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种酒酒球菌在提取原料香气成分中的应用及提取方法，属于香料加工技术领域，该酒酒球菌在提取原料香气成分中的应用及提取方法主要包括制备酶制剂、将酶制剂对原料进行酶解制得酶解液，然后利用同时蒸馏萃取的方法提取酶解液中的香气成分；培养酒酒球菌，制备所述酒酒球菌的细胞破碎液，将细胞破碎液固液分离，得到固体，将固体重悬，制得酶制剂；将原料粉碎与缓冲液混合，制得混合液，然后加入酶制剂进行酶解，制得酶解液；采用同时蒸馏萃取的方法，提取酶解液的香气成分，制得香气成分提取液；本发明专利技术能够有效提取原料中的香气成分，尤其是对芳樟醇、紫罗兰酮、苯甲醇、2

【技术实现步骤摘要】
一种利用酒酒球菌提取原料香气成分的提取方法及其应用


[0001]本专利技术属于香料加工
，具体而言，涉及一种利用酒酒球菌提取原料香气成分的提取方法及其应用。

技术介绍

[0002]香气是评价葡萄和葡萄酒品质的关键指标之一，葡萄品种按照香气类型可分为玫瑰香型、草莓香型和中性香型。葡萄浆果中的香气成分按照分子结构进行分类，可分为萜烯类、降异戊二烯类、脂肪族类、芳香族类化合物等。葡萄果实中芳香物质的含量分布为果皮＞果肉＞果汁，葡萄果皮是一种重要的生物基资源，而目前我国对葡萄果皮的利用仍停留在简单的粗加工层面，通常被当作肥料、饲料甚至垃圾处理，利用价值低，充分利用好这一资源具有重要意义。
[0003]茶叶具有多种保健功能，是非常受欢迎的饮料之一，提高茶叶香气成分是增强茶叶感官品质的重要手段。
[0004]β
‑
葡萄糖苷酶是糖苷结合态香气化合物降解的关键酶，能够水解结合于底物末端非还原性的糖苷键，同时释放出葡萄糖和相应的配基。
[0005]近年来，对微生物来源的β
‑
葡萄糖苷酶研究较多，如黑曲霉、酵母菌、酒酒球菌等，黑曲霉中β
‑
葡萄糖苷酶存在食品安全隐患，在食品加工过程中受限；酵母菌中β
‑
葡萄糖苷酶活性较低，并且主要集中于细胞内；而酒酒球菌中β
‑
葡萄糖苷酶在胁迫环境中占据更多优势，β
‑
葡萄糖苷酶的水解活性依赖于相应的糖苷配基结构。
[0006]对现有技术研究发现，酒酒球菌中β
‑
葡萄糖苷酶活性具有菌株差异性，且受糖苷化学结构的影响，不同菌株对糖苷的水解具有选择性，因此所形成的香气特征不同，且目前关于利用酒酒球菌提取香气成分的研究鲜有报道。

