检测多种病原体的多重PCR引物探针组合及其检测方法技术

本发明专利技术公开了一种检测多种病原体的多重PCR引物探针组合及其检测方法，所述多重PCR引物探针组合包括SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.90所示的核苷酸序列。通过采用本申请的多重PCR引物探针组合能够对流感嗜血杆菌、单核细胞增生李斯特菌、卡他莫拉菌、大肠埃希菌、脑膜炎奈瑟氏菌、肺炎克雷伯菌、白色念珠菌、百日咳鲍特菌、粪肠球菌、嗜麦芽窄食单胞菌、铜绿假单胞菌、热带念珠菌、肺炎链球菌、嗜肺军团菌、金黄色葡萄球菌、鮑曼不动杆菌、COVID

【技术实现步骤摘要】
检测多种病原体的多重PCR引物探针组合及其检测方法


[0001]本专利技术属于生物医学
，尤其涉及检测多种病原体的多重PCR引物探针组合及其检测方法。

技术介绍

[0002]病原微生物种类繁多，所引起疾病的病原学复杂，临床上可引起过敏、感染、肿瘤甚至死亡，严重威胁人类健康及公共卫生安全。因此，对病原体进行快速、准确和多指标检具有重要意义，不仅可以为临床相关疾病的诊治提供依据，为疾控部门、相关检测单位对未知病原的检测提供基础，还对及时发现、预防和阻断相关疾病的爆发和流行至关重要。
[0003]病原体是指能够侵犯并导致生物体患感染甚至传染病的一类微生物的统称，包含有细菌、真菌、病毒等，以细菌、病毒危害性最大。流感嗜血杆菌是一种常见的革兰氏阴性菌，在人免疫力较低时能够导致呼吸道疾病，可引起儿童细菌性脑膜炎、肺炎，也可侵入血液导致脓毒症，危害人类健康；单核细胞增生李斯特菌作为被世界卫生组织(WHO)所列的四大食源性致病菌之一，可引起严重的人畜共患病，导致新生儿、孕妇和免疫缺陷者患败血症、脑膜炎和肠胃炎等多种疾病；卡他莫拉菌和肺炎链球菌作为本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测多种病原体的多重PCR引物探针组合，其特征在于：所述多重PCR引物探针组合包括SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.90所示的核苷酸序列。2.一种检测多种病原体的多重PCR检测试剂盒，其特征在于：包括权利要求1所述检测多种病原体的多重PCR引物探针组合。3.根据权利要求2所述检测多种病原体的多重PCR检测试剂盒，其特征在于：还包括多重PCR扩增试剂和无核酸酶水。4.一种不以疾病诊断治疗为目的检测多种病原体的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、提取多种病原体的总核酸，备用；S2、将权利要求1所述检测多种病原体的多重PCR引物探针组合分成13个多重PCR反应体系，在配制阳性质控组，将13个多重PCR反应体系中的的引物、探针分别混合，之后将混合后的引物、探针与阳性质控组混合，最后加入EDTA溶液，制得待检测液，备用；S3、将步骤S2制得的待检测液放入实时荧光PCR仪中进行扩增，每个循环实时采集FAM、JOE、CY5、ROX四种荧光信号，S4、根据采集的FAM、JOE、CY5、ROX四种荧光信号，进行检测结果分析。5.根据权利要求4所述的检测多种病原体的方法，其特征在于：所述多重PCR反应体系中针对每条病原体的引物终浓度为0.16uM，FAM荧光探针终浓度为0.05uM，JOE荧光探针终浓度为0.08uM，CY5荧光探针为0.16uM，混合后引物探针在多重PCR体系中添加量为3.5μL。6.根据权利要求4所述的检测多种病原体的方法，其特征在于：所述阳性质控组包括HSV
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2、嗜肺军团菌、热带念珠菌、DNA内参。7.根据权利要求4所...

【专利技术属性】
技术研发人员：李韦霖，张代喜，姬晓雯，伍建，
申请(专利权)人：北京迈基诺基因科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：