一种酮还原酶在维贝格龙中间体生产中的应用制造技术

本发明专利技术实施例公开了一种酮还原酶在合成(2S,3R)

【技术实现步骤摘要】
一种酮还原酶在维贝格龙中间体生产中的应用


[0001]本专利技术属于一种生物催化方法及应用
，涉及一种酮还原酶在维贝格龙中间体生产中的应用，尤其涉及一种酮还原酶在(2S,3R)
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羟基
‑2‑
(Boc氨基)
‑3‑
苯基丙酸甲酯生产中的应用。

技术介绍

[0002]酮还原酶是一种多用途催化剂，通过醛或酮的对映体选择性还原成对应醇。(R)特异性酮还原酶与(S)特异性酮还原酶具有不同特性，并且这些催化剂在光学活性醇的工业合成中被越来越频繁地用到。旋光性是许多医药和农药活性化合物选择性作用的必要条件，在一些情况下，一个对映体具有有益的药物活性，另一个对映体却具有基因毒性作用。因此，在药用和农药用活性化合物的合成中，需要使用具有所要求的立体特异性的催化剂合成光学活性醇。
[0003]维贝格龙是一种新型、有效、高选择性的β3
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肾上腺素能受体激动剂，一种小分有助于放松逼尿肌，使膀胱能容纳更多的尿液，从而减轻尿频的膀胱过度活动症症状。该药物半衰期长(25
‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种合成(2S,3R)
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羟基
‑2‑
(Boc氨基)
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苯基丙酸甲酯的方法，其特征在于，包括在含酮还原酶的粗酶液和含葡萄糖脱氢酶的粗酶液的存在下，2
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(Boc氨基)
‑3‑
氧代
‑3‑
苯基丙酸甲酯合成(2S,3R)
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羟基
‑2‑
(Boc氨基)
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苯基丙酸甲酯进行不对称还原反应，得到所述(2S,3R)
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羟基
‑2‑
(Boc氨基)
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苯基丙酸甲酯；所述酮还原酶，其来源于Exiguobacterium flavidum；其序列号如SEQ ID NO.1所示；所述葡萄糖脱氢酶的序列号如SEQ ID NO.2所示。2.根据权利要求1所述的合成(2S,3R)
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羟基
‑2‑
(Boc氨基)
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苯基丙酸甲酯的方法，其特征在于，所述的含酮还原酶的粗酶液的制备方法如下：(1)按照SEQ ID NO.1的序列，进行全基因合成，并克隆至pet28a载体中，得到对照蛋白的表达载体28a
‑
S1，然后导入到工程化表达宿主中，构建基因工程菌；(2)将获得的基因工程菌按照5～20％接种量接种于发酵培养基，通气量1.0～3.0vvm，温度30～37℃，搅拌速率300～600rpm，此时设定溶氧为100％，当培养至OD
600
在8.0～16.0，将温度下降至16～25℃，加入5～15g/L乳糖诱导氨基酸脱氨酶的表达，当溶氧突然上升至60％以上，此时开始添加补料培养基，通过溶氧与补料相关联，控制溶氧在25～50％，发酵培养20～24h结束发酵。3.根据权利要求2所述的合成(2S,3R)
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羟基
‑2‑
(Boc氨基)
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苯基丙酸甲酯的方法，其特征在于，所述的工程化表达宿主为大肠杆菌属、酵母菌属和芽孢杆菌属。4.根据权利要求1或2所述的合成(2S,3R)
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羟基
‑2‑
(Boc氨基)
‑3‑
苯基丙酸甲酯的方法，其特征在于，所述的含葡萄糖脱氢酶的粗酶液的制备方法如下：(1)按照SEQ ID NO.2的序列，进行...

【专利技术属性】
技术研发人员：周益峰，王冬冬，周杰，罗烨钦，
申请(专利权)人：杭州乐敦科技有限公司，
类型：发明
国别省市：