技术实现思路

[0007]有鉴于此，本专利技术提供一种利用酒酒球菌提取原料香气成分的提取方法及其应用，酒酒球菌能够提取原料中的香气。
[0008]本专利技术是这样实现的：
[0009]本专利技术的第一方面提供一种利用酒酒球菌提取原料香气成分的提取方法，其中，包括以下步骤：
[0010]S1：培养酒酒球菌，制备所述酒酒球菌的细胞破碎液，将所述细胞破碎液固液分离，得到固体，将固体重悬，制得酶制剂；
[0011]S2：将原料粉碎与缓冲液混合，制得混合液，然后加入所述S1中的所述酶制剂进行酶解，制得酶解液；
[0012]S3：采用同时蒸馏萃取的方法，提取所述S2中所述酶解液的香气成分，制得香气成分提取液。
[0013]其中，重悬是用适当的缓冲液或培养液用离心或沉降等方法得到的固体重新悬
浮。
[0014]在上述技术方案的基础上，本专利技术的一种利用酒酒球菌提取原料香气成分的提取方法还可以做如下改进:
[0015]其中，所述酒酒球菌在中国工业微生物菌种保藏管理中心的菌株编号为CICC 6066。
[0016]其中，S1中所述酒酒球菌的培养方法，包括以下步骤：
[0017]第一步：将酒酒球菌接种至固体培养基，25～30℃培养至长出单菌落；
[0018]第二步：将所述单菌落接种至液体培养基，25～30℃培养48～72h制得种子液；
[0019]第三步：按所述种子液的体积分数0.5～2％接种量接种至液体培养基；
[0020]第四步：在25～30℃的温度条件下培养至OD值为1.4～1.6，制得菌悬液；
[0021]第五步：收集菌体，用质量分数为0.85～0.90％的NaCl溶液洗涤菌体，备用。
[0022]其中，固体培养基为ATB固体培养基；液体培养基为ATB液体培养基；其中；OD值是光密度的缩写，也称为吸光度；吸光度是利用物质的特定吸收光谱来鉴别或测定物质的含量。被测物质可以吸收部分光，并通过吸光度计算被测物质的浓度。
[0023]其中，固态培养基为在液体培养基中加入1.5％～2.0％左右的琼脂，加热至100℃溶解，40℃下冷却并凝固，使其成为固体状态；
[0024]其中，S1中所述细胞破碎液制备方法，包括以下步骤：
[0025]第一步：将菌体悬浮于1
×
PBS缓冲液；
[0026]第二步：将上述溶液在冰浴中进行超声破碎，制得细胞破碎液。
[0027]其中，所述超声破碎的条件为：超声功率为150～200w，超声处理时间为15～30min。
[0028]其中，1
×
PBS缓冲液为0.01M浓度的PBS缓冲液，冰浴的温度为0℃。
[0029]其中，S1中所述酶制剂的制备方法为将固体悬浮于质量分数为0.85～0.90％的NaCl溶液中，制得酶制剂。
[0030]其中，可将固体悬浮于质量分数为0.85～0.90％的NaCl溶液中，制得酶制剂；也可将固体悬浮于与菌悬液同体积的质量分数为0.85～0.90％的NaCl溶液中，制得酶制剂。
[0031]其中，S2的具体步骤包括：
[0032]第一步：原料粉碎过40目筛；
[0033]第二步：将原料与缓冲按原料与缓冲液混合的质量体积比为1～(10～20)g/mL的比例进行混合，按酶制剂与混合液的体积比为1～(5～10)的比例进行混合；
[0034]第三步：在酶解温度为30～50℃、酶解pH为4～6的条件下进行搅拌，使得混合液酶解时间为50～150min。
[0035]其中，缓冲液为柠檬酸盐缓冲液，条件也可酶解时间为100min、酶解温度为40℃、酶解pH为5。
[0036]进一步的，S3中同时蒸馏萃取的方法，包括如下步骤：
[0037]第一步：将S2中的所述酶解液加入沸石并加热至沸腾，第二步：取酶解液体积1/3～1/5的有机溶剂加热至40～60℃，同时蒸馏萃取2～4h；
[0038]第三步：向有机溶剂中加入有机相重量的3～5％的无水硫酸钠，放置1～2h，得到含有香气成分的萃取液；
[0039]第四步：将萃取液在40～50℃条件下浓缩至体积的1/2～1/10，然后再加入同等体积的无水乙醇，在40～50℃条件下浓缩至体积的1/2～1/10，制得香气成分提取液。
[0040]其中，有机溶剂为乙醚、戊烷、二氯甲烷、二氯甲烷的任意一种，优选的，有机溶剂为二氯甲烷。
[0041]本专利技术的第二方面提供一种利用酒酒球菌提取原料香气成分的应用，其中，上述的酒酒球菌在提取原料香气成分中的应用。
[0042]在上述技术方案的基础上，本专利技术的一种利用酒酒球菌提取原料香气成分的应用还可以做如下改进:
[0043]进一步的，所述原料包括葡萄果皮、茶叶的任意一种。
[0044]优选的，葡萄品种为“玫瑰香”葡萄，茶叶品种为铁观音茶叶；葡萄果皮的制备方法为将葡萄果实经过气囊压榨制得葡萄皮渣，将葡萄皮渣自然干燥并去除葡萄籽，制得葡萄果皮。
[0045]其中，茶叶样品的制备方法，包括如下步骤：
[0046](1)将铁观音茶叶经粉本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用酒酒球菌提取原料香气成分的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：培养酒酒球菌，制备所述酒酒球菌的细胞破碎液，将所述细胞破碎液固液分离，得到固体，将固体重悬，制得酶制剂；S2：将原料粉碎与缓冲液混合，制得混合液，然后加入所述S1中的所述酶制剂进行酶解，制得酶解液；S3：采用同时蒸馏萃取的方法，提取所述S2中所述酶解液的香气成分，制得香气成分提取液。2.根据权利要求1所述的一种酒酒球菌在提取原料香气成分中的应用，其特征在于，所述酒酒球菌在中国工业微生物菌种保藏管理中心的菌株编号为CICC 6066。3.根据权利要求1所述的一种利用酒酒球菌提取原料香气成分的提取方法，其特征在于，S1中所述酒酒球菌的培养方法，包括以下步骤：第一步：将酒酒球菌接种至固体培养基，25～30℃培养至长出单菌落；第二步：将所述单菌落接种至液体培养基，25～30℃培养48～72h制得种子液；第三步：按所述种子液的体积分数0.5～2％接种量接种至液体培养基；第四步：在25～30℃的温度条件下培养至OD值为1.4～1.6，制得菌悬液；第五步：收集菌体，用质量分数为0.85～0.90％的NaCl溶液洗涤菌体，备用。4.根据权利要求1所述的一种利用酒酒球菌提取原料香气成分的提取方法，其特征在于，S1中所述细胞破碎液制备方法，包括以下步骤：第一步：将菌体悬浮于1
×
PBS缓冲液；第二步：将上述溶液在冰浴中进行超声破碎，制得细胞破碎液。其中，所述超声破碎的条件为：超声功率为150～200w，超声处理时间为15～30min。5.根据权利要求1所述的一种利用酒酒球菌提取原料香气成分的提取方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡文效，姚彬彬，董经崇，邱磊，赵先炎，
申请(专利权)人：山东中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